GCLC在微囊藻毒素-LR诱导的细胞恶性转化中的作用研究

发布时间：2021-08-24 03:57

　　目的:微囊藻毒素-LR（Microcystin-LR,MCLR）是一种单环七肽肝毒素,长期低剂量摄入MCLR与肝癌等消化道肿瘤的高发有关,但其致癌作用机制不明。人谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基（Glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC）主要调节谷胱甘肽的从头合成,在细胞抗氧化防御系统中发挥着重要作用,大量证据表明GCLC表达与癌症发生、发展有关。本课题组前期研究发现,MCLR诱导WRL68细胞发生恶性转化过程中,伴随着GCLC蛋白表达水平持续降低,推测GCLC的下调可能参与了MCLR诱导的肝细胞恶性转化。为此,本研究采用低剂量MCLR对正常的人肝WRL68细胞株和课题组前期构建的稳定过表达GCLC基因的WRL68细胞株进行慢性染毒,诱导细胞恶性转化,观察GCLC过表达对MCLR恶性转化细胞的氧化应激水平及恶性表型的影响,探讨GCLC在MCLR所致细胞恶性转化中的作用。方法:1.诱导细胞恶性转化。采用正常的人肝WRL68细胞株和稳定过表达GCLC基因的WRL68细胞株,设正常对照组、MCLR染毒组、空载组、空载染毒组、GCLC过表达组... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

MCLR染毒至第25代，各组细胞GCLC蛋白的Westernblot结果

图 2 GCLC 对 MCLR 诱导的细胞的集落形成能力的影响（A）集落形成实验的代表性图像（×200）；（B）集落形成的相对定量。注：与正常对照组比较，aP<0.05；与空载组比较，bP<0.05；与空载染毒组比较，cP<0.05。Figure 2 Roles of GCLC in MCLR-induced cell colony formation.(A) Representative images of soft agar assay (Original magnification×200). (B) Quantification ofcolony formation in soft agar.aP<0.05 compared with control cells.bP<0.05 compared with vector control

图 3 GCLC 对 MCLR 诱导的细胞体外迁移能力的影响（A）Transwell 迁移实验的代表性图片（×100）；（B）迁移细胞数的相对定量。注：与正常对照组比较，aP<0.05；与空载组比较，bP<0.05；与空载染毒组比较，cP<0.05。Figure 3 Roles of GCLC in MCLR-induced cell migration.(A) Representative images of migration capacity for MCLR-induced WRL68 cells passing through aTranswell barrier for 72 h (Original magnification ×100). (B) Quantification of relative migrating cell


本文编号：3359230