目的脂类代谢异常常表现为血中胆固醇、甘油三酯、载脂蛋白含量改变,与动脉粥样硬化、高脂血症、糖尿病的发生均有一定关系,体内脂类代谢受胰岛素、胰高血糖素、饮食营养、体内生化酶活性的复杂调控。邻苯二甲酸二乙基己酯(Diethyl hexylphthalate,DEHP)和双酚A(BisphenolA,BPA)均是化工行业常用的原材料。研究显示,二者具有内分泌干扰作用,对机体多个组织、器官或系统造成危害,增加内分泌系统、免疫系统、神经系统和生殖系统疾病的患病风险。因DEHP和BPA工业制品在生活中的广泛应用,在孕妇及儿童体内也能检测到两种物质及其代谢产物,其对健康影响应得到重视。肝脏作为体内重要代谢器官,是各种化学物的首要靶点和代谢场所,因此,研究化学物对肝脏的损害及其相应机制,意义重大。鉴于此,本研究建立初断乳大鼠DEHP和BPA混合接触动物模型,动态观察脂代谢指标变化情况,并从肝脏氧化应激角度探讨脂代谢异常的机制,并观察混合染毒与单独染毒的毒性差异,为更好地保护人群健康提供毒理学依据。方法4周龄无特定病原体级(SPF)健康SD雄性大鼠96只,按照体重随机分成四组,每组24只。分别为阴性对照组、DEHP750 mg/kg组、BPA100 mg/kg组和DEHP 750 mg/kg+BPA 100 mg/kg组,用玉米油配制成相应浓度,阴性对照组给予溶剂玉米油,以5 ml/kg容积连续灌胃染毒6周,每周7 d,1次/天。分别在染毒后第1周、第3周、第6周每组处理8只动物。分离血清检测血脂水平和脂代谢酶活性,取肝脏进行总脂酶、氧化应激指标检测、组织病理学观察、PPARγ、SOD3和GPx mRNA表达检测。在整个实验期间观察大鼠的生长发育等情况变化。生化试剂盒测定血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(L DL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)含量;肝脏中总脂酶:脂蛋白脂酶(LPL)和肝酯酶(HL);肝脏氧化应激指标:丙二醛(MDA)、过氧化氢(H2O2)、谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和过氧化氢酶(CAT)水平。ELISA试剂盒测定血清激素敏感性脂肪酶(HSL)和卵磷脂胆固醇转移酶(LCAT)。RT-PCR法检测脂代谢关键基因PPARy以及抗氧化基因SOD3和GPx的表达。结果1.一般状况:从第2周开始,DEHP组和混合染毒组大鼠体质量增长均显著低于对照组;大鼠肝脏脏器系数在三个阶段DEHP组和混合染毒组显著高于对照组,差异有统计学意义(p0.05)。2.病理检测:染毒第6周DEHP组出现肝细胞坏死,BPA组肝细胞胞浆呈空泡样变,混合染毒组出现严重的炎细胞浸润。3.血清学指标:TC含量第1周在BPA组和混合染毒组升高,第6周3个剂量组均增加;TG含量第1周和第3周DEHP组、混合染毒组降低,第6周仅DEHP组降低;LDL-C含量第1周BPA组及混合染毒组降低、第6周混合染毒组增加;HDL-C含量第1周混合染毒组降低、第3周DEHP组和混合染毒组降低、第6周3个剂量组降低(p0.05)。HSL含量第1周和第6周3个剂量组均下降;LCAT含量第3周BPA组和混合组降低,第6周3个剂量组均下降(p0.05)。4.肝脏总脂酶及关键基因表达:LPL活性第3周DEHP组和BPA组增加,第6周3个剂量组均下降;HL活性第1周混合组降低,并低于两单独染毒组,第3周和第6周DEHP组和混合组降低,且混合组低于BPA组(p0.05)。PPARγ mRNA表达水平第3周混合染毒组、第6周DEHP组和混合染毒组均下降,且第3周混合染毒组低于两单独染毒组(p0.05)。5.肝脏氧化应激及相关基因水平:MDA含量第6周BPA组和混合染毒组升高;H202含量第6周3个剂量组均升高;GSH含量第1周混合染毒组、第3周和第6周混合染毒组、DEHP组均升高;SOD活性第3周DEHP组和混合染毒组、第6周3个剂量组均显著降低;GSH-Px活性第1周混合组升高、第3周和第6周3个剂量组均显著降低;CAT活性第6周DEHP组和混合组升高(p0.05)。SOD3 mRNA第3周和第6周DEHP组和混合染毒组下降,且混合染毒组低于BPA组;GPx mRNA第6周3个剂量组下降(p0.05)。6.血脂水平与氧化应激关系:TC含量在第1周、第3周、第6周分别与MDA含量、H202含量及GSH含量呈正相关,第6周则与SOD和GSH-Px活性呈负相关;TG含量在3个阶段与GSH含量均呈负相关,但与GSH-Px活性第1周正相关、第3周负相关;LDL含量第1周与GSH-Px、GSH呈负相关,第3周与GSH呈正相关,第6周与CAT呈负相关;HDL含量第1周与MDA、GSH-Px呈负相关,第3周与SOD呈正相关,与GSH呈负相关,第6周与GSH-Px、SOD呈正相关,与GSH呈负相关。结论1.DEHP和BPA单独及混合染毒干扰大鼠的正常发育,大鼠肝脏出现肝细胞坏死、胞浆空泡样变、炎细胞浸润等病变。2.DEHP和BPA致大鼠体内血脂水平异常,脂代谢关键基因PPARγ表达受到抑制,血清和肝脏脂代谢相关酶活性降低;肝脏过氧化物增多,抗氧化酶活性下降,抗氧化基因SOD3和GPx受到抑制。3.混合染毒组DEHP和BPA有交互作用,较单独染毒组血脂指标和氧化应激指标均不同程度出现增强或减弱。4.DEHP和BPA对大鼠脂代谢的影响,与其抑制SOD3、GPx基因表达致氧化应激紊乱有关。
【学位单位】：沈阳医学院
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R114
【部分图文】：
实验结果??ＤＥＨＰ与ＢＰＡ混合染毒对大鼠体重和脏器系数的影响??（一）各组大鼠一般情况??染毒期间，对照组活动正常，毛发光泽较好，染毒第４周后，ＤＥＨＰ毒组大鼠毛发出现蓬松，对灌胃有抵触行为，并出现体重增长缓慢（二）各组大鼠体质量的变化??ＤＥＨＰ组和混合染毒组大鼠体重增长均从第２周起低于对照组，差意义（产〇．〇５），而ＢＰＡ组与对照组相比未出现明显差异，且混合第１？４周显著低于ＢＰＡ组，差异具有统计学意义（ｐ＜〇．〇５）（图１）４５０?ｎ??
对照组肝小叶结构正常，肝细胞排列整齐，围绕中央静脉呈放射状排列；ＤＥＨＰ??组肝小叶结构不清，出现明显的肝细胞坏死；ＢＰＡ组肝细胞胞浆空亮，可见弥漫??性肝细胞呈空泡样变；混合染毒组肝索紊乱，出现严重的炎细胞浸润，见图２。??？Ｌ—１?，?ｖ?？?，?．?Ｉ??鱗廳：Ｖ：?义?忽??ＤＥＨＰ?，?ＤＥＨＰ??ＩＨｂ９??１９??
氧化应激指标??脂代谢指标ＧＳＨ－Ｐｘ?ＳＯＤ?ＣＡＴ?ＧＳＨＴＣ?－０．７３４＊＊?－０．３９５＊?０．１７７?０．５４３＊＊ＴＧ?０．２０１?０．２８９?０．１１８?－０．６２５＊＊ＬＤＬ?０．１５３?－０．３１３?－０．３７０＊?０．２５６ＨＤＬ?０．３８０＊?０．５２５＊＊?０．００６?－０．７０７＊＊ｆｔ：?＞＜０．０５，?＂ｐ＜０．０ｌ〇??六、ＤＥＨＰ和ＢＰＡ混合染毒对大鼠肝脏ＰＰＡＲ的影响??（一）各组大鼠肝脏ＰＰＡＲｙｍＲＮＡ表达比较??与对照组相比，ＰＰＡＲｙ?ｍＲＮＡ表达水平第３周混合染和混合染毒组均下降，且第３周混合染毒组低于其余两染有统计学意义（ｐ＜〇．〇５）。??－ＣｏｎｔｒｏｌＢＰ
【参考文献】
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2 杨静;俞捷;许洁;;环境内分泌干扰物暴露与代谢综合征发病风险间关联及可能机制的研究进展[J];环境与职业医学;2016年08期
3 李登辉;张玉敏;马明月;裴秀丛;段志文;;邻苯二甲酸二乙基己酯与双酚A联合染毒对大鼠神经行为影响研究[J];中国职业医学;2015年03期
4 侯鹏高;;动脉粥样硬化与脂代谢紊乱研究进展[J];齐齐哈尔医学院学报;2015年07期
5 蒋磊;徐维平;芮贝贝;陈昊;;邻苯二甲酸二乙基己酯体内代谢和毒性机制研究进展[J];中国药业;2015年05期
6 王强;蔡玉娇;郑月萍;张慧;吴沂芮;张岭;陆荣柱;;双酚A对脂代谢和肥胖的影响及其机制的研究进展[J];中国药理学与毒理学杂志;2014年04期
7 吴桂彬;段志文;马明月;张玉敏;王旭;裴秀丛;;邻苯二甲酸二乙己酯及双酚A联合染毒对大鼠肝脏的影响[J];中国煤炭工业医学杂志;2014年04期
8 方鑫;李海玲;胡月玲;迟宝峰;戴红;;邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯对小鼠肾脏损害及氧化应激机制的研究[J];中国预防医学杂志;2014年01期
9 陈蓉;王以美;汪江山;卢春凤;张凤霞;胡春秀;彭双清;许国旺;;液质联用代谢组学研究多氯联苯和二噁英对大鼠毒性作用[J];环境化学;2013年07期
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1 程雪佳;环境内分泌干扰物宫内暴露对子代小鼠肥胖的影响及作用机制研究[D];北京协和医学院;2013年
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2859486
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