PKC/ERK信号通路在百草枯致人胚胎神经干细胞增殖过程中的作用

发布时间：2020-12-11 16:16

　　[目的]探讨蛋白激酶C（PKC）/细胞外调节蛋白激酶（ERK）信号通路在百草枯（PQ）调控人胚胎神经干细胞增殖中的作用。[方法]以永生化的人胚胎神经干细胞系（Re Ncell CX）为细胞模型,以终浓度为0、5、25、50、100μmol/L的百草枯处理细胞24 h,采用间接免疫荧光法检测巢蛋白（Nestin）、β-微管蛋白III（β-tubulin III）和胶质纤维酸性蛋白（GFAP）;采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞存活率;分光光度法检测培养上清中乳酸脱氢酶（LDH）活性;5-溴-2-脱氧尿嘧啶（Brd U）掺入法检测细胞增殖能力;流式细胞仪检测荧光强度,以此反映细胞内钙离子浓度,免疫印迹法检测细胞膜PKCα和细胞p ERK1/2蛋白表达。[结果]与对照组比较,25、50、100μmol/L百草枯染毒组的细胞活力出现明显抑制作用,且细胞存活率与百草枯浓度对数值呈负相关（r=-0.96,P<0.05）;50、100μmol/L百草枯染毒组的细胞上清中LDH水平明显升高,差异有统计学意义（P<0.05）;免疫荧光染色显示,随着百草枯染毒浓度的增加,Brd U阳性细胞... 

【文章来源】：环境与职业医学. 2017年01期 第42-48页 北大核心

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂与仪器
    1.2 Re Ncell CX细胞培养与特征鉴定
    1.3 Re Ncell CX细胞的分化潜能鉴定
    1.4 细胞损伤
        1.4.1 细胞相对存活率
        1.4.2 LDH活性测定
    1.5 细胞增殖
    1.6 细胞内钙离子浓度
    1.7 PKCα、p ERK1/2蛋白表达
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 Re Ncell CX细胞特性鉴定
    2.2 百草枯对Re Ncell CX细胞损伤的影响
    2.3 百草枯对Re Ncell CX细胞增殖的影响
    2.4 百草枯对Re Ncell CX细胞内Ca2+浓度的影响
    2.5 百草枯对Re Ncell CX细胞膜PKCα表达的影响
    2.6 百草枯对Re Ncell CX细胞p ERK1/2表达的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]百草枯对体外培养小鼠胚胎神经干细胞增殖的影响[J]. 吕文,常秀丽,吴庆,周志俊.  环境与职业医学. 2011(01)



本文编号：2910838