工频磁场对小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响

发布时间：2017-05-03 02:01

  本文关键词：工频磁场对小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：背景：近年来,随着中国经济的发展和社会的进步,环境中各种有害因素的种类和数量也随之增长。当前出生缺陷率居高不下、不孕不育率逐年上升的现象提示我们,环境对生殖安全的干扰已日益明显、令人担忧。人为制造的工频磁场在生活和职业环境中无处不在,且暴露水平日益增高,已成为影响生殖安全的重要理化因素之一。流行病学研究提示工频磁场可能升高流产的危险性,并且与子宫内胚胎的次优生长、先天畸形、早期胚胎丢失以及死产等不良生育结局有关。实验研究初步显示工频磁场可能通过影响细胞超微结构、干扰卵泡发生过程、减少排出的囊胚数等机制减弱雌性的生殖力。而工频磁场对单个卵母细胞的影响却少有报道。考虑到卵母细胞作为女性生殖细胞所具有的重要生理作用,考察工频磁场暴露对体外单独体外培养的卵母细胞的生物学效应将对女性生殖系统生殖毒性评价具有重要意义。 目的：研究工频磁场对体外培养的小鼠卵母细胞减数分裂成熟的影响。 方法：从21天ICR雌鼠获取卵母细胞。将卵母细胞分别暴露于2mT工频磁场4h、12h和24h,每个时间点均设置一一对应的假暴露组。暴露结束后,GV期卵母细胞采用免疫荧光法检测DNA损伤情况。将GV期卵母细胞继续培养,4h后和12h后镜下分别统计GVBD率和PB1排出率。排出第一极体的MII期卵母细胞用染色体铺片实验和免疫荧光法观察其染色体数目、形态以及纺锤体的形态,并进行统计。用A23187和CHX联合处理MII期卵母细胞,统计孤雌激活率从而评估卵母细胞进一步发育的潜能。 结果：与假暴露组比较,工频磁场暴露后,yH2AX平均细胞焦点数和阳性细胞率均没有显著性差异；工频磁场未对GVBD率及PB1排出率、染色体数目、染色体的排列与纺锤体的形态产生影响；暴露组和假暴露组的孤雌激活率无统计学差异。 结论：在本实验条件下,工频磁场对小鼠卵母细胞体外减数分裂成熟无影响。
【关键词】：工频磁场 卵母细胞 减数分裂成熟 DNA损伤
【学位授予单位】：浙江大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R135
【目录】：

• 致谢4-6
• 中文摘要6-8
• Abstract8-10
• 缩略词10-14
• 1. 前言14-16
• 2. 试验材料16-19
• 2.1 主要仪器设备和耗材16
• 2.2 主要试剂16-17
• 2.3 试剂配制17-19
• 2.3.1 4%多聚甲醛17
• 2.3.2 铺片固定液17
• 2.3.3 0.1%破膜液17-18
• 2.3.4 Washing Buffer18-19
• 3. 实验方法19-24
• 3.1 sXc-ELF工频磁场辐照系统19-20
• 3.2 细胞获取20
• 3.3 细胞处理与分组20-21
• 3.4 GVBD发生和PB1排出统计21
• 3.5 免疫焚光21-22
• 3.6 染色体铺片22-23
• 3.7 孤雌激活23
• 3.8 数据统计23-24
• 4. 实验结果24-32
• 4.1 工频磁场对GV期卵母细胞DNA损伤的影响24-26
• 4.2 工频磁场对GV期卵母细胞GVBD发生和PB1排出的影响26-27
• 4.3 工频磁场对体外MII期卵母细胞纺锤体和染色体形态的影响27-30
• 4.4 工频磁场对MII期卵母细胞孤雌激活的影响30-32
• 5. 讨论32-35
• 参考文献35-39
• 综述39-51
• 文献45-51
• 作者简历及在读期间所取得的科研成果51

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前6条

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本文编号：342077