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不同喂养方式婴儿肠道菌群分布特征的初步研究

发布时间:2017-04-23 18:02

  本文关键词:不同喂养方式婴儿肠道菌群分布特征的初步研究,由笔耕文化传播整理发布。


【摘要】:目的:通过对肠道双歧杆菌计数及基于ERIC-PCR指纹图谱分析技术探讨不同喂养方式健康婴儿肠道菌群分布特征。方法:62例30~120d健康婴儿作为研究对象,按喂养方式不同分为:母乳喂养、国产奶粉喂养、进口奶粉喂养及混合喂养四组。采集婴儿新鲜粪便标本。一份通过厌氧法分离培养并计数肠道双歧杆菌。另一份提取肠道细菌总DNA,通过ERIC(肠杆菌基因间共有序列)-PCR指纹图谱分析法寻找不同组间差异条带;回收差异条带并进行克隆、测序;用Blast对所获序列进行同源菌检索及其编码蛋白的功能分析。结果:母乳喂养组与混合喂养组婴儿肠道双歧杆菌活菌数(9.10±1.33cfu/g;8.62±1.35cfu/g)高于国产奶粉及进口奶粉喂养组(7.62±1.22cfu/g;7.32±0.80cfu/g,P0.05);而母乳与混和喂养组之间及两个奶粉喂养组之间无显著差异。所有个体肠道菌群ERIC-PCR指纹图谱条带丰富,不同组间ERIC-PCR条带对比分析发现两条差异条带(A:1100bp;B:1000bp),其中A条带主要见于母乳、国产奶粉及混合喂养组婴儿,B条带主要见于进口奶粉喂养组婴儿;测序及Blast分析结果显示,A、B克隆各获得两个序列(A1/A2;B1/B2),该四个序列的同源菌均为长双歧杆菌;A序列编码产物为糖代谢相关酶类;B序列编码产物为蛋白代谢相关酶类。结论:母乳及混合喂养婴儿肠道中双歧杆菌数量多于奶粉喂养婴儿;国产奶粉喂养婴儿肠道中菌群分布更接近于母乳喂养婴儿。
【关键词】:婴儿 肠道菌群 喂养方式 ERIC-PCR 双歧杆菌
【学位授予单位】:青岛大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R174.4
【目录】:
  • 摘要2-3
  • Abstract3-7
  • 引言7-9
  • 第一章 材料和方法9-20
  • 1.1 材料9-12
  • 1.1.1 研究对象9
  • 1.1.2 实验菌种9
  • 1.1.3 试剂9
  • 1.1.4 主要实验仪器9-10
  • 1.1.5 主要试剂的配置10-12
  • 1.2 方法12-20
  • 1.2.1 标本采集12
  • 1.2.2 肠道双歧杆菌分离培养、鉴定及计数12-13
  • 1.2.3 ERIC-PCR13-16
  • 1.2.4 差异条带克隆、测序及功能分析16-19
  • 1.2.5 统计学方法分析19-20
  • 第二章 结果20-29
  • 2.1 双歧杆菌分离培养、鉴定及计数20-22
  • 2.1.1 双歧杆菌分离培养、鉴定20-21
  • 2.1.2 双歧杆菌计数21-22
  • 2.2 不同喂养方式婴儿肠道菌群ERIC-PCR指纹图谱及其分析22-26
  • 2.2.1 ERIC-PCR条件的优化22-23
  • 2.2.2 不同组喂养方式婴儿肠道菌群ERIC-PCR指纹图谱23-24
  • 2.2.3 不同喂养方式婴儿肠道菌群多样性分析24-26
  • 2.2.4 不同喂养方式婴儿肠道菌群相似性分析26
  • 2.3 差异条带克隆、测序及功能分析26-29
  • 2.3.1 克隆阳性筛选及鉴定26-27
  • 2.3.2 差异条带测序报告27-28
  • 2.3.3 差异序列同源性检索及其编码产物功能分析28-29
  • 第三章 讨论29-33
  • 第四章 结论33-34
  • 参考文献34-37
  • 综述37-51
  • References43-51
  • 攻读学位期间的研究成果51-52
  • 致谢52-53

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前2条

1 刘博婷;;ERIC-PCR的研究进展[J];畜牧与饲料科学;2010年08期

2 刘海燕;常玉梅;;宏基因组学及在人体微生物研究上的应用[J];中国现代医学杂志;2012年08期


  本文关键词:不同喂养方式婴儿肠道菌群分布特征的初步研究,由笔耕文化传播整理发布。



本文编号:322771

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