苯并芘暴露促进小鼠蜕膜化过程中基质细胞增殖并抑制分化
发布时间：2021-10-11 23:37
目的:苯并芘（BaP）是一种重要的环境污染物,具有明显的生殖毒性。课题组前期的研究发现,孕早期BaP暴露损害小鼠子宫内膜形态并诱导蜕膜化缺陷。蜕膜化是子宫内膜基质细胞增殖分化形成大的上皮样蜕膜细胞的过程,为胚胎生长和胎盘形成提供空间。蜕膜化的正常进行与细胞周期调节密切相关,但关于BaP对早孕小鼠基质细胞蜕膜化过程中细胞周期的影响尚不清楚。本研究探讨了BaP对蜕膜化过程中基质细胞增殖分化的影响,为进一步研究BaP的生殖毒性提供实验依据。方法:前期实验结果证明0.2mg/kg/d BaP染毒影响了早孕小鼠子宫内膜容受性及蜕膜化过程,导致胚胎着床数下降,因此本实验采用0.2mg/kg/d BaP作为染毒剂量。首先建立BaP染毒孕鼠模型,从妊娠第1天（D1）至第8天（D8）,每日给予灌胃处理,分别于孕6、7、8天收取子宫材料,进行以下实验:（1）HE染色观察蜕膜组织形态,Western blot检测蜕膜化标志物BMP2的表达。（2）免疫组化,Real-time PCR和Western blot的方法检测蜕膜组织的增殖（Ki67和PCNA）,分化（Prl8a2和Prl3c1）以及多倍体化相关分子...
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BaP处理导致小鼠的蜕膜化缺陷（A）妊娠D7植入点数量统计图；（B）妊娠D7小鼠子宫图片，箭头指向异常胚胎；（C）
图 2 BaP 暴露影响蜕膜化过程中基质细胞的增殖和分化）IHC 检测妊娠 D7 小鼠子宫 Ki67 的表达；（B）IHC 检测妊娠 D7 小鼠子宫 PCNA 的；棕色染色表示阳性反应；（C）RT-PCR 检测 D6-D8 的蜕膜组织 Prl8a2 的 mRNA 水平；）RT-PCR 检测 D6-D8 的蜕膜组织 Pr13c1 的 mRNA 水平。（**：p <0.01，***：p <0.001）。.2 BaP affects the proliferation and differentiation of stromal cells. (A) IHC analyses of7 in the uterine tissues on D7 of pregnancy. (B) IHC analyses of PCNA on D7 of pregnancywn staining indicates positivity. (C) The mRNA levels of Prl8a2 on D6-8 detected by-PCR. (D) The mRNA levels of Prl3c1 on D6-8 detected by RT-PCR. **：p <0.01，***：p001. BaP 影响蜕膜细胞的多倍体化相关因子的表达有研究证明，CyclinD3、CDK6 和 p21 参与蜕膜多倍体化形成[17]，在蜕膜化过
图 3 BaP 暴露损害蜕膜多倍体化相关因子的表达Western blot 检测蜕膜化过程中 CyclinD3，CDK6 和 p21 的表达；（B）CyclinD3，CD 的蛋白定量分析；（C）IHC 检测 CyclinD3 的表达；（D）IHC 检测 CDK6 的表达HC 检测 p21 的表达。（*：p <0.05，**：p <0.01）aP impairs the expression of polyploid related factors. (A). Analyses of CyclinD3, CD1 protein expression during decidualization by western blot. (B) Quantitative analysD3, CDK6 and P21 expression show in the Bar plot. (C) The location of the Cycli in the uterine tissues of D6, D7 and D8 is determined by IHC. (D) and (E) IHC anaression of CDK6 and P21 in the uterine tissues on D7. *: p< 0.05, **: p<0.01.BaP 诱导细胞发生 G1/S 期转换1 / S 检验点失调会导致异常的细胞增殖。CDK2 通过与 CyclinA 和 E 结合
本文编号：3431459
【文章来源】：重庆医科大学重庆市
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
BaP处理导致小鼠的蜕膜化缺陷（A）妊娠D7植入点数量统计图；（B）妊娠D7小鼠子宫图片，箭头指向异常胚胎；（C）
图 2 BaP 暴露影响蜕膜化过程中基质细胞的增殖和分化）IHC 检测妊娠 D7 小鼠子宫 Ki67 的表达；（B）IHC 检测妊娠 D7 小鼠子宫 PCNA 的；棕色染色表示阳性反应；（C）RT-PCR 检测 D6-D8 的蜕膜组织 Prl8a2 的 mRNA 水平；）RT-PCR 检测 D6-D8 的蜕膜组织 Pr13c1 的 mRNA 水平。（**：p <0.01，***：p <0.001）。.2 BaP affects the proliferation and differentiation of stromal cells. (A) IHC analyses of7 in the uterine tissues on D7 of pregnancy. (B) IHC analyses of PCNA on D7 of pregnancywn staining indicates positivity. (C) The mRNA levels of Prl8a2 on D6-8 detected by-PCR. (D) The mRNA levels of Prl3c1 on D6-8 detected by RT-PCR. **：p <0.01，***：p001. BaP 影响蜕膜细胞的多倍体化相关因子的表达有研究证明，CyclinD3、CDK6 和 p21 参与蜕膜多倍体化形成[17]，在蜕膜化过
图 3 BaP 暴露损害蜕膜多倍体化相关因子的表达Western blot 检测蜕膜化过程中 CyclinD3，CDK6 和 p21 的表达；（B）CyclinD3，CD 的蛋白定量分析；（C）IHC 检测 CyclinD3 的表达；（D）IHC 检测 CDK6 的表达HC 检测 p21 的表达。（*：p <0.05，**：p <0.01）aP impairs the expression of polyploid related factors. (A). Analyses of CyclinD3, CD1 protein expression during decidualization by western blot. (B) Quantitative analysD3, CDK6 and P21 expression show in the Bar plot. (C) The location of the Cycli in the uterine tissues of D6, D7 and D8 is determined by IHC. (D) and (E) IHC anaression of CDK6 and P21 in the uterine tissues on D7. *: p< 0.05, **: p<0.01.BaP 诱导细胞发生 G1/S 期转换1 / S 检验点失调会导致异常的细胞增殖。CDK2 通过与 CyclinA 和 E 结合
本文编号：3431459
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