邻苯二甲酸二（2-乙基）己酯与双酚A混合染毒对大鼠睾丸损伤及机制研究

发布时间：2020-10-20 14:08

　　 目的随着工业化的进展,塑料已成为现代生活中广泛应用的化学品,作为塑料合成的重要的原材料和增塑剂,双酚A(Bisphenol A,BPA)和邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(Di-(2-ethylhcxyl)phthalate,DEHP)可不断释放到环境中,对机体产生多种不利影响。DEHP和BPA单独作用,可干扰人类的生殖、发育、内分泌、神经、免疫等多个系统的正常功能,受到科学界、监管机构和公众的广泛关注。雄性生殖系统作为DEHP和BPA的重要靶目标,极易受到进入体内的DEHP和BPA的攻击,进而对人类的生殖发育产生严重影响。考虑到实际生活中的环境污染物多为混合物,加之人体暴露途径的多样化,因此对单一污染物毒理效应的研究已不再满足实际需要,针对于多种环境化学物的混合毒性研究便成为亟待解决的课题。氧化应激作为组织损伤的基本诱发因素,在生殖器官损伤中发挥重要作用。本研究通过观察大鼠的生长发育情况和睾丸组织病理变化,测定性激素分泌水平,并从氧化应激损伤等角度入手,研究DEHP和BPA混合染毒对大鼠的睾丸毒性,探讨二者联合作用模式和损伤机制。方法将96只三周龄SD大鼠按照体重随机分成四组,每组24只。三个受试组分别给予 750mg/kgDEHP、100mg/kgBPA、750mg/kgDEHP+100mg/kgBPA,用玉米油配制成相应浓度,阴性对照组给予溶剂玉米油,.以5ml/kg容积连续灌胃染毒6周,1次/天。每组实验动物根据初始体重再随机分为三批,分别在染毒第1周、第3周、第6周处理动物,每批次各组分别处理8只动物。测定大鼠体重、睾丸脏器系数、精子数目、血清性激素睾酮(T)和雌二醇(E2)等指标变化情况,观察睾丸组织病理改变,检测睾丸氧化应激生化指标:丙二醛(MDA)、过氧化氢(H202)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘甘肽过氧化物酶(GSH-Px),以及氧化应激相关基因的表达:SOD、GSH-Px、核因子E2相关因了2(Nrf2)、血红素加氧合酶(HO-1)、Y-谷氨酸半胱氨酸合成酶(Gclc),硫氧还蛋白还原酶(Txnrd)。结果1.DEHP组和D+B组大鼠体重显著低于对照组(P0.05);DEHP组的睾丸脏器系数在染毒第3周和第6周显著低于对照组(P0.05);D+B组的睾丸脏器系数在三个阶段都低于对照组和BPA组,差异具有统计学意义(P0.05)。2.各处理组的精子数目均低于对照组,其中DEHP组和D+B组精子数目明显偏低,差异具有统计学意义(P0.05)。3.D+B组的大鼠T在第3周和第6周都显著低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);BPA组和D+B组大鼠的E2含量在染毒第1周高于对照组(P0.05),其他则无变化。4.DEHP组和D+B组在染毒第1周时曲细精管内出现空泡化,生成精子的相关细胞明显减少;染毒第3周时曲细精管发生萎缩,生殖细胞大部分消失,仅见由Sertoli细胞构成的曲细精管;第6周,DEHP组曲细精管发生萎缩,曲细精管内生殖细胞大部分消失,D+B组变化与DEHP组相同,但比DEHP组严重;BPA在第3周时曲细精管略扩张,第6周曲细精管的生精上皮细胞大部分消失,仅可见少量伸长形精子细胞;各阶段对照组雄生精小管发育良好,呈圆形或椭圆形,细胞致密,可见各期生殖细胞。5.三个处理组的MDA和H202的含量在第1周均出现增高变化,而第3周,仅D+B组的MDA和H202的含量高于对照组,第6周,DEHP组和D+B组MDA含量显著高于对照组(P0.05);D+B组的SOD含量在三个阶段均显著降低,与(P0.05);DEHP组和D+B组的GSH-Px含量则在三个阶段出现不同程度的增高变化,对照组相比差异有统计学意义(P0.05)。6.各处理组SOD1的表达在第1周和第3周都出现明显下降(P0.05),SOD3出现增高变化,三个阶段的D+B组显著高于另外三组,差异具有统计学意义(P0.05);GSH-Px的测定结果也出现和SOD3同样的变化趋势。DEHP组的HO-1在第1周显著高于对照组(P0.05),但Gclc显著低于对照(P0.05);D+B组的Gclc在三个阶段与对照相比都出现显著下降,差异具有统计学意义(P0.05);三个时间段的DEHP组和D+B组的Txnrd含量均显著低于对照组(P0.05);第1周三个处理组的Nrf2含量均显著低于对照组(P0.05),第3周和第6周BPA组的Nrf2含量均显著高于对照组,D+B组均显著低于另外三组,差异具有统计学意义(P0.05)。结论DEHP和BPA单独及混合染毒干扰大鼠的正常发育,导致大鼠睾丸发育不良,睾丸曲细精管萎缩,生精细胞减少;改变大鼠体内T、E2的分泌水平;影响精子发生,造成精子总数下降;诱导机体脂质过氧化,并激活体内的keapl-Nrf2信号通路,氧化应激与睾丸的异常改变关系密切,且混合染毒组表现更为明显;DEHP和BPA联合作用加大了损伤睾丸抗氧化作用系统的程度,破坏机体的氧化应激自稳态能力,进而导致睾丸损伤。
【学位单位】：沈阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2017
【中图分类】：R114
【文章目录】：
中文论著摘要
英文论著摘要
英文缩略语
前言
材料和方法
实验结果
讨论
结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
附录
    参考文献
在学期间科研成绩
致谢
个人简介

【参考文献】

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本文编号：2848783