H19/SAHH/DNMT1在苯并[a]芘致BEAS-2B细胞DNA损伤中的作用

发布时间：2021-05-09 13:37

　　目的:研究长链非编码RNA（LncRNA）H19、S-腺苷高半胱氨酸水解酶（SAHH）以及DNA甲基转移酶1（DNMT1）在苯并[a]芘（BaP）所致BEAS-2B细胞8-羟基鸟嘌吟DNA糖苷酶1（OGG1）甲基化、DNA氧化损伤及细胞周期阻滞的影响。方法:通过20siRNA20技术构建六种低表达（si-H19,si-SAHH,si-DNMT1,si-H19+si-SAHH,si-H19+si-DNMT1,si-SAHH+si-DNMT1）细胞模型,均设有阴性序列对照组。通过采用Western20blot检测DNMTs蛋白表达水平,通过采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测DNMT1活性及8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量,通过采用免疫共沉淀（Co-IP）检测SAHH和DNMT1的相互作用,通过免疫荧光（IF）观察H19、SAHH及DNMT1的分布,通过采用焦磷酸测序法检测OGG1基因甲基化水平,通过采用流式细胞术（FCM）检测细胞周期分布。结果:染毒后,BEAS-2B细胞中DNMT1的表达量升高（P<0.05）,在32μmol/L20BaP染毒24h时较溶剂对照升高了2058%... 

【文章来源】：山西医科大学山西省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

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前言
1. 材料方法
    1.1 实验细胞株
    1.2 试剂和耗材
    1.3 主要仪器
    1.4 主要溶液的配置
    1.5 实验方法
    1.6 统计学方法
    1.7 技术路线图
2 结果
    2.1 BaP染毒致BEAS-2B细胞内DNMTs表达水平的剂量效应与时间效应
    2.2 H19/SAHH对BaP致BEAS-2B细胞内DNMTs的影响
    2.3 H19对BaP致BEAS-2B细胞内SAHH与DNMT1相互作用的影响
    2.4 H19/SAHH/DNMT1对BaP致BEAS-2B细胞DNA损伤的影响
3 讨论
    3.1 H19/SAHH参与调控DNMT1的表达和活性
    3.2 H19参与调控SAHH和DNMT1的结合
    3.3 H19/SAHH/DNMT1参与调控DNA损伤
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
个人简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]苯并[a]芘对人支气管上皮细胞H19与SAHH表达的影响[J]. 傅晔,杨瑾,王武斌,张红杰,刘艳丽,牛莹莹.  环境与职业医学. 2018(04)
[2]RING2对苯并[a]芘导致的人支气管上皮细胞BPDE-DNA加合物及CHK1的影响[J]. 王武斌,张红杰,刘艳丽,杨瑾.  环境与职业医学. 2017(03)



本文编号：3177396