以线粒体为靶点研究MBP、MEHP联合染毒对睾丸间质细胞睾酮合成的影响
发布时间：2021-11-09 04:25
目的:探讨邻苯二甲酸单丁酯（monobutyl phthalate,MBP）和邻苯二甲酸单（2-乙基）己酯（mono（2-ethylhexyl）phthalate,MEHP）联合染毒影响体外培养的小鼠睾丸间质细胞（TM-3）睾酮生成水平的线粒体损伤机制。方法:1、在含10%胎牛血清的完全培养基中,培养小鼠睾丸间质细胞（TM-3）,分为对照组0μmol/L及1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L、500μmol/L、1000μmol/L MBP和MEHP染毒组,各组小鼠睾丸间质细胞染毒处理24h。2、以四甲基偶氮唑蓝法检测并计算细胞增殖抑制率,观察MBP和MEHP毒性作用下细胞结构的改变。3、透射电镜观察细胞线粒体超微结构的改变。4、线粒体膜电位检测试剂盒染色,流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的改变。5、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞裂解液中二氢硫辛酰胺脱氢酶（DLD）,类固醇激素合成急性调节蛋白（StAR）的表达水平。6、酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞环磷酰胺（cAMP）水平。7、酶联免疫吸附法（ELISA）检测细胞睾酮（T）水平。结果:1、MBP...
【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的MBP染毒24h后TM-3细胞形态学变化
图 2 不同浓度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 细胞形态学变化按照 1.2.3 MTT 法检测细胞活力的实验方法经 MTT 实验检测各组吸光度值，计算抑制率进而依据改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半数致死浓度，分别为 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，数据引自同课题组师兄已发表论文。2.2 MBP 和 MEHP 联合染毒对睾丸间质细胞线粒体超微结构的影响对照组(×100)MEHP 1μmol/L (×100)MEHP 10μmol/L (×100)MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)D E F100um100um100um
图 2 不同浓度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 细胞形态学变化按照 1.2.3 MTT 法检测细胞活力的实验方法经 MTT 实验检测各组吸光度值，计算抑制率进而依据改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半数致死浓度，分别为 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，数据引自同课题组师兄已发表论文。2.2 MBP 和 MEHP 联合染毒对睾丸间质细胞线粒体超微结构的影响A 对照组 B MBP 单独染毒组 C MEHP 单独染毒组 D MBP+MEHP 联合染毒组MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)
【参考文献】：
期刊论文
[1]国外环境内分泌干扰物管控现状及我国的对策[J]. 杨先海,刘会会,刘济宁,王蕾,汪贞,吴晟旻,石利利. 生态与农村环境学报. 2018(02)
[2]氯气吸入致大鼠肺血管内皮细胞的线粒体损伤及红景天苷的干预作用[J]. 刘萌萌,李彦文,周庆彪,张佳欣,王乐乐,刘江正,于卫华,孔德钦,刘瑞,海春旭,张晓迪. 癌变·畸变·突变. 2018(01)
[3]改进的QuEChERS气相色谱-质谱法同时检测土壤中18种邻苯二甲酸酯类增塑剂[J]. 荣维广,宋宁慧,吉文亮,刘华良,马永建. 江苏预防医学. 2018(01)
[4]化妆品塑料包装中邻苯二甲酸酯含量的测定[J]. 孙春峰,秦芳. 塑料工业. 2018(01)
[5]塑料玩具在模拟汗液、唾液中16种邻苯二甲酸酯的溶出量[J]. 牛燕. 福建分析测试. 2018(01)
[6]青稞酒中53种塑料添加剂检测研究[J]. 吉生军,星玉秀,王静莹,杨娟,薄海波. 食品研究与开发. 2018(01)
[7]黄酒接触材料中塑化剂迁移探讨[J]. 李伟营,纪律,李启,闫秀梅,雷永良. 中国卫生检验杂志. 2018(01)
[8]食品级塑料包装袋中16种塑化剂的3种前处理方法研究[J]. 张玉美,张明洪,李红梅,罗靖,徐买成,熊缘,胡珈毓. 职业与健康. 2018(01)
[9]邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯对StAR基因表达的影响[J]. 彭鹏,王利,徐新云,袁建辉,黄海燕. 职业与健康. 2017(24)
[10]我国人群邻苯二甲酸酯类的暴露水平及风险[J]. 高海涛,李瑞仙,邸倩南,高慧雯,许茜. 癌变·畸变·突变. 2017(06)
博士论文
[1]PAHs致男（雄）性生殖损害中端粒和线粒体损伤效应和机制研究[D]. 凌曦.第三军医大学 2017
[2]DBP致男（雄）性生殖毒性中内质网应激及线粒体损伤的作用机制研究[D]. 张国伟.第三军医大学 2016
[3]蛋白激酶MAP3K8对小鼠黄体孕酮合成的调节机理研究[D]. 刘颖.中国农业大学 2016
[4]氧自由基—线粒体信号通路在少、弱精子症发病中的机制研究[D]. 张卫东.郑州大学 2015
[5]邻苯二甲酸酯暴露及其对儿童生长发育影响的研究[D]. 吴微.华中科技大学 2015
[6]DEHP致隐睾症跨代遗传的基因组印记修饰机制[D]. 陈进军.重庆医科大学 2015
[7]环境雌激素MEHP通过ROS介导的线粒体损伤在TRALI中的作用机制研究[D]. 班金豹.华中科技大学 2014
硕士论文
[1]城市污水处理厂中邻苯二甲酸酯的分布规律及去除途径研究[D]. 徐羚奕.长安大学 2017
[2]饮用水中痕量邻苯二甲酸酯类检测及其迁移规律[D]. 吴菲.吉林大学 2017
[3]塑料餐盒中邻苯二甲酸酯的迁移规律研究[D]. 何泽.天津科技大学 2017
[4]全国农田土壤内分泌干扰效应的生态风险评价[D]. 刘瑞.浙江大学 2017
[5]核受体介导的农药及其代谢产物的内分泌干扰效应研究[D]. 季晨阳.浙江工业大学 2017
[6]以线粒体DLD蛋白为靶点研究重金属对Leydig细胞的毒性作用分子机制[D]. 纪洵敏.暨南大学 2015
[7]多种环境化学物经人CYP2E1代谢活化作用研究[D]. 胡克岐.南方医科大学 2015
[8]广东沿海海洋生物体中邻苯二甲酸酯残留及其健康风险评价研究[D]. 石凤琼.上海海洋大学 2014
[9]污水处理系统半挥发性有机污染物环境归趋研究[D]. 李宁.哈尔滨工业大学 2013
[10]以线粒体为靶点研究重金属铅对睾丸间质细胞损伤的毒理作用机制[D]. 张杨杨.暨南大学 2013
本文编号：3484619
【文章来源】：宁夏医科大学宁夏回族自治区
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
不同浓度的MBP染毒24h后TM-3细胞形态学变化
图 2 不同浓度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 细胞形态学变化按照 1.2.3 MTT 法检测细胞活力的实验方法经 MTT 实验检测各组吸光度值，计算抑制率进而依据改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半数致死浓度，分别为 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，数据引自同课题组师兄已发表论文。2.2 MBP 和 MEHP 联合染毒对睾丸间质细胞线粒体超微结构的影响对照组(×100)MEHP 1μmol/L (×100)MEHP 10μmol/L (×100)MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)D E F100um100um100um
图 2 不同浓度的 MEHP 染毒 24h 后 TM-3 细胞形态学变化按照 1.2.3 MTT 法检测细胞活力的实验方法经 MTT 实验检测各组吸光度值，计算抑制率进而依据改良寇氏法公式可求得 MBP、MEHP 的半数致死浓度，分别为 LC50MBP= 500μmol/L，LC50MEHP= 450μmol/L[25]，数据引自同课题组师兄已发表论文。2.2 MBP 和 MEHP 联合染毒对睾丸间质细胞线粒体超微结构的影响A 对照组 B MBP 单独染毒组 C MEHP 单独染毒组 D MBP+MEHP 联合染毒组MEHP 100μmol/L (×100) MEHP 500μmol/L (×100) MEHP 1000μmol/L (×100)
【参考文献】：
期刊论文
[1]国外环境内分泌干扰物管控现状及我国的对策[J]. 杨先海,刘会会,刘济宁,王蕾,汪贞,吴晟旻,石利利. 生态与农村环境学报. 2018(02)
[2]氯气吸入致大鼠肺血管内皮细胞的线粒体损伤及红景天苷的干预作用[J]. 刘萌萌,李彦文,周庆彪,张佳欣,王乐乐,刘江正,于卫华,孔德钦,刘瑞,海春旭,张晓迪. 癌变·畸变·突变. 2018(01)
[3]改进的QuEChERS气相色谱-质谱法同时检测土壤中18种邻苯二甲酸酯类增塑剂[J]. 荣维广,宋宁慧,吉文亮,刘华良,马永建. 江苏预防医学. 2018(01)
[4]化妆品塑料包装中邻苯二甲酸酯含量的测定[J]. 孙春峰,秦芳. 塑料工业. 2018(01)
[5]塑料玩具在模拟汗液、唾液中16种邻苯二甲酸酯的溶出量[J]. 牛燕. 福建分析测试. 2018(01)
[6]青稞酒中53种塑料添加剂检测研究[J]. 吉生军,星玉秀,王静莹,杨娟,薄海波. 食品研究与开发. 2018(01)
[7]黄酒接触材料中塑化剂迁移探讨[J]. 李伟营,纪律,李启,闫秀梅,雷永良. 中国卫生检验杂志. 2018(01)
[8]食品级塑料包装袋中16种塑化剂的3种前处理方法研究[J]. 张玉美,张明洪,李红梅,罗靖,徐买成,熊缘,胡珈毓. 职业与健康. 2018(01)
[9]邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯对StAR基因表达的影响[J]. 彭鹏,王利,徐新云,袁建辉,黄海燕. 职业与健康. 2017(24)
[10]我国人群邻苯二甲酸酯类的暴露水平及风险[J]. 高海涛,李瑞仙,邸倩南,高慧雯,许茜. 癌变·畸变·突变. 2017(06)
博士论文
[1]PAHs致男（雄）性生殖损害中端粒和线粒体损伤效应和机制研究[D]. 凌曦.第三军医大学 2017
[2]DBP致男（雄）性生殖毒性中内质网应激及线粒体损伤的作用机制研究[D]. 张国伟.第三军医大学 2016
[3]蛋白激酶MAP3K8对小鼠黄体孕酮合成的调节机理研究[D]. 刘颖.中国农业大学 2016
[4]氧自由基—线粒体信号通路在少、弱精子症发病中的机制研究[D]. 张卫东.郑州大学 2015
[5]邻苯二甲酸酯暴露及其对儿童生长发育影响的研究[D]. 吴微.华中科技大学 2015
[6]DEHP致隐睾症跨代遗传的基因组印记修饰机制[D]. 陈进军.重庆医科大学 2015
[7]环境雌激素MEHP通过ROS介导的线粒体损伤在TRALI中的作用机制研究[D]. 班金豹.华中科技大学 2014
硕士论文
[1]城市污水处理厂中邻苯二甲酸酯的分布规律及去除途径研究[D]. 徐羚奕.长安大学 2017
[2]饮用水中痕量邻苯二甲酸酯类检测及其迁移规律[D]. 吴菲.吉林大学 2017
[3]塑料餐盒中邻苯二甲酸酯的迁移规律研究[D]. 何泽.天津科技大学 2017
[4]全国农田土壤内分泌干扰效应的生态风险评价[D]. 刘瑞.浙江大学 2017
[5]核受体介导的农药及其代谢产物的内分泌干扰效应研究[D]. 季晨阳.浙江工业大学 2017
[6]以线粒体DLD蛋白为靶点研究重金属对Leydig细胞的毒性作用分子机制[D]. 纪洵敏.暨南大学 2015
[7]多种环境化学物经人CYP2E1代谢活化作用研究[D]. 胡克岐.南方医科大学 2015
[8]广东沿海海洋生物体中邻苯二甲酸酯残留及其健康风险评价研究[D]. 石凤琼.上海海洋大学 2014
[9]污水处理系统半挥发性有机污染物环境归趋研究[D]. 李宁.哈尔滨工业大学 2013
[10]以线粒体为靶点研究重金属铅对睾丸间质细胞损伤的毒理作用机制[D]. 张杨杨.暨南大学 2013
本文编号：3484619
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