褪黑素在铅所致神经细胞毒性中的保护作用研究

发布时间：2021-10-09 14:05

　　目的:铅是工业上广泛运用的重金属,因其化学性质十分稳定,可在自然环境中长期稳定存在,故铅污染是我国面临的严重环境问题之一。铅对人体的多个系统均有毒性效应,其中尤以神经系统最为严重,然而目前铅所致神经毒性的机制尚未完全明确,有研究认为氧化应激是铅致神经毒性的关键因素。褪黑素（melatonin,MT）是目前市面上常见的膳食补充剂,研究发现其具有抗氧化、抗衰老、抗肿瘤等多项生理功能,但其是否能够减轻铅引起的神经损伤仍不清楚。本研究以PC12细胞作为研究对象探究褪黑素是否对铅所致神经毒性具有保护作用及其可能的机制。方法:用不同剂量的褪黑素（25μM、50μM、100μM、200μM、400μM或800μM）处理细胞,CCK-8实验检测各组细胞的存活率。PC12细胞分为对照组、25μM醋酸铅（Lead acetate,PbAc）染毒组、50μM MT处理组和50μM MT预处理+25μM PbAc组,处理24小时后CCK-8和LDH实验检测各组细胞存活率和损伤率;Hoechst染色实验检测细胞凋亡;免疫荧光法检测Cleaved-Caspase-3和细胞色素C（Cytochrome C,Cyto... 

【文章来源】：华中科技大学湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 设备
    1.3 细胞培养
    1.4 细胞处理
    1.5 CC-8 实验检测细胞存活率
    1.6 LDH实验检测细胞损伤率
    1.7 Hoechst染色检测细胞凋亡率
    1.8 免疫荧光检测Cleaved-Caspase-3和Cyto C的表达
    1.9 荧光染色检测细胞和线粒体内ROS水平
    1.10 蛋白提取
    1.11 蛋白定量
    1.12 Western Blot检测Nrf2和HO-1 蛋白水平
    1.13 GSH含量测定
    1.14 SOD酶活力测定
    1.15 统计分析
2 结果
    2.1 褪黑素减少铅所致PC12 细胞死亡
    2.2 褪黑素减少铅所致PC12 细胞核损伤
    2.3 褪黑素抑制Cleaved-Caspase-3 激活和Cyto C释放
    2.4 褪黑素抑制铅所致PC12 细胞ROS水平升高
    2.5 褪黑素抑制铅所致GSH含量减少和SOD酶活力下降
    2.6 褪黑素提高PC12 细胞HO-1 和胞核Nrf2 蛋白的水平
3 讨论
4 结论
参考文献
综述
    参考文献
附录
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]褪黑激素抗氧化作用的研究进展[J]. 边小娜,张家新.  安徽农学通报. 2017(09)
[2]铅对发育期大鼠海马DMT1基因及蛋白表达的影响[J]. 赵志红,刘琳,刘丽茹,尤安民,李茹梅,秦雪鸽.  中国儿童保健杂志. 2011(09)
[3]Myocardial ischemia-reperfusion injury:Possible role of melatonin[J]. Alberto Dominguez-Rodriguez,Pedro Abreu-Gonzalez.  World Journal of Cardiology. 2010(08)
[4]中国城市儿童血铅水平调查[J]. 戚其平,杨艳伟,姚孝元,丁亮,王雯,刘韵源,陈元,杨志平,孙玉东,袁宝珊,于传龙,韩良峰,刘学,胡小红,刘亚平,杜正东,曲莉萍,孙芳.  中华流行病学杂志. 2002(03)
[5]松果体与褪黑素[J]. 王卫东,邱昌恩.  生物学通报. 2000(05)
[6]重金属污染土壤的植物修复研究Ⅰ.金属富集植物Brassica juncea对铜、锌、镉、铅污染的响应[J]. 蒋先军,骆永明,赵其国,吴胜春,吴龙华,乔显亮,宋静.  土壤. 2000(02)
[7]重金属污染与人体健康[J]. 常学秀,文传浩,王焕校.  云南环境科学. 2000(01)



本文编号：3426533