砷暴露对职业工人PANDAR基因及细胞中NEAT1基因表达的影响

发布时间：2021-02-19 09:53

　　[目的]1.分析砷暴露职业工人尿中砷化合物含量,评价砷暴露职业工人机体砷负荷;2.检测PANDAR基因表达;砷暴露工人对DNA甲基化的影响,分析PANDAR基因表达与三种尿砷化合物含量之间的关系;3.检测不同浓度砷暴露对细胞NEAT1基因表达及其甲基化的影响;砷代谢产物对NEAT1基因表达的变化;加入甲基供体后NEAT1基因表达的改变。[方法]1.采用整群抽样的方法,抽取某砒霜厂砷暴露职业工人作为暴露组,同时设置对照组,采集其尿液样本和外周血液样本;2.用HG-coldtrap-AAS法测定iAs、MMA、DMA三种砷化合物含量,计算TiAs、iAs%、MMA%、DMA%、PMI、SMI等砷甲基化指标,砷暴露对职业工人PANDAR基因表达的影响;3.用离心柱法提取外周血液基因组DNA,使用甲基化敏感性高分辨溶解曲线方法检测职业工人砷暴露对PANDAR基因甲基化的影响;4.实时荧光定量检测不同浓度砷暴露对细胞NEAT1基因表达及其甲基化的影响,及职业工人外周血中淋巴细胞的PANDAR基因表达;5.采用t检验及非参数检验方法,分析职业工人砷暴露对PANDAR表达、DNA损伤及甲基化的影响,... 

【文章来源】：昆明医科大学云南省

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

PANDAR基因DNA前1.Skb区域分析结果，存在1个CG区域，蓝色填涂区域

３．９?ＤＮＡ损伤??ＤＮＡ损伤会导致ＤＮＡ聚合酶功能受损和增加编码错误［３８，３９１。ＤＮＡ损伤检??测使用实时荧光定量的方法，其引物的设计在ＰＡＮＤＡＲ基因的外显子上和ｐ－ａｃｔｉｎ??（表１１），用ＡＣＴ值表示其ＤＮＡ损伤的水平，ＡＣｔ＝Ｃｔｉ－Ｃｔｏ，其中Ｃｔｉ为ＰＡＮＤＡＲ??基因的外显子ＣＴ值，Ｃｔｏ为ｐ－ａｃｔｉｎ的ＣＴ值。???表１１?ＤＮＡ损伤引物基本信息???１丨物名称?引物序列?扩増产物（ｂｐ）??ＰＡＮＤＡＲ?上游：ＡＴＴＣＴＴＴＣＡＧＧＡＡＴＧＣＣＧＣＡＧＡＴ?７１??弓丨物＊?下游：ＴＣＴＴＴＡＣＣＡＡＴＴＣＡＴＣＣＴＧＧＣＴＣＴＧ??ｐ－ａｃｔｉｎ?引物上游：ＣＧＧＧＡＡＡＴＣＧＴＧＣＧＴＧＡＣＡＴ?１８３???下游：ＧＡＡＧＧＡＡＧＧＣＴＧＧＡＡＧＡＧＴＧ．???３．１０细胞培养??

ＭＭＡ％?１９．０７（１０．８６－?２６．４６）＊＊?８．７７（６．０４－?１２．５４）??ＤＭＡ％?６４．３６（３０．２２－８１．５７）＊＊?８２．４７（６４．５２－８９．８１）??ＰＭＩ?８６．２８（５６．２８－９４．９４）＊＊?９０．２７（７３．４０－９８．３０）??ＳＭＩ?７６．４６（６２．１０－８８．２２）＊?＊?９０．４９（８５．５７－９３．５１）??＊与对照组相比较，ｐ＜０．０５；?＊＊与对照组相比较，ｐ＜０．０１??３？外周血中ＰＡＮＤＡＲ基因表达以及ＤＮＡ甲基化??采用ｔ检验进行两组间的比较，暴露组中其外周血液中ＰＡＮＤＡＲ基因表达于对照组，其差异具有统计学意义（ｐ＜０．０５）；暴露组中外周血ＤＮＡ损伤水高于对照组，差异具有统计学意义（ｐ＜０．０５）；两组之间，其ＤＮＡ的甲基化无差异。（图２）??＊?＊??

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3040950