基于纳米探针与ATP发光技术的大肠杆菌快速检测方法研究

发布时间：2021-01-09 11:15

　　近年来,随着我国经济的迅猛发展,温饱已经不是关键,而食品安全逐渐成为人们日益关注的热点,与此同时当下社会中的食品卫生检测手段已无法达到目前时代进步发展对技术的要求,人们对检测手段的更新升级的期望已迫在眉睫,这使得更精确、更准确的检测技术成为一个热门的研究课题。纳米探针技术是日前比较火热的生物传感器前端技术,在抗原抗体检测、微生物识别以及基因工程方面均有广泛的应用。其操作尺度在纳米级,可达到单细胞水平,大大提高了检测的精确度。磁纳米探针更是在微生物识别富集方面起到了重要的作用。ATP生物发光技术是检测细菌数量的一种前沿方法,利用ATP存在的广泛性及其特殊的发光机制可以对一些微生物进行数量检测,该方法大大缩短了检测时间,能够在二十分钟内获取检测结果,具有广泛的应用前景。本文提出了一种基于纳米磁探针技术和ATP生物发光技术来检测食品中大肠杆菌菌落数的生物传感器系统。本设计利用表面修饰特殊抗体的纳米磁球作为探针,通过抗原与抗体之间的特异性结合进行捕获大肠杆菌,最终通过外加磁场对目标细菌富集。之后还是一种检测ATP发光的实验设备,反应过程由单片机控制蠕动泵进行试剂的自动加入,通过光电倍增管将采集... 

【文章来源】：山东师范大学山东省

【文章页数】：73 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

大肠杆菌结构图

作为可以检测单个活细胞的新型微传感器，具有体积小、实现对细胞无伤或微伤测等特性，因此被广泛应用于生物、医学、环境监测等各大领域。磁纳米粒子可场的作用上进行富集，利用这一特征，在其表面结合特殊物质的磁性纳米粒子可细菌的分离提纯及环境净化。免疫磁珠（IMB）技术[18]在细菌的分离提纯思路中开辟了一条新的道路。作为特体的的载体，结合了大肠杆菌的纳米磁性探针在外加磁场力作用下机械地移动以离的目的。纳米磁分离技术与其他方法的结合使用可以用来实现对食品中 E.co实时测量。本课题中，通过酶联免疫反应（生物素-链霉亲和素反应），将表面修饰链霉亲和珠与生物素化的大肠杆菌抗体进行结合制备出免疫磁性纳米探针，作为特异性探抗原抗体反应与大肠杆菌进行捕获结合产生免疫磁珠/抗体-大肠杆菌-纳米金三免疫复合物，探针制备和捕获过程如图 2-1 所示。所有的磁性免疫复合物最终通分离架进行富集。

山东师范大学硕士学位论文发光原理苷（ATP）作为直接功能物质广泛存在于一切活细胞中[19]，A分子及三个相连的磷酸基团组成的核苷酸，其分子结构式如图细菌细胞包含的 ATP 的量是一定的，大约为 1-2fg[20]，并且 A钟内迅速分解，这个发现为利用 ATP 含量来检测

【参考文献】：
期刊论文
[1]6个品种油橄榄幼苗抗寒性及其与抗寒指标的灰色关联度分析[J]. 令凡,焦健,杨北胜,冯震华,吕国敏,苏天凤,朱李春.  四川农业大学学报. 2016(02)
[2]基于温度参数的经验密度模式修正方法[J]. 李勰,唐歌实,李正,李翠兰,刘舒莳.  载人航天. 2015(01)
[3]浅析基于AT89C51矩阵键盘检测的编程技巧[J]. 黄丽英,章敏.  科技创业家. 2013(02)
[4]线反转法矩阵键盘程序设计[J]. 黄忠良.  电脑学习. 2011(01)
[5]荧光分光光度计测定保健食品总抗氧化能力[J]. 赵建,刘璇,文镜.  食品科学. 2010(22)
[6]食品中大肠杆菌检测方法研究进展[J]. 陈玲霞,丁洪强.  疾病监测与控制. 2010(06)
[7]微弱荧光信号检测电路抗噪声能力对时间分辨荧光免疫分析仪测量精度的影响[J]. 王慧锋,秦添.  中国组织工程研究与临床康复. 2009(04)
[8]一种带纹波补偿的高精度PMT直流高压开关电源[J]. 范金友,孟爽,庄其仁.  光电子技术. 2008(01)
[9]基于ADuC834单片机的高精度电压监测系统[J]. 罗云,孙春生,王昌平.  仪表技术与传感器. 2007(10)
[10]ICL7650-CMOS斩波集成运放简介及应用[J]. 文亚凤,赵莲清,刘向军.  现代电子技术. 2006(12)

硕士论文
[1]基于ATP生物发光的菌落总量快速检测系统研究[D]. 刘通.山东师范大学 2015
[2]基于ATP生物发光的弱信号检测技术[D]. 彭超.山东师范大学 2015
[3]便携式菌落数量快速检测系统[D]. 梅旦.山东师范大学 2015
[4]纳米材料在快速检测水体中大肠杆菌的应用和研究[D]. 黄晶晶.华东师范大学 2010



本文编号：2966543