JNK/MAPK信号通路在氯化镉致小鼠原代星形胶质细胞死亡机制的初步研究
发布时间：2021-04-15 05:33
目的:（1）利用体外原代培养的细胞,研究镉对星形胶质细胞的毒性作用;（2）探讨JNK/MAPK信号通路是否参与了镉诱导的星形胶质细胞死亡过程。方法:（1）小鼠大脑皮质星形胶质细胞原代培养:取新生24 h内（Institute of Cancer Research,ICR）小鼠大脑皮质,体外培养至914天,采用胶质纤维酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein,GFAP）免疫细胞化学法鉴定星形胶质细胞;（2）以0、5、10、20、40μmol/L镉染毒0、3、6、9、12、24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;采用c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase,JNK）特异性抑制剂SP600125（终浓度50μmol/L）预处理细胞45 min,给予镉染毒0、3、6、9、12、24 h,倒置相差显微镜观察细胞形态变化;（3）以0、5、10、20、40μmol/L镉染毒9、12 h,MTT法测定氯化镉对星形胶质细胞的毒性作用;Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率;（4）以0、5、10、...
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
原代ulturedfor48培养细胞5d8h（250×）
核呈胞数呈空泡状，数达 95%，图 1 原FigFig不着色（图说明星形胶原代培养细胞g.1 Cerebralg.2 Cerebral图 6）；阴性胶质细胞体胞 48 h（250cortical cellsl cortical cell性对照组细体外原代培养0×）s primary culs primary cu细胞不着色，养成功，可图 2 原代ultured for 48ultured for 5，经计数，可用于后续实培养细胞 5 d8 h（250×）days（250×GFAP 阳性实验。（250×）×）性细
交织成网状（图 4）；原代培养 21 d 以后细胞开始聚集，出现接触抑制现象，部分细胞胞体开始回缩（图5）。3.2 GFAP 免疫细胞化学染色结果GFAP 是星形胶质细胞特有的骨架蛋白，是成熟星形胶质细胞的标志物。GFAP 免疫细胞化学染色，见培养的星形胶质细胞胞浆和突起被染成棕黄色，胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cadmium Activates Reactive Oxygen Species-dependent AKT/mT OR and Mitochondrial Apoptotic Pathways in Neuronal Cells[J]. YUAN Yan,WANG Yi,HU Fei Fei,JIANG Chen Yang,ZHANG Ya Jing,YANG Jin Long,ZHAO Shi Wen,GU Jian Hong,LIU Xue Zhong,BIAN Jian Chun,LIU Zong Ping. Biomedical and Environmental Sciences. 2016(02)
[2]JNK信号通路的研究进展[J]. 李凯,曹让娟,朱志华. 中国实验诊断学. 2015(09)
[3]MAPK信号转导通路及其意义[J]. 高黎,赵志英. 世界最新医学信息文摘. 2015(53)
[4]肾纤维化MAPK相关信号通路及中医药干预的研究进展[J]. 姚兰,李均. 中华中医药杂志. 2015(07)
[5]镉的生殖毒性与血睾屏障结构和功能的关系[J]. 宁巍,廖晓岗,刘亚平. 上海交通大学学报(医学版). 2015(06)
[6]MAPK信号转导通路与神经损伤研究进展[J]. 刘婷婷,张淑萍,覃筱燕,潘瑞远. 中国公共卫生. 2016(02)
[7]氯化镉对大鼠原代星形胶质细胞凋亡的影响[J]. 戈果,周静,谢骐骥,姚云,罗道朋,余资江. 环境与健康杂志. 2015(02)
[8]大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究[J]. 郭慧,毛萌,俞丹,周晖,童煜. 中国当代儿科杂志. 2014(12)
[9]Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较[J]. 张伟,梁智辉. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(11)
[10]应用流式细胞仪检测细胞凋亡的4种方法的比较[J]. 范宁娟,项萍,段敏. 安徽农业科学. 2014(32)
博士论文
[1]DNM1L蛋白介导的线粒体自噬在镉致肝脏毒性中的作用研究[D]. 皮会丰.第三军医大学 2015
[2]镉致大鼠神经细胞凋亡的线粒体途径及NAC的保护作用[D]. 江辰阳.扬州大学 2014
硕士论文
[1]镉对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞的毒性损伤及NAC保护效应的研究[D]. 张英.扬州大学 2009
本文编号：3138738
【文章来源】：贵州医科大学贵州省
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
原代ulturedfor48培养细胞5d8h（250×）
核呈胞数呈空泡状，数达 95%，图 1 原FigFig不着色（图说明星形胶原代培养细胞g.1 Cerebralg.2 Cerebral图 6）；阴性胶质细胞体胞 48 h（250cortical cellsl cortical cell性对照组细体外原代培养0×）s primary culs primary cu细胞不着色，养成功，可图 2 原代ultured for 48ultured for 5，经计数，可用于后续实培养细胞 5 d8 h（250×）days（250×GFAP 阳性实验。（250×）×）性细
交织成网状（图 4）；原代培养 21 d 以后细胞开始聚集，出现接触抑制现象，部分细胞胞体开始回缩（图5）。3.2 GFAP 免疫细胞化学染色结果GFAP 是星形胶质细胞特有的骨架蛋白，是成熟星形胶质细胞的标志物。GFAP 免疫细胞化学染色，见培养的星形胶质细胞胞浆和突起被染成棕黄色，胞
【参考文献】：
期刊论文
[1]Cadmium Activates Reactive Oxygen Species-dependent AKT/mT OR and Mitochondrial Apoptotic Pathways in Neuronal Cells[J]. YUAN Yan,WANG Yi,HU Fei Fei,JIANG Chen Yang,ZHANG Ya Jing,YANG Jin Long,ZHAO Shi Wen,GU Jian Hong,LIU Xue Zhong,BIAN Jian Chun,LIU Zong Ping. Biomedical and Environmental Sciences. 2016(02)
[2]JNK信号通路的研究进展[J]. 李凯,曹让娟,朱志华. 中国实验诊断学. 2015(09)
[3]MAPK信号转导通路及其意义[J]. 高黎,赵志英. 世界最新医学信息文摘. 2015(53)
[4]肾纤维化MAPK相关信号通路及中医药干预的研究进展[J]. 姚兰,李均. 中华中医药杂志. 2015(07)
[5]镉的生殖毒性与血睾屏障结构和功能的关系[J]. 宁巍,廖晓岗,刘亚平. 上海交通大学学报(医学版). 2015(06)
[6]MAPK信号转导通路与神经损伤研究进展[J]. 刘婷婷,张淑萍,覃筱燕,潘瑞远. 中国公共卫生. 2016(02)
[7]氯化镉对大鼠原代星形胶质细胞凋亡的影响[J]. 戈果,周静,谢骐骥,姚云,罗道朋,余资江. 环境与健康杂志. 2015(02)
[8]大鼠大脑皮层星形胶质细胞体外培养改良方法的研究[J]. 郭慧,毛萌,俞丹,周晖,童煜. 中国当代儿科杂志. 2014(12)
[9]Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较[J]. 张伟,梁智辉. 细胞与分子免疫学杂志. 2014(11)
[10]应用流式细胞仪检测细胞凋亡的4种方法的比较[J]. 范宁娟,项萍,段敏. 安徽农业科学. 2014(32)
博士论文
[1]DNM1L蛋白介导的线粒体自噬在镉致肝脏毒性中的作用研究[D]. 皮会丰.第三军医大学 2015
[2]镉致大鼠神经细胞凋亡的线粒体途径及NAC的保护作用[D]. 江辰阳.扬州大学 2014
硕士论文
[1]镉对体外培养大鼠大脑皮质神经细胞的毒性损伤及NAC保护效应的研究[D]. 张英.扬州大学 2009
本文编号：3138738
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/yufangyixuelunwen/3138738.html
