柱前衍生-超高效液相色谱/高分辨质谱法测定小鼠肺组织中5-羟甲基糠醛

发布时间：2021-06-23 21:39

　　目的建立小鼠肺组织中5-羟甲基糠醛（5-HMF）的柱前衍生-超高效液相色谱/高分辨质谱（UPLC-HRMS/MS）法。方法小鼠肺组织匀浆样本经甲醇沉淀蛋白和萃取后,经2,4-二硝基苯肼（DNPH）衍生化,利用UPLC-HRMS/MS法检测,内标法定量。结果在5μg/L～100μg/L范围内,标准曲线线性相关系数（r）大于0.99。仪器检出限（S/N=3）及定量限（S/N=10）分别为0.5μg/L和2.0μg/L。方法检出限（S/N=3）和定量限（S/N=10）分别为为1.5μg/L和5.0μg/L。不同浓度的基质加标回收率在99.0%～103.0%之间,相对标准偏差RSD（n=6）<5%。结论相比传统的非衍生化测定方法,5-HMF检出灵敏度大大提高。本法适用于小鼠肺组织中痕量5-HMF的测定。 

【文章来源】：现代预防医学. 2020,47(21)北大核心

【文章页数】：4 页

【部分图文】：

5-HMF与2,4-DNPH反应过程

图1 5-HMF与2,4-DNPH反应过程衍生化后形成的5-HMF-DNPH仍采用正离子模式检测,其理论精确质量数为([M+H]+)为m/z 307.0673,实际精确质量数为m/z 307.0672(图3A),质量数偏差0.3 ppm。为进一步确证衍生化后的产物,对5-HMF-DNPH进行二级质谱检测,由图3B可以看出,5-HMF-DNPH的主要碎片离子为脱水形成的m/z 289.0592。其同位素内标13C 5-HMF-DNPH的一级精确质量数为([M+H]+)为m/z 313.0875,二级主要碎片离子为m/z 295.0795。

衍生化后形成的5-HMF-DNPH仍采用正离子模式检测,其理论精确质量数为([M+H]+)为m/z 307.0673,实际精确质量数为m/z 307.0672(图3A),质量数偏差0.3 ppm。为进一步确证衍生化后的产物,对5-HMF-DNPH进行二级质谱检测,由图3B可以看出,5-HMF-DNPH的主要碎片离子为脱水形成的m/z 289.0592。其同位素内标13C 5-HMF-DNPH的一级精确质量数为([M+H]+)为m/z 313.0875,二级主要碎片离子为m/z 295.0795。2.2 线性范围与检出限

【参考文献】：
期刊论文
[1]快速筛查中药注射液中有害物质5-羟甲基糠醛的LC-MS/MS方法及其质量评价研究[J]. 臧清策,何菁菁,白进发,郑亚杰,张瑞萍,李铁钢,王中华,贺玖明,再帕尔·阿不力孜.  药学学报. 2013(11)
[2]5-羟甲基糠醛与不同血清白蛋白的结合反应机制研究[J]. 郭明,何玲,鲁小旺.  药学学报. 2012(03)



本文编号：3245692