HDAC6在炭黑颗粒致人支气管上皮细胞炎症反应中的作用
发布时间：2020-12-02 11:37
目的:探讨组蛋白去乙酰化酶6在炭黑颗粒诱导支气管上皮细胞炎症反应中的作用。方法:体外培养人支气管上皮细胞（16HBE）,以细胞空白为对照组,分别用12.5、25、50、100μg/ml浓度的炭黑颗粒（Printex90）染毒细胞12、24、36、48 h后,采用Cell Counting Kit-8法（CCK-8）检测细胞活力确定染毒时间。采用HDAC6siRNA预处理16HBE细胞,将实验分为六组,细胞空白对照组、25μg/ml炭黑颗粒组、50μg/ml炭黑颗粒组、HDAC6 siRNA干扰空白组、25μg/ml炭黑颗粒+HDAC6 siRNA干扰组、50μg/ml炭黑颗粒+HDAC6 siRNA干扰组,染毒24 h后,收集染毒细胞和上清液,采用RT-PCR检测HDAC6基因mRNA相对表达水平,WB检测细胞内HDAC6、纤毛内转运蛋白IFT88和自噬体蛋白LC3-Ⅱ等蛋白表达水平,ELISA检测细胞上清液中IL-8、IL-1β、TNF-α、IL-6、TGF-β1和IL-17A等炎性细胞因子的释放量。结果:（1）在染毒各个时间点,炭黑颗粒染毒16HBE细胞后可导致细胞活力明显下降,随...
【文章来源】：武汉科技大学湖北省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
英文缩写
摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 炭黑颗粒对人支气管上皮细胞HDAC6、自噬水平及炎症反应的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要试剂配制
2.1.4 实验方法
2.1.5 统计学分析方法
2.2 结果
2.2.l 不同浓度和时间的炭黑颗粒对16HBE细胞存活率的影响
2.2.2 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内HDAC6mRNA表达的影响
2.2.3 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内HDAC6蛋白表达的影响
2.2.4 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内IFT88蛋白表达的影响
2.2.5 炭黑颗粒染毒对16HBE内细胞自噬体蛋白LC3-Ⅱ蛋白表达的影响
2.2.6 炭黑颗粒染毒诱导16HBE细胞表达炎性细胞因子的水平
2.3 讨论
第3章 HDAC6在炭黑颗粒致人支气管上皮细胞自噬及炎症反应中的调控作用
3.1 材料与方法
3.1.1 主要仪器
3.1.2 主要试剂配制
3.1.3 实验方法
3.1.4 统计学分析方法
3.2 结果
3.2.1 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放HDAC6mRNA表达的影响
3.2.2 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放HDAC6蛋白表达的影响
3.2.3 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放IFT88蛋白表达的影响
3.2.4 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放LC3-Ⅱ蛋白表达的影响
3.2.5 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放各因子水平的影响
3.3 讨论
第4章 结论
第5章 结语与展望
致谢
参考文献
综述：纤毛异常在呼吸道疾病发生过程中的作用
参考文献
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目
【参考文献】：
期刊论文
[1]组蛋白去乙酰化酶6及其选择性抑制剂的研究进展[J]. 刘婷,亓云鹏,宋云龙. 药学进展. 2016(11)
[2]氧化应激与自噬[J]. 吴艳萍,王阳,李雅丽,曹雪芳,李卫芬. 动物营养学报. 2016(09)
[3]吸入染毒纳米级炭黑气溶胶致小鼠肺炎性损伤的研究[J]. 李园园,高峰,解秋艳,牛勇,孟涛,张荣,陈雯,郑玉新. 中华预防医学杂志. 2014 (12)
[4]Role of the tissue microenvironment as a therapeutic target in hepatocellular carcinoma[J]. Bhavna Rani,Yuan Cao,Andrea Malfettone,Ciprian Tomuleasa,Isabel Fabregat,Gianluigi Giannelli. World Journal of Gastroenterology. 2014(15)
[5]IL-17和TGF-β1在支气管哮喘患儿血清及支气管肺泡灌洗液中的变化及临床意义[J]. 蒋鲲,陈和斌,王莹,林家惠,胡艳,方玉蓉. 中国当代儿科杂志. 2013(08)
[6]TGF-β对创伤愈合与瘢痕形成的影响及中药的干预作用[J]. 张爱军,闫志勇. 西北药学杂志. 2013(01)
[7]衣藻、纤毛与“纤毛相关疾病”[J]. 潘俊敏. 中国科学(C辑:生命科学). 2008(05)
硕士论文
[1]28天吸入染毒纳米级炭黑气溶胶致小鼠肺组织损伤及细胞凋亡损伤机制研究[D]. 杨墨.山西医科大学 2017
[2]PM2.5对人支气管上皮细胞毒性作用的初步研究[D]. 丁晓洁.南京医科大学 2014
[3]HDAC6 mRNA在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义[D]. 张峰.泰山医学院 2013
本文编号：2895238
【文章来源】：武汉科技大学湖北省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
英文缩写
摘要
Abstract
第1章 前言
第2章 炭黑颗粒对人支气管上皮细胞HDAC6、自噬水平及炎症反应的影响
2.1 材料与方法
2.1.1 主要仪器
2.1.2 主要试剂
2.1.3 主要试剂配制
2.1.4 实验方法
2.1.5 统计学分析方法
2.2 结果
2.2.l 不同浓度和时间的炭黑颗粒对16HBE细胞存活率的影响
2.2.2 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内HDAC6mRNA表达的影响
2.2.3 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内HDAC6蛋白表达的影响
2.2.4 炭黑颗粒染毒对16HBE细胞内IFT88蛋白表达的影响
2.2.5 炭黑颗粒染毒对16HBE内细胞自噬体蛋白LC3-Ⅱ蛋白表达的影响
2.2.6 炭黑颗粒染毒诱导16HBE细胞表达炎性细胞因子的水平
2.3 讨论
第3章 HDAC6在炭黑颗粒致人支气管上皮细胞自噬及炎症反应中的调控作用
3.1 材料与方法
3.1.1 主要仪器
3.1.2 主要试剂配制
3.1.3 实验方法
3.1.4 统计学分析方法
3.2 结果
3.2.1 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放HDAC6mRNA表达的影响
3.2.2 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放HDAC6蛋白表达的影响
3.2.3 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放IFT88蛋白表达的影响
3.2.4 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放LC3-Ⅱ蛋白表达的影响
3.2.5 HDAC6siRNA对炭黑颗粒诱导16HBE细胞释放各因子水平的影响
3.3 讨论
第4章 结论
第5章 结语与展望
致谢
参考文献
综述：纤毛异常在呼吸道疾病发生过程中的作用
参考文献
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目
【参考文献】：
期刊论文
[1]组蛋白去乙酰化酶6及其选择性抑制剂的研究进展[J]. 刘婷,亓云鹏,宋云龙. 药学进展. 2016(11)
[2]氧化应激与自噬[J]. 吴艳萍,王阳,李雅丽,曹雪芳,李卫芬. 动物营养学报. 2016(09)
[3]吸入染毒纳米级炭黑气溶胶致小鼠肺炎性损伤的研究[J]. 李园园,高峰,解秋艳,牛勇,孟涛,张荣,陈雯,郑玉新. 中华预防医学杂志. 2014 (12)
[4]Role of the tissue microenvironment as a therapeutic target in hepatocellular carcinoma[J]. Bhavna Rani,Yuan Cao,Andrea Malfettone,Ciprian Tomuleasa,Isabel Fabregat,Gianluigi Giannelli. World Journal of Gastroenterology. 2014(15)
[5]IL-17和TGF-β1在支气管哮喘患儿血清及支气管肺泡灌洗液中的变化及临床意义[J]. 蒋鲲,陈和斌,王莹,林家惠,胡艳,方玉蓉. 中国当代儿科杂志. 2013(08)
[6]TGF-β对创伤愈合与瘢痕形成的影响及中药的干预作用[J]. 张爱军,闫志勇. 西北药学杂志. 2013(01)
[7]衣藻、纤毛与“纤毛相关疾病”[J]. 潘俊敏. 中国科学(C辑:生命科学). 2008(05)
硕士论文
[1]28天吸入染毒纳米级炭黑气溶胶致小鼠肺组织损伤及细胞凋亡损伤机制研究[D]. 杨墨.山西医科大学 2017
[2]PM2.5对人支气管上皮细胞毒性作用的初步研究[D]. 丁晓洁.南京医科大学 2014
[3]HDAC6 mRNA在食管鳞癌组织中的表达及其临床意义[D]. 张峰.泰山医学院 2013
本文编号：2895238
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