组蛋白去乙酰化酶6在炭黑颗粒致小鼠肺部炎症中的作用

发布时间：2021-11-21 04:23

　　目的:炭黑颗粒的暴露广泛存在于橡胶、汽车轮胎和墨水生产加工等职业场所。除了职业暴露外,工农业生产排放、道路交通尾气、燃料和生物质焚烧等也可以造成生活环境中炭黑颗粒的暴露。研究表明长期吸入炭黑颗粒会导致慢性支气管炎、哮喘及慢性阻塞性肺部疾病等多种呼吸系统疾病的发生或发展,而炎症反应是这些疾病发病过程中共有的病理反应。组蛋白去乙酰化酶6（HDAC6）及其抑制剂已被证明在一些慢性炎症的发展中起到一定调节作用。但HDAC6是否在炭黑颗粒导致的肺部炎症中发挥作用,以及通过何种机制在炭黑颗粒暴露导致的肺部炎症中发挥作用仍然不清楚,因此本研究主要探讨HDAC6在炭黑颗粒致小鼠肺部炎症反应中的作用及其可能的机制。方法:将C57BL/6雄性小鼠随机分为炭黑颗粒染毒组、生理盐水组、空白对照组,每组30只小鼠。炭黑颗粒组和生理盐水组分别采用一次性气管内滴注炭黑颗粒（Printex90,250μg/50μl）或者生理盐水（50μl）,空白对照组不做任何处理。于染毒后第1、7、28、56、84天处死小鼠,收集小鼠肺组织、肺泡灌洗液（BALF）及外周血等样本,采用HE、免疫组织化学染色法观察小鼠肺组织炎症反应的程... 

【文章来源】：武汉科技大学湖北省

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第1章 炭黑颗粒对小鼠肺部炎症、HDAC6及初级纤毛自噬通路的影响
    1.1 材料与方法
        1.1.1 炭黑颗粒的处理方法
        1.1.2 实验动物处理
        1.1.3 主要仪器
        1.1.4 主要试剂
    1.2 主要试剂配制
    1.3 实验方法
        1.3.1 动物模型构建
        1.3.2 HE染色
        1.3.3 肺部炎性评分
        1.3.4 免疫组织化学法(Immunohistochemistry,IHC)
        1.3.5 Western Blotting分析
        1.3.6 ELISA实验
        1.3.7 统计学分析方法
    1.4 结果
        1.4.1 炭黑颗粒致小鼠肺部炎症反应的实验结果
        1.4.2 炭黑颗粒诱导小鼠肺部炎性细胞因子IL-8的表达水平
        1.4.3 炭黑颗粒对HDAC6、IFT88和IFT20 蛋白表达的肺组织中定位的影响
        1.4.4 炭黑颗粒染毒对小鼠肺部HDAC6蛋白表达的影响
        1.4.5 炭黑颗粒染毒对小鼠肺部自初级纤毛自噬通路的影响
    1.5 讨论
第2章 HDAC6在炭黑颗粒致小鼠肺部炎症反应中的调控作用
    2.1 材料与方法
        2.1.1 炭黑颗粒的处理
        2.1.2 实验动物处理
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 主要试剂
    2.2 主要试剂配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 动物模型构建
        2.3.2 HE染色
        2.3.3 肺部炎性评分
        2.3.4 Western Blotting分析
        2.3.5 Elisa实验
        2.3.6 统计学分析方法
    2.4 结果
        2.4.1 特异性HDAC6抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部炎症的影响
        2.4.2 特异性HDAC6 抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部炎性细胞因子IL-8 表达水平的影响
        2.4.3 特异性HDAC6 抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部HDAC6 表达水平的影响
        2.4.4 特异性HDAC6 抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达水平的影响
        2.4.5 特异性HDAC6 抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部纤毛内转运蛋白IFT88、IFT20表达水平的影响
        2.4.6 特异性HDAC6 抑制剂对炭黑颗粒诱导小鼠肺部SHh蛋白表达水平的影响
    2.5 讨论
第3章 结论
第4章 结语与展望
致谢
参考文献
综述 Hedgehog信号通路在肺发育及肺部疾病中的作用
    参考文献
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目



本文编号：3508763