全氟辛烷磺酸抑制自噬—溶酶体通路致小鼠ES细胞衍生心肌细胞损伤的机制研究
发布时间：2021-10-18 21:05
研究背景:全氟辛烷磺酸（perfluorooctane sulfonate,PFOS）是一种八碳全氟有机化合物,在环境中分布极广,能通过生物富集的作用在生物体内累积并引起各类组织毒性。由于PFOS能够通过胎盘屏障,因此也具有发育毒性。研究表明斑马鱼胚胎发育期暴露PFOS可引起心率改变、孵化率下降。大鼠在胚胎发育期暴露PFOS会引起心脏发育损伤。目前关于PFOS的心脏发育毒性研究仍处于初始阶段,其引起的心肌发育毒性作用机制亟需在代表性强的模型中进一步阐明。胚胎干（embryonic stem,ES）细胞在体外能定向诱导分化为心肌细胞,该模型能够用于研究药物及环境毒物可能具有的心肌发育毒性。课题组前期利用该模型论证了 PFOS对小鼠ES细胞定向分化心肌细胞具有抑制作用,心肌发育毒性等级为二级,其毒性作用主要与引起线粒体功能损伤相关。同时透射电镜观察发现,PFOS会引起ES细胞衍生心肌细胞（embryonic stem cell-derived cardiomyocytes,ESC-CMs）线粒体内嵴肿胀,且细胞内自噬体增加。研究表明,自噬与哺乳动物胚胎发育及分化密切相关。线粒体依赖的能量通...
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1PF0s抑制小鼠Es细胞分化心肌细胞
激活［２５］。结果显示，在ｄ?３和ｄ?５时间点，ｂｅｃｌｉｎ－１和ＬＣ３－ＩＩ型表达较低，对应的心肌??特异性蛋白ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ无表达；ＥＢｓ贴壁后ｄ?５＋３到ｄ?５＋７，Ｂｅｃｌｉｎ－１和ＬＣ３－ＩＩ水平逐渐??升高，对应时间点心肌特异性蛋白ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ逐渐增加（图１．２），表明随着ＥＳ细胞定??向心肌细胞分化，自噬活性也不断增加。??Ａ?Ｂ??ｇ??ＢｅＨ???＾ｉ５２?１４１?＊?ｓＳｒ?ｆ?」??ｉ?ｒ〇?Ｉ?—?—?Ｉ?ａ?３－?－ａ－?ＬＣ３－ＩＩ?＊＊＾??ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ??ＧＡＰＤＨ?３６?ｉ?〇－＊—ｔ?￣ｉ?１?．—???｜?Ｋ?ｄ?３?ｄ?５?ｄ?５＋３?ｄ?５＋５?ｄ?５＋７??图１．２?ＥＳ细胞心肌分化过程中自噬相关蛋白的表达??Ｆｉｇ?１．２?Ａｕｔｏｐｈａｇｙ?ｗｅｒｅ?ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｄｕｒｉｎｇ?ｃａｒｄｉｏｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｏｆ?ＥＳ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ．?（Ａ）??Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｅｃｌｉｎ－１，?ＬＣ３?ａｎｄ?ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ?ｄｕｒｉｎｇ?ｃａｒｄｉｏｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｏｆ?ＥＳ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ??ｖｉｔｒｏ．?（Ｂ）?Ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｅｃｌｉｎ－１，?ＬＣ３?ａｎｄ?ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ?ｗｉｔｈ?ｒｅｓｐｅｃｔ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｌｏａｄｉｎｇ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ＧＡＰＤＨ．?Ｓｉｍｉｌａｒ?ｄａｔａ?ｗａｓ?ｏｂｔａｉｎｅｄ?ｉｎ?ａｔ?ｌｅａｓｔ?３?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?＜?０．０５
能够升高溶酶体内ｐＨ值，抑制自噬下游降解，因此被广泛用来对ＬＣ３转化进行??检测。Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ结果显示，ＰＦＯＳ＋ＣＱ联用组相较于ＣＱ单独处理组ＬＣ３－ＩＩ水平没??有显著性差异（
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文编号：3443499
【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：73 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
1PF0s抑制小鼠Es细胞分化心肌细胞
激活［２５］。结果显示，在ｄ?３和ｄ?５时间点，ｂｅｃｌｉｎ－１和ＬＣ３－ＩＩ型表达较低，对应的心肌??特异性蛋白ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ无表达；ＥＢｓ贴壁后ｄ?５＋３到ｄ?５＋７，Ｂｅｃｌｉｎ－１和ＬＣ３－ＩＩ水平逐渐??升高，对应时间点心肌特异性蛋白ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ逐渐增加（图１．２），表明随着ＥＳ细胞定??向心肌细胞分化，自噬活性也不断增加。??Ａ?Ｂ??ｇ??ＢｅＨ???＾ｉ５２?１４１?＊?ｓＳｒ?ｆ?」??ｉ?ｒ〇?Ｉ?—?—?Ｉ?ａ?３－?－ａ－?ＬＣ３－ＩＩ?＊＊＾??ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ??ＧＡＰＤＨ?３６?ｉ?〇－＊—ｔ?￣ｉ?１?．—???｜?Ｋ?ｄ?３?ｄ?５?ｄ?５＋３?ｄ?５＋５?ｄ?５＋７??图１．２?ＥＳ细胞心肌分化过程中自噬相关蛋白的表达??Ｆｉｇ?１．２?Ａｕｔｏｐｈａｇｙ?ｗｅｒｅ?ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ?ｄｕｒｉｎｇ?ｃａｒｄｉｏｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｏｆ?ＥＳ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ．?（Ａ）??Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｅｃｌｉｎ－１，?ＬＣ３?ａｎｄ?ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ?ｄｕｒｉｎｇ?ｃａｒｄｉｏｍｙｏｇｅｎｅｓｉｓ?ｏｆ?ＥＳ?ｃｅｌｌｓ?ｉｎ??ｖｉｔｒｏ．?（Ｂ）?Ｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ｂｅｃｌｉｎ－１，?ＬＣ３?ａｎｄ?ａ－Ａｃｔｉｎｉｎ?ｗｉｔｈ?ｒｅｓｐｅｃｔ?ｔｏ?ｔｈｅ?ｌｏａｄｉｎｇ??ｃｏｎｔｒｏｌ?ＧＡＰＤＨ．?Ｓｉｍｉｌａｒ?ｄａｔａ?ｗａｓ?ｏｂｔａｉｎｅｄ?ｉｎ?ａｔ?ｌｅａｓｔ?３?ｉｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔ?ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ．?＜?０．０５
能够升高溶酶体内ｐＨ值，抑制自噬下游降解，因此被广泛用来对ＬＣ３转化进行??检测。Ｗｅｓｔｅｍ－ｂｌｏｔ结果显示，ＰＦＯＳ＋ＣＱ联用组相较于ＣＱ单独处理组ＬＣ３－ＩＩ水平没??有显著性差异（
【参考文献】：
期刊论文
[1]Autophagy and multidrug resistance in cancer[J]. Ying-Jie Li,Yu-He Lei,Nan Yao,Chen-Ran Wang,Nan Hu,Wen-Cai Ye,Dong-Mei Zhang,Zhe-Sheng Chen. Chinese Journal of Cancer. 2017(08)
本文编号：3443499
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