miR-101通过靶向Atg4D抑制矽肺大鼠肺泡巨噬细胞自噬的作用研究
发布时间：2021-03-27 03:58
目的采用体外细胞培养的方法,建立SiO2诱导的NR8383细胞染尘模型,探讨miRNA-101（miR-101）对SiO2诱导NR8383自噬水平的影响。方法1模型制备及分组:（1）体内实验:雄性SD大鼠40只,适应性饲养一周后随机分为对照组和模型组,每组各20只。对照组:每只大鼠气管内灌注1.0ml灭菌NaCl溶液,左右气管各0.5ml;模型组:对每只大鼠气管内灌注1.0ml灭菌NaCl溶液与SiO2粉尘混悬液（50mg/ml）,左右支气管各0.5ml。两组分别于造模后3d、7d、14d、28d分批处死留取肺组织。（2）体外实验:生长状态良好的NR8383细胞消化后计数接种于96孔板,分为4组。对照组:NR8383完全培养;SiO2刺激组:NR8383+SiO2（0.05mg/ml）;miR-101干预组:NR8383+LV-rno-mir-101α+SiO2（0.05mg/ml）,培养12h后更换常规培养基,72h观察感染效率。加入SiO2<...
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
显微镜观察NR8383细胞的形态
注：A 为对照组，B 为模型组。图 2 HE 染色观察 NR8383 细胞的形态Fig.2 HE staining to observe the morphology of NR8383 cells1.2.3 Real time-PCR 检测结果1）肺组织中 miR-101 检测结果（1）Real time-PCR 反应结果：对照组和模型组 RNA 样本检测后可A260/A280 比值均在 1.8~2.0 之间，说明提取的 RNA 浓度和纯度符合后续实验求。检测的 miR-101 基因的溶解曲线只有一个峰值，其荧光扩增曲线均为一条滑的 S 型曲线（图 3）。
：A 为对照组，B 为模型组。图 2 HE 染色观察 NR8383 细胞的形态Fig.2 HE staining to observe the morphology of NR8383 cells Real time-PCR 检测结果组织中 miR-101 检测结果（1）Real time-PCR 反应结果：对照组和模型组 RNA 样本检测后/A280 比值均在 1.8~2.0 之间，说明提取的 RNA 浓度和纯度符合后续实检测的 miR-101 基因的溶解曲线只有一个峰值，其荧光扩增曲线均为一 S 型曲线（图 3）。A B
本文编号：3102841
【文章来源】：华北理工大学河北省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
显微镜观察NR8383细胞的形态
注：A 为对照组，B 为模型组。图 2 HE 染色观察 NR8383 细胞的形态Fig.2 HE staining to observe the morphology of NR8383 cells1.2.3 Real time-PCR 检测结果1）肺组织中 miR-101 检测结果（1）Real time-PCR 反应结果：对照组和模型组 RNA 样本检测后可A260/A280 比值均在 1.8~2.0 之间，说明提取的 RNA 浓度和纯度符合后续实验求。检测的 miR-101 基因的溶解曲线只有一个峰值，其荧光扩增曲线均为一条滑的 S 型曲线（图 3）。
：A 为对照组，B 为模型组。图 2 HE 染色观察 NR8383 细胞的形态Fig.2 HE staining to observe the morphology of NR8383 cells Real time-PCR 检测结果组织中 miR-101 检测结果（1）Real time-PCR 反应结果：对照组和模型组 RNA 样本检测后/A280 比值均在 1.8~2.0 之间，说明提取的 RNA 浓度和纯度符合后续实检测的 miR-101 基因的溶解曲线只有一个峰值，其荧光扩增曲线均为一 S 型曲线（图 3）。A B
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