亚砷酸钠对HaCaT细胞DNA甲基转移酶的影响及N-乙酰半胱氨酸的干预效应

发布时间：2021-04-26 22:11

　　[背景]砷暴露可致人皮肤病变,砷所致的DNA甲基化改变是其主要的致病机制之一,但砷如何引起DNA甲基化改变目前尚未明确。[目的]本研究以永生化的人皮肤角质形成细胞（HaCaT）为研究对象,检测亚砷酸钠（NaAsO₂）暴露对HaCaT细胞DNA甲基转移酶（DNMTs）m RNA和蛋白表达水平的影响,并探讨砷所致氧化应激与其所致DNMTs mRNA和蛋白表达水平改变之间的关联。[方法]给予HaCaT细胞不同浓度的NaAsO₂(0、0.625、1.25、2.50μmol·L^-1)处理,干预组给予10.0μmol·L^-1抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）预处理4 h后加入2.50μmol·L^-1 NaAsO₂,染毒时间为72 h。应用免疫荧光法检测细胞活性氧（ROS）含量,生化法检测细胞内丙二醛（MDA）含量,实时荧光定量PCR法检测细胞DNMT1、DNMT3a和DNMT3b mRNA水平,Western blotting法检测DNMTs蛋白水平。[结果]不同浓度... 

【文章来源】：环境与职业医学. 2020,37(03)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂和仪器
    1.2 细胞培养与染毒
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 染毒浓度选择
    1.3 NAC抗氧化处理
    1.4 ROS检测
    1.5 MDA检测
    1.6 RT-PCR法检测DNMTs mRNA表达
    1.7 Western blotting检测DNMTs蛋白表达
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 NaAsO2的毒性效应
        2.1.1 ROS
        2.1.2 MDA
        2.1.3 DNMTs基因m RNA
        2.1.4 DNMTs蛋白
    2.2 NAC的干预效应
        2.2.1 ROS
        2.2.2 MDA
        2.2.3 DNMTs基因mRNA及蛋白
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]DNA甲基化基因DNMT1的研究进展[J]. 黄滔,周兴路,毛曦轲,苏天宇,陈晨晨,吴志浩.  现代肿瘤医学. 2019(14)
[2]砷致氧化损伤与p53和p16基因启动子区甲基化的关联研究[J]. 韩雪,马璐,李军,黄晓欣,张爱华.  环境与健康杂志. 2017(07)
[3]抗氧化剂对砷诱导人膀胱上皮细胞氧化应激相关通路的影响[J]. 王惠惠,朱佳玉,陈锋,孙贵范,席淑华.  环境与健康杂志. 2016(03)
[4]砷对DNA甲基化影响的研究进展[J]. 张洁,木晓丽,王晓雪,黄清育,田美平,刘良坡,申河清.  环境与健康杂志. 2014(03)



本文编号：3162208