石墨烯量子点对斑马鱼胚胎发育的毒性影响

发布时间：2017-05-09 19:07

  本文关键词：石墨烯量子点对斑马鱼胚胎发育的毒性影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：采用斑马鱼模型评价石墨烯量子点(GQDs)对其胚胎发育的毒性影响。材料和方法：将受精后4h的斑马鱼胚胎暴露于不同浓度(0、12.5、25、50、100、200μg/mL)的GQDs中,观察GQDs对斑马鱼胚胎的死亡率、孵化率、畸形、心率、体长、自主运动和心血管系统发育的影响,采用Noldus行为学跟踪系统观测幼鱼行为,并用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观测GQDs在斑马鱼体内的分布。结果与结论：(1) GQDs对斑马鱼胚胎发育的影响：随着GQDs浓度的增加,斑马鱼胚胎的孵化率、心率、体长降低,死亡率增加；200 pg/mL处理组中畸形类型最多,包括心包水肿、卵黄囊肿、脊柱弯曲等畸形。在50、100、200μg/mL GQDs中,斑马鱼胚胎的自主运动开始逐渐减少。(2) GQDs对斑马鱼胚胎心血管发育的影响：随着GQDs浓度的增加,心血管发育相关基因flk-1、nkx 2.5、EphrinB2的表达量降低；组织病理学切片也显示,斑马鱼心脏的心肌细胞数量减少,心室壁和心房壁变薄。(3) GQDs在斑马鱼体内的分布：96 hpf时,GQDs的荧光主要分布在斑马鱼的心脏和肠道部位,且心脏部位的荧光稳定,不随血液流动而变化,推测GQDs主要分布在心肌细胞中。激光共聚焦显微镜观察组织病理学切片显示,GQDs主要分布在心肌细胞的胞质。(4) GQDs对斑马鱼幼鱼行为的影响：在可见光实验中,GQDs处理组幼鱼游泳的距离和速率均降低,且呈剂量依赖性；在明-暗交替实验中,GQDs处理组幼鱼行为在光照环境中无明显变化,而在黑暗环境中12.5μg/mL组幼鱼活动明显增加,在25、50、100、200μg/mL处理组幼鱼活动明显减退。
【关键词】：石墨烯量子点 斑马鱼 胚胎 发育毒性
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：O613.71;R114
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 第一章 绪论8-14
• 1.1 石墨烯量子点(GQDs)的研究现状8-11
• 1.1.1 GQDs的性质8
• 1.1.2 GQDs的应用8-9
• 1.1.3 GQDs的体外生物相容性研究现状9-10
• 1.1.4 GQDs的体内毒性研究现状10-11
• 1.2 斑马鱼在纳米毒理学研究中的应用现状11-12
• 1.3 选题依据12-14
• 第二章 石墨烯量子点对斑马鱼胚胎发育的影响14-26
• 2.1 引言14
• 2.2 实验材料14-15
• 2.2.1 实验动物14
• 2.2.2 实验仪器14
• 2.2.3 实验试剂14-15
• 2.2.4 主要实验试剂的配制15
• 2.3 实验方法15-17
• 2.3.1 GQDs表征15
• 2.3.2 斑马鱼饲养及胚胎收集15
• 2.3.3 斑马鱼胚胎毒性实验15-16
• 2.3.4 统计分析16-17
• 2.4 结果17-24
• 2.4.1 GQDs的性质17-18
• 2.4.2 GQDs对斑马鱼胚胎死亡率的影响18
• 2.4.3 GQDs对斑马鱼胚胎孵化率的影响18-19
• 2.4.4 GQDs对斑马鱼胚胎自主运动的影响19-21
• 2.4.5 GQDs对斑马鱼胚胎心率的影响21-23
• 2.4.6 GQDs对斑马鱼胚胎体长的影响23
• 2.4.7 GQDs对斑马鱼胚胎的致畸性23-24
• 2.5 讨论24-26
• 第三章 石墨烯量子点对斑马鱼胚胎心血管系统发育的影响26-36
• 3.1 引言26
• 3.2 实验材料26-27
• 3.3 实验方法27-30
• 3.3.1 斑马鱼总RNA的提取27-28
• 3.3.2 反转录制备cDNA28-29
• 3.3.3 实时荧光定量PCR29
• 3.3.4 组织学切片制作及HE染色29-30
• 3.4 结果30-34
• 3.5 讨论34-36
• 第四章 石墨烯量子点在斑马鱼体内的分布与成像36-44
• 4.1 引言36
• 4.2 实验仪器及材料36
• 4.3 实验方法36-37
• 4.4 结果37-41
• 4.5 讨论41-44
• 第五章 石墨烯量子点对斑马鱼幼鱼行为的影响44-49
• 5.1 引言44
• 5.2 实验仪器及材料44
• 5.3 实验方法44-45
• 5.3.1 可见光实验44-45
• 5.3.2 明暗交替实验45
• 5.4 结果45-47
• 5.5 讨论47-49
• 参考文献49-55
• 在学期间的研究成果55-56
• 致谢56-57
• 病例汇报57-58

【共引文献】

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本文编号：353096