DNA发夹结构自组装信号放大在产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌检测中应用的研究

发布时间：2021-04-15 08:25

　　蜡样芽孢杆菌是食品常见的致病菌,由其引起的食物中毒通常会出现两种临床症状——呕吐和腹泻。呕吐与热稳定的呕吐毒素有关,而腹泻则是由于部分菌株产生了多种肠毒素。与肠毒素不同,呕吐毒素具有较强的耐受性（耐酸、耐热、耐蛋白酶酶解）,由产呕吐毒素的蜡样芽孢杆菌产生。有研究表明,当食物中仅存在10³ CFU/g产呕吐毒素蜡样芽孢杆菌时,就可引起人呕吐,甚至死亡。因此,应建立快速简便的蜡样芽孢杆菌检测方法,以有效避免和控制因食用被该菌污染的食物而引起中毒事件的发生。DNA发夹结构自组装反应是指无需酶催化,DNA链即可在吉布斯自由能或位形熵的推动下自行组装,实现信号级联放大的杂交反应。该方法因操作简便、选择性多、反应稳定而在现代分析领域中被广泛关注。本研究为了缩短检测时间,进一步提高灵敏度,建立了基于DNA发夹结构自组装信号放大方法,并结合流式微球技术、氧化石墨烯荧光传感器用于检测牛奶加标样中产呕吐毒素的蜡样芽孢杆菌。各章内容分述如下:第一章综述了DNA发夹结构自组装信号放大策略应用的研究进展。第二章首先建立了基于杂交链式反应（HCR）-流式微球分析技术用于检测产呕吐毒素蜡样芽孢... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

基于核酸信号放大策略分类Figure1-1Theclassificationofsignalamplificationbasedonnucleicacid

图 1-2 HCR 原理图Figure 1-2 The principle of HCR.2 催化发夹型 DNA 自组装反应催化发夹型 DNA 自组装反应（catalyzed hairpin assembly，CHA）是在 HCR上发展起来的一种新型的由自由能推动的发夹型 DNA 组装方式。与 HCR，CHA 反应中的目标链可以被置换出来并引发下一轮反应，在整个反应中类似催化剂的作用。根据放大方式不同，CHA 可分为线性放大型和指数放两种[9]，线性放大型 CHA 中发夹型探针通常被目标链“激活”后依次进行自，并置换出目标链，生成稳定的线性双链 DNA 结构，置换出来的靶标继续杂交反应，使检测信号得到循环放大[10]（如图 1-3），而指数放大型 CHA夹型探针被目标 DNA 催化自组装生成中间物，该中间物又可“激活”下一轮探针同步进行自组装[11]，从而使检测信号得到指数式放大（如图 1-4）。在A 反应中，被目标链“激活”后，发夹型探针间进行组装，这不仅可以增强目

CHA原理图

【参考文献】：
期刊论文
[1]核酸工具酶辅助的信号放大技术在生物分子检测中的应用[J]. 苏晨,吉邢虎,何治柯.  分析科学学报. 2016(02)
[2]一起由蜡样芽胞杆菌引起食物中毒的流行病学分析[J]. 杨冬梅,渠怡帆.  世界最新医学信息文摘. 2015(02)
[3]基于石墨烯的光学生物传感器的研究进展[J]. 高原,李艳,苏星光.  分析化学. 2013(02)
[4]一起蜡样芽孢杆菌引起的食物中毒调查分析[J]. 刘成风,胡佳,丁燕,袁奋,李英娇.  疾病预防控制通报. 2013(01)
[5]滚环扩增技术及其在生物分子诊断中的应用[J]. 周小明,邢达.  激光生物学报. 2011(06)

硕士论文
[1]基于DNA自组装的纳米金比色检测DNA新方法研究[D]. 吴志伟.青岛科技大学 2015
[2]基于DNA催化颈环自组装致病菌检测新方法研究[D]. 陈文红.重庆医科大学 2015



本文编号：3138983