L. casei胞外多糖对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞及小肠巨噬细胞免疫调节作用

发布时间：2021-09-12 08:10

　　乳酸菌胞外多糖（lactic acid bacteria exopolysaccharides, LAB EPS）是乳酸菌发酵产生于细胞外的一种水溶性多糖,普遍存在于酸乳和干酪等发酵食品中,具有丰富的生物活性,如抗肿瘤活性、免疫调节活性及调节胃肠道功能活性等等,且无毒副作用,因此受到了人们广泛的研究与应用。目前关于乳酸菌胞外多糖的物理化学性质,生理功能等方面的研究比较多,但是在分子和细胞水平的深入研究比较少,比如对腹腔巨噬细胞（peritoneal macrophage）、小肠巨噬细胞（small intestine macrophage）的免疫调节作用,还不清楚。因为巨噬细胞在炎症反应中发挥重要作用,其产生的多种细胞因子和炎症介质是炎症反应发生、发展、协调与消散的内在机制。本研究主要探讨干酪乳杆菌胞外多糖对腹腔来源巨噬细胞生长的影响、吞噬功能的影响、分泌细胞因子的影响及对小肠巨噬细胞免疫活性的影响,阐明干酪乳杆菌胞外多糖的免疫调节机制。本研究主要包括以下几个方面：（1）通过腹腔注射法,提取BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞,按照Frangakis等（1982）的方法稍做改动分离小鼠小肠巨噬... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：81 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1. 引言
    1.1 立题背景
    1.2 研究的目的与意义
        1.2.1 研究目的
        1.2.2 研究意义
    1.3 文献综述
        1.3.1 乳酸菌胞外多糖
        1.3.2 肠道巨噬细胞
        1.3.3 腹腔巨噬细胞
        1.3.4 参与巨噬细胞炎症反应的炎症因子
    1.4 研究的主要内容及技术流程图
2. 材料与方法
    2.1 材料
        2.1.1 材料与试剂
        2.1.2 实验动物
        2.1.3 实验菌种
        2.1.4 细胞
        2.1.5 干酪乳杆菌胞外多糖
        2.1.6 主要溶剂配制
        2.1.7 仪器与设备
    2.2 方法
        2.2.1 J774A.1小鼠单核巨噬细胞培养
        2.2.2 小鼠腹腔巨噬细胞的提取与培养
        2.2.3 小鼠肠道巨噬细胞的提取
        2.2.4 EPS对腹腔巨噬细胞增殖作用的研究
        2.2.5 倒置显微镜对腹腔巨噬细胞进行形态学观察
        2.2.6 EPS对腹腔巨噬细胞吞噬功能的研究
        2.2.7 EPS对腹腔巨噬细胞分泌细胞因子的研究
        2.2.8 EPS对肠道巨噬细胞吞噬功能的分析
        2.2.9 EPS对肠道巨噬细胞分泌细胞因子的研究
3. 结果与分析
    3.1 J774A.1小鼠单核巨噬细胞生长曲线的绘制
    3.2 EPS对腹腔来源巨噬细胞生长的影响
        3.2.1 EPS对J774A.1细胞生长的影响
        3.2.2 EPS对原代腹腔巨噬细胞生长的影响
        3.2.3 EPS作用48h对J774A.1细胞增殖率的影响
        3.2.4 EPS对LPS处理后J774A.1细胞生长的影响
        3.2.5 EPS对LPS处理后原代腹腔巨噬细胞生长的影响
        3.2.6 EPS作用48h对LPS处理后J774A.1细胞增殖率的影响
    3.3 EPS对腹腔巨噬细胞形态学影响
        3.3.1 不同浓度EPS单独作用对腹腔巨噬细胞形态学影响
        3.3.2 EPS对LPS处理后腹腔巨噬细胞形态学影响
    3.4 EPS对腹腔来源巨噬细胞吞噬功能的影响
        3.4.1 EPS对腹腔来源巨噬细胞吞噬中性红的影响
        3.4.2 EPS对LPS处理后腹腔巨噬细胞吞噬中性红的影响
        3.4.3 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌NO的影响
        3.4.4 EPS对LPS处理后腹腔巨噬细胞分泌NO的影响
        3.4.5 EPS对腹腔来源巨噬细胞生成H_2O_2的影响
        3.4.6 EPS对LPS处理后腹腔巨噬细胞生成H_2O_2的影响
        3.4.7 EPS对腹腔来源巨噬细胞生成O_(2-)·的影响
        3.4.8 EPS对LPS处理后腹腔巨噬细胞生成O_(2-)·的影响
    3.5 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌细胞因子的影响
        3.5.1 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌TNF-α的影响
        3.5.2 EPS对LPS处理后腹腔来源巨噬细胞分泌TNF-α的影响
        3.5.3 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌IL-1β的影响
        3.5.4 EPS对LPS处理后腹腔来源巨噬细胞分泌IL-1β的影响
        3.5.5 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌IL-10的影响
        3.5.6 EPS对LPS处理后腹腔来源巨噬细胞分泌IL-10的影响
    3.6 EPS对肠道巨噬细胞吞噬功能的影响
        3.6.1 EPS对肠道巨噬细胞吞噬中性红的影响
        3.6.2 EPS对肠道巨噬细胞生成NO的影响
    3.7 EPS对肠道巨噬细胞分泌细胞因子的影响
        3.7.1 EPS对肠道巨噬细胞分泌TNF-α的影响
        3.7.2 EPS对肠道巨噬细胞分泌IL-1β的影响
        3.7.3 EPS对肠道巨噬细胞分泌IL-10的影响
4. 讨论
    4.1 EPS对腹腔来源巨噬细胞吞噬功能的影响
    4.2 EPS对腹腔来源巨噬细胞分泌细胞因子的影响
    4.3 EPS对肠道巨噬细胞吞噬及分泌细胞因子的影响
5. 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文


【参考文献】：
期刊论文
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[4]乳酸菌胞外多糖的研究[J]. 李全阳,夏文水.  食品与发酵工业. 2003(05)
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[8]一株乳酸菌所产胞外多糖对荷瘤小鼠机体免疫功能影响的研究[J]. 顾笑梅,孔健,王富生,马桂荣.  微生物学报. 2003(02)
[9]克罗恩病临床特征以及诊断和治疗选择[J]. 郑家驹,史肖华,褚行琦,贾黎明,王凤鸣.  中华内科杂志. 2002(09)



本文编号：3393871