DHA/EPA构成比调节3T3-L1脂肪细胞功能研究
发布时间：2020-12-22 07:12
目的脂肪组织功能紊乱是NCDs发生发展的重要诱因。N-3PUFAs可调节和改善脂肪组织功能,但新近研究提示DHA和EPA的构成比可影响n-3PUFAs的调节效应。因此本研究以3T3-L1脂肪细胞为研究对象,观察不同DHA/EPA构成比在正常及炎症状态下对脂肪细胞糖脂代谢,脂肪细胞因子表达及分泌的影响,并探究二者构成比对脂肪细胞关键功能位点PPARγ及其相关信号通路的调节及影响,研究结果可为合理摄入膳食n-3PUFAs,防治NCDs提供新的理论依据。方法诱导3T3-L1前体脂肪细胞分化为成熟脂肪细胞,PA构建炎症模型。使用浓度为 100μmol/L,构成比为 3:1、1.5:1、1:1、1:1.5、1:3 的 DHA、EPA 混合物分别作用于正常和炎症状态的脂肪细胞24h，MTT法测定细胞活力度,葡萄糖氧化酶法测定糖消耗,油红O染色法鉴别成熟脂肪细胞并测定TG相对含量。Real time RT-PCR法测定脂联素、TNF-α、MCP-1及PPARγ mRNA相对表达水平,Western blot法测定胞内脂联素、MCP-1、PPARγ、CDK5蛋白表达及其磷酸化水平,ELISA法测定上清...
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ熔解曲线??Ｆｉｇ．２－１?Ｍｅｌｔｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｒｅａｌ?
第三章结果??３．?１?３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞诱导、分化及鉴定??培养３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞（图３－ｌ－ａ）至接触抑制，分次加入诱导剂后，细??胞明显回缩，体积増大，胞内出现脂滴聚集，并逐渐增多，更换全培后２？４ｄ，??分化为成熟脂肪细胞（图３－１－ｂ）；油红０染色鉴定，９０％以上脂肪细胞内含有亮??红色颗粒，并有部分脂滴聚集成团，证明３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞诱导分化成功（图??３－１－ｃ）。??图３－１?３Ｔ３－Ｌ１脂肪细胞诱导分化及鉴定（２００Ｘ?）??Ｆｉｇ．３－１?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?３Ｔ３－Ｌ１?ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ?（２００Ｘ）??注：ａ：?３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞；ｂ：成熟脂肪细胞；ｃ：成熟脂肪细胞油红Ｏ染色鉴定??２６??
时设立ＢＳＡ对照组，观察ＤＨＡ／ＥＰＡ构成比对正常状态３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞活??力度的影响。通过ＭＴＴ染色法对３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞的细胞活力进行测定，??结果如图３－２所示，脂肪酸浓度为１００ｐｍｏｌ／Ｌ时，ＥＰＡ／ＤＨＡ构成比对正常状态??３Ｔ３－Ｌ１脂肪细胞的活力无明显影响。??１５〇ｉ??－１〇°?Ｍ?＾?ｉ?ｒｎｉｆｉ?■?Ａ??ｆ?＿１?：忽■?囊??Ｃｏｎ?３：１?１．５：１?１：１?１：１，５?１：３??图３－２?ＤＨＡ／ＥＰＡ构成比对细胞活力度的影响??Ｆｉｇ?３－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＤＨＡ／ＥＰＡ?ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ??注：Ｉ±ＳＤ，?ｎ＝６??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼油补充对中老年人血清多不饱和脂肪酸构成脂联素水平及抗氧化能力影响的随机对照研究[J]. 宋佳,丁庆,杨波,吕玉珊,欧阳静仪,毛丽梅. 营养学报. 2016(02)
[2]鱼油补充对中老年人血脂及炎性因子影响的随机对照研究[J]. 丁庆,宋佳,杨波,吕玉珊,马丽萍,毛丽梅. 营养学报. 2015(03)
[3]Emerging role of adipokines as mediators in atherosclerosis[J]. Hanrui Zhang,Jian Cui,Cuihua Zhang,Department of Internal Medicine,Medical Pharmacology and Physiology and Nutritional Sciences,Dalton Cardiovascular Research Center,University of Missouri,Columbia,MO 65211,United States. World Journal of Cardiology. 2010(11)
博士论文
[1]膳食n-3脂肪酸与2型糖尿病及其它慢性病的关系及机理研究[D]. 郑钜圣.浙江大学 2014
本文编号：2931362
【文章来源】：南方医科大学广东省
【文章页数】：71 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图２－１?Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ?ＰＣＲ熔解曲线??Ｆｉｇ．２－１?Ｍｅｌｔｉｎｇ?ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ｒｅａｌ?
第三章结果??３．?１?３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞诱导、分化及鉴定??培养３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞（图３－ｌ－ａ）至接触抑制，分次加入诱导剂后，细??胞明显回缩，体积増大，胞内出现脂滴聚集，并逐渐增多，更换全培后２？４ｄ，??分化为成熟脂肪细胞（图３－１－ｂ）；油红０染色鉴定，９０％以上脂肪细胞内含有亮??红色颗粒，并有部分脂滴聚集成团，证明３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞诱导分化成功（图??３－１－ｃ）。??图３－１?３Ｔ３－Ｌ１脂肪细胞诱导分化及鉴定（２００Ｘ?）??Ｆｉｇ．３－１?Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｔｉｏｎ?ａｎｄ?ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?３Ｔ３－Ｌ１?ａｄｉｐｏｃｙｔｅｓ?（２００Ｘ）??注：ａ：?３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞；ｂ：成熟脂肪细胞；ｃ：成熟脂肪细胞油红Ｏ染色鉴定??２６??
时设立ＢＳＡ对照组，观察ＤＨＡ／ＥＰＡ构成比对正常状态３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞活??力度的影响。通过ＭＴＴ染色法对３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞的细胞活力进行测定，??结果如图３－２所示，脂肪酸浓度为１００ｐｍｏｌ／Ｌ时，ＥＰＡ／ＤＨＡ构成比对正常状态??３Ｔ３－Ｌ１脂肪细胞的活力无明显影响。??１５〇ｉ??－１〇°?Ｍ?＾?ｉ?ｒｎｉｆｉ?■?Ａ??ｆ?＿１?：忽■?囊??Ｃｏｎ?３：１?１．５：１?１：１?１：１，５?１：３??图３－２?ＤＨＡ／ＥＰＡ构成比对细胞活力度的影响??Ｆｉｇ?３－２?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ＤＨＡ／ＥＰＡ?ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎｓ?ｏｎ?ｃｅｌｌ?ｖｉａｂｉｌｉｔｙ??注：Ｉ±ＳＤ，?ｎ＝６??２７??
【参考文献】：
期刊论文
[1]鱼油补充对中老年人血清多不饱和脂肪酸构成脂联素水平及抗氧化能力影响的随机对照研究[J]. 宋佳,丁庆,杨波,吕玉珊,欧阳静仪,毛丽梅. 营养学报. 2016(02)
[2]鱼油补充对中老年人血脂及炎性因子影响的随机对照研究[J]. 丁庆,宋佳,杨波,吕玉珊,马丽萍,毛丽梅. 营养学报. 2015(03)
[3]Emerging role of adipokines as mediators in atherosclerosis[J]. Hanrui Zhang,Jian Cui,Cuihua Zhang,Department of Internal Medicine,Medical Pharmacology and Physiology and Nutritional Sciences,Dalton Cardiovascular Research Center,University of Missouri,Columbia,MO 65211,United States. World Journal of Cardiology. 2010(11)
博士论文
[1]膳食n-3脂肪酸与2型糖尿病及其它慢性病的关系及机理研究[D]. 郑钜圣.浙江大学 2014
本文编号：2931362
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