CHIP调控AlCl 3 致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化分子机制
发布时间：2021-12-21 23:21
目的:1.探讨CHIP不同表达状态在三氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化位点中的调控机制。2.阐明CHIP不同结构域在CHIP调控三氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中所发挥的具体机制。方法:1.选择小鼠神经母细胞瘤细胞（N2a）作为实验材料,选取对数生长期的细胞进行1mmol/LAlCl3染毒及CHIP质粒转染,实验分为两部分:一是观察CHIP过表达对染铝细胞tau蛋白的影响,实验分组为:正常对照组,1mmol/L AlCl3组,空质粒组,CHIP质粒转染组,CHIP质粒转染+1mmol/L AlCl3组;二是观察CHIP干扰对染铝细胞tau蛋白的影响:正常对照组,1mmol/LAlCl3组,CHIP shRNA阴性对照组,CHIPshRNA组,CHIPshRNA+1mmol/L AlCl3组;2.选择细胞系同上,对细胞进行1mmol/L AlCl3染毒及CHIP不同结构域质粒转染,实验分为两部分:一是观察CHIP（ΔU-box）在CHIP调控铝...
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2a细胞经CHIP过表达质粒分别转染12h、24h、36h、48h后，CHIP基因相对表达量（图
N2a 细胞经 CHIP 质粒转染并 1mmol/L AlCl3染毒后，细胞中 UPP 通路关键分子蛋白表达情况。WT:0 表示正常对照组未染铝，1mmol/L 表示染铝组；NC:0 表示空质粒对照组未染CHIP：0 表示 CHIP 过表达质粒转染组，1mmol/L 表示 CHIP 过表达质粒转染+染铝组。统果均以内参蛋白 GAPDH 标准化后表示。*：表示与对照组相比，P<0.05。#：与 1mmol/LAlCl3相比，P<0.05。4 N2a 细胞中 tau 蛋白及各磷酸化位点 tau 蛋白表达的变化Westernblot 结果显示：与对照组相比，染铝可引起 pThr231，pSer262，pSer表达结果显著增高（P<0.05），tau-5 和 pThr181 蛋白表达差异无统计学意义；C达可引起 pThr231，pSer262，pSer 396 蛋白表达均有显著降低（P<0.05），tahr181 蛋白表达无统计学差异。空质粒组中各蛋白表达与对照组相比均未出现化。经析因分析显示，在 N2a 细胞中 CHIP 过表达与 AlCl3染毒在 pThr23
16图 3 N2a 细胞 CHIP 质粒转染，经 1mmol/L AlCl3染毒后，细胞中 tau 蛋白及各磷酸化位点tau 蛋白表达的变化。WT:0 表示正常对照组未染铝，1mmol/L 表示染铝组；NC:0 表示空质粒对照组未染铝；CHIP：0 表示 CHIP 过表达质粒转染组，1mmol/L 表示 CHIP 过表达 P<0.05。：与 1mmol/L AlCl3相比，P<0.05。质粒转染+染铝组。统计结果均以内参蛋白 GAPDH 标准化后表示。*：表示与对照组相比，P<0.05。#：与 1mmol/L AlCl3相比，P<0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Tau蛋白及其异常磷酸化在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展[J]. 吴虹辰,胡俊. 局解手术学杂志. 2019(02)
[2]铝神经毒性作用机制研究进展[J]. 夏佳蕊,刘佳琪,李宗高,洪帆,乔乔,刘芳华,赵鑫荣,张立丰. 中国老年学杂志. 2018(13)
[3]CHIP和Hsp70在三氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中的作用[J]. 崔双杰,巨晓芬,潘宝龙,张玲,路小婷. 环境与职业医学. 2018(04)
[4]泛素——蛋白酶体通路与疾病发生的研究进展[J]. 唐珍,罗蓉. 兰州大学学报(医学版). 2014(03)
[5]慢性铝暴露对小鼠学习记忆及tau蛋白磷酸化的影响[J]. 贾志建,路小婷,潘宝龙,王昊,刘莹,牛侨. 环境与职业医学. 2012(04)
[6]Aβ25～35和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响[J]. 赵庆霞,鄢文海,韩雪飞,许燕,邢莹. 中国应用生理学杂志. 2010(02)
[7]阿尔茨海默病中tau蛋白和铝的变化及二者的关系[J]. 赵长安,魏健,王建伟. 新乡医学院学报. 2003(03)
[8]神经退行性疾病神经细胞死亡机理[J]. 王建枝,刘世杰. 国外医学(分子生物学分册). 2003(01)
硕士论文
[1]泛素—蛋白酶体途径调控铝致tau蛋白异常磷酸化的体外研究[D]. 崔双杰.山西医科大学 2018
[2]职业铝接触对作业工人tau蛋白磷酸化的影响及作用[D]. 李瑞.山西医科大学 2016
本文编号：3545365
【文章来源】：山西医科大学山西省
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
2a细胞经CHIP过表达质粒分别转染12h、24h、36h、48h后，CHIP基因相对表达量（图
N2a 细胞经 CHIP 质粒转染并 1mmol/L AlCl3染毒后，细胞中 UPP 通路关键分子蛋白表达情况。WT:0 表示正常对照组未染铝，1mmol/L 表示染铝组；NC:0 表示空质粒对照组未染CHIP：0 表示 CHIP 过表达质粒转染组，1mmol/L 表示 CHIP 过表达质粒转染+染铝组。统果均以内参蛋白 GAPDH 标准化后表示。*：表示与对照组相比，P<0.05。#：与 1mmol/LAlCl3相比，P<0.05。4 N2a 细胞中 tau 蛋白及各磷酸化位点 tau 蛋白表达的变化Westernblot 结果显示：与对照组相比，染铝可引起 pThr231，pSer262，pSer表达结果显著增高（P<0.05），tau-5 和 pThr181 蛋白表达差异无统计学意义；C达可引起 pThr231，pSer262，pSer 396 蛋白表达均有显著降低（P<0.05），tahr181 蛋白表达无统计学差异。空质粒组中各蛋白表达与对照组相比均未出现化。经析因分析显示，在 N2a 细胞中 CHIP 过表达与 AlCl3染毒在 pThr23
16图 3 N2a 细胞 CHIP 质粒转染，经 1mmol/L AlCl3染毒后，细胞中 tau 蛋白及各磷酸化位点tau 蛋白表达的变化。WT:0 表示正常对照组未染铝，1mmol/L 表示染铝组；NC:0 表示空质粒对照组未染铝；CHIP：0 表示 CHIP 过表达质粒转染组，1mmol/L 表示 CHIP 过表达 P<0.05。：与 1mmol/L AlCl3相比，P<0.05。质粒转染+染铝组。统计结果均以内参蛋白 GAPDH 标准化后表示。*：表示与对照组相比，P<0.05。#：与 1mmol/L AlCl3相比，P<0.05。
【参考文献】：
期刊论文
[1]Tau蛋白及其异常磷酸化在肌萎缩侧索硬化症中的研究进展[J]. 吴虹辰,胡俊. 局解手术学杂志. 2019(02)
[2]铝神经毒性作用机制研究进展[J]. 夏佳蕊,刘佳琪,李宗高,洪帆,乔乔,刘芳华,赵鑫荣,张立丰. 中国老年学杂志. 2018(13)
[3]CHIP和Hsp70在三氯化铝致N2a细胞tau蛋白异常磷酸化中的作用[J]. 崔双杰,巨晓芬,潘宝龙,张玲,路小婷. 环境与职业医学. 2018(04)
[4]泛素——蛋白酶体通路与疾病发生的研究进展[J]. 唐珍,罗蓉. 兰州大学学报(医学版). 2014(03)
[5]慢性铝暴露对小鼠学习记忆及tau蛋白磷酸化的影响[J]. 贾志建,路小婷,潘宝龙,王昊,刘莹,牛侨. 环境与职业医学. 2012(04)
[6]Aβ25～35和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响[J]. 赵庆霞,鄢文海,韩雪飞,许燕,邢莹. 中国应用生理学杂志. 2010(02)
[7]阿尔茨海默病中tau蛋白和铝的变化及二者的关系[J]. 赵长安,魏健,王建伟. 新乡医学院学报. 2003(03)
[8]神经退行性疾病神经细胞死亡机理[J]. 王建枝,刘世杰. 国外医学(分子生物学分册). 2003(01)
硕士论文
[1]泛素—蛋白酶体途径调控铝致tau蛋白异常磷酸化的体外研究[D]. 崔双杰.山西医科大学 2018
[2]职业铝接触对作业工人tau蛋白磷酸化的影响及作用[D]. 李瑞.山西医科大学 2016
本文编号：3545365
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