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金针菇多糖通过TLR4和MR介导的MAPK/NF-κB通路诱导RAW264.7细胞免疫应答

发布时间:2021-06-12 06:01
  金针菇(Flammulina velutipes)是一种常见的食用真菌,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等生物活性。多糖是金针菇最重要的活性物质之一。金针菇多糖(Flammulina velutipes polysaccharide,FVP)的免疫调节活性已有相关的研究和报道,但关于巨噬细胞上金针菇多糖的受体的研究却相对较少。因此,本研究的目的是使用金针菇多糖(FVP)处理小鼠单核巨噬细胞RAW264.7,探究RAW264.7细胞上FVP受体和FVP发挥免疫调节作用的机制,以期为金针菇多糖免疫调节功能的研究提供一定的实验基础和理论依据。研究方法:使用MTT法检测FVP对RAW264.7细胞活性的影响,中性红法检测FVP对RAW264.7细胞吞噬活性的影响,显微镜观察FVP处理后细胞形态变化,Griess法检测RAW264.7细胞分泌NO水平,ELISA法检测RAW264.7细胞培养上清中细胞因子(TNF-α和IL-1β)水平,荧光显微镜和流式细胞术检测RAW264.7细胞上FVP受体,qPCR法检测免疫相关因子iNOS、TNF-α和IL-1βmRNA以及TLR4和MR mRNA表达水平,W... 

【文章来源】:吉林农业大学吉林省

【文章页数】:60 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

金针菇多糖通过TLR4和MR介导的MAPK/NF-κB通路诱导RAW264.7细胞免疫应答


RAW264.7细胞总RNA电泳图

细胞活性,无细胞,毒性,细胞


第三章 结果分析 RAW264.7 细胞的激活作用 RAW264.7 细胞无细胞毒性图 3.1 所示,与对照组相比,1 μg/mL LPS 能够刺激 RA0%),并具有极显著差异(p<0.01)。除 200μg/mLFVP 实验浓度的 FVP 对 RAW264.7 细胞无细胞毒性,浓度为显著刺激 RAW264.7 细胞增殖(111.79%),并具有统计激效果不如阳性对照组。根据此实验结果,我们选取 12 FVP 进行后续实验。

吞噬活性,细胞吞噬,对照组,细胞


P 对 RAW264.7 细胞吞噬活性的影响。与对照组相比:*表示 P<0.P<0.01,n=3。ffect of FVP on the phagocytosis of RAW264.7 cells. Vergroup:* P<0.05,** P<0.01,n=3.响 RAW264.7 细胞形态微镜观察结果见图 3.3,对照组的 RAW264.7 细胞呈圆形状态;LPS 和 FVP 处理组细胞状态发生改变,由圆形变且部分细胞长出了伪足。随着 FVP 浓度逐渐增大,这种组细胞变化最大。该结果表明,FVP 可以使正常状态下生改变。

【参考文献】:
期刊论文
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[10]黑木耳多糖提取工艺优化及其对小鼠巨噬细胞功能的影响[J]. 许海林,吴小勇,聂少平,黄延盛,唐青涛.  食品科学. 2016(10)

硕士论文
[1]五种食用菌不同提取物的免疫活性比较及理化特性分析[D]. 姜玥.合肥工业大学 2013



本文编号:3226090

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