应用免疫磁珠和量子点标记技术快速检测副溶血性弧菌的方法研究
发布时间：2022-01-16 07:38
近年来由副溶血性弧菌引起的食物中毒以及人群暴露规模呈明显的上升趋势,已经超过沙门氏菌,成为我国首要的食源性致病菌。因此加强对食品中副溶血性弧菌的防控,开发快速、准确的检测技术十分必要。目前针对副溶血性弧菌的实验室检测方法存在检测周期长、特异性差、灵敏度低及操作繁琐等缺点,难以满足快速检测的需求。所以建立一种快速、简便、灵敏度高、特异性强的副溶血性弧菌检测方法,对加强食源性疾病的预防和控制具有重要意义。本课题利用免疫磁珠分离技术和量子点荧光标记技术,依据抗原抗体特异性反应的原理,通过免疫磁珠上的抗体与样品中目标菌的特异性结合,从样品中富集分离目标菌,再利用量子点荧光生物探针进行标记,得到免疫磁珠-目标菌-量子点探针“三明治”夹心复合物,利用荧光分光光度计对得到的复合物荧光强度进行检测,从而建立一种基于免疫磁分离技术和量子点荧光标记技术的副溶血性弧菌快速检测方法。1.功能化Fe3O4粒子的制备和表征本实验首先通过水热合成法合成Fe3O4磁性纳米粒子,然后采用微乳液法制备Tween-20修饰的Fe
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 副溶血性弧菌概述
1.1.1 副溶血性弧菌的危害
1.1.2 副溶血性弧菌的流行情况
1.1.3 检测方法
1.2 磁性纳米复合粒子
1.2.1 磁性纳米粒子的制备
1.2.2 磁性纳米复合粒子的制备
1.2.3 磁性纳米复合粒子表面的修饰
1.2.4 磁性纳米复合纳米粒子在医学相关研究中的应用
1.3 免疫荧光标记技术
1.4 研究目的及意义
第2章 材料与方法
2.1 材料和仪器
2.1.1 试剂
2.1.2 试剂的配置
2.1.3 主要仪器
2.1.4 菌株
2.1.5 羧基化量子点与副溶血性弧菌多克隆抗体的来源
2.2 实验方法
2.2.1 功能化Fe_3O_4粒子的制备和表征
2.2.2 免疫磁珠的制备及其对VP富集效率的检测
2.2.3 副溶血性弧菌检测方法的建立
2.2.4 检测方法的评价
2.2.5 统计学方法
2.2.6 检测方法阳性结果判定标准
第3章 实验结果
3.1 功能化磁珠的表征结果
3.2 富集效率的检测
3.3 副溶血性弧菌方法建立
3.4 检测方法的评价
第4章 讨论
4.1 功能化Fe_3O_4粒子的制备和表征
4.2 免疫磁珠的制备及其对VP富集效率的检测
4.3 VP检测方法的建立与效果评价
结论
参考文献
作者简介及攻读硕士期间取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]副溶血弧菌分子致病机制研究进展[J]. 杨芳,李秀娟,徐保红. 中华疾病控制杂志. 2010(06)
[2]PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测副溶血性弧菌tlh基因[J]. 曹小红,朱雪兰,陈艳,刘秀梅. 中国食品卫生杂志. 2009(04)
[3]副溶血弧菌预测模型与风险评估的研究进展[J]. 姬华,韩海红,王洪新,刘秀梅. 食品工业科技. 2009(05)
[4]副溶血性弧菌及其溶血毒素研究进展[J]. 李毅,朱心强. 中国卫生检验杂志. 2008(12)
[5]副溶血性弧菌的致病性及其快速检测[J]. 宁喜斌,刘代新,张继伦. 微生物与感染. 2008(01)
[6]食品中副溶血性弧菌的危害分析、检测与预防控制[J]. 陈瑞英,鲁建章,苏意诚,刘承初. 食品科学. 2007(01)
[7]食品中单核细胞增多李斯特菌的快速检测[J]. 闫冰,李一松,霍贵成,姜毓君. 食品工业科技. 2006(10)
[8]副溶血性弧菌引起食物中毒的微生物学诊断的研究[J]. 何连生,徐淳行,张大帆,杨宁敏. 中国卫生检验杂志. 2006(05)
[9]2003年中国食源性疾病暴发的监测资料分析[J]. 刘秀梅,陈艳,樊永祥,王茂起. 卫生研究. 2006(02)
[10]副溶血弧菌的分子生物学研究进展[J]. 蔡潭溪,蒋鲁岩,黄克和. 中国人兽共患病杂志. 2005(10)
博士论文
[1]海产品中致病性副溶血弧菌PCR快速检测体系建立及定量研究[D]. 祝儒刚.沈阳农业大学 2011
本文编号：3592221
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
Abstract
第1章 前言
1.1 副溶血性弧菌概述
1.1.1 副溶血性弧菌的危害
1.1.2 副溶血性弧菌的流行情况
1.1.3 检测方法
1.2 磁性纳米复合粒子
1.2.1 磁性纳米粒子的制备
1.2.2 磁性纳米复合粒子的制备
1.2.3 磁性纳米复合粒子表面的修饰
1.2.4 磁性纳米复合纳米粒子在医学相关研究中的应用
1.3 免疫荧光标记技术
1.4 研究目的及意义
第2章 材料与方法
2.1 材料和仪器
2.1.1 试剂
2.1.2 试剂的配置
2.1.3 主要仪器
2.1.4 菌株
2.1.5 羧基化量子点与副溶血性弧菌多克隆抗体的来源
2.2 实验方法
2.2.1 功能化Fe_3O_4粒子的制备和表征
2.2.2 免疫磁珠的制备及其对VP富集效率的检测
2.2.3 副溶血性弧菌检测方法的建立
2.2.4 检测方法的评价
2.2.5 统计学方法
2.2.6 检测方法阳性结果判定标准
第3章 实验结果
3.1 功能化磁珠的表征结果
3.2 富集效率的检测
3.3 副溶血性弧菌方法建立
3.4 检测方法的评价
第4章 讨论
4.1 功能化Fe_3O_4粒子的制备和表征
4.2 免疫磁珠的制备及其对VP富集效率的检测
4.3 VP检测方法的建立与效果评价
结论
参考文献
作者简介及攻读硕士期间取得的科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]副溶血弧菌分子致病机制研究进展[J]. 杨芳,李秀娟,徐保红. 中华疾病控制杂志. 2010(06)
[2]PCR法制备地高辛标记DNA探针斑点杂交检测副溶血性弧菌tlh基因[J]. 曹小红,朱雪兰,陈艳,刘秀梅. 中国食品卫生杂志. 2009(04)
[3]副溶血弧菌预测模型与风险评估的研究进展[J]. 姬华,韩海红,王洪新,刘秀梅. 食品工业科技. 2009(05)
[4]副溶血性弧菌及其溶血毒素研究进展[J]. 李毅,朱心强. 中国卫生检验杂志. 2008(12)
[5]副溶血性弧菌的致病性及其快速检测[J]. 宁喜斌,刘代新,张继伦. 微生物与感染. 2008(01)
[6]食品中副溶血性弧菌的危害分析、检测与预防控制[J]. 陈瑞英,鲁建章,苏意诚,刘承初. 食品科学. 2007(01)
[7]食品中单核细胞增多李斯特菌的快速检测[J]. 闫冰,李一松,霍贵成,姜毓君. 食品工业科技. 2006(10)
[8]副溶血性弧菌引起食物中毒的微生物学诊断的研究[J]. 何连生,徐淳行,张大帆,杨宁敏. 中国卫生检验杂志. 2006(05)
[9]2003年中国食源性疾病暴发的监测资料分析[J]. 刘秀梅,陈艳,樊永祥,王茂起. 卫生研究. 2006(02)
[10]副溶血弧菌的分子生物学研究进展[J]. 蔡潭溪,蒋鲁岩,黄克和. 中国人兽共患病杂志. 2005(10)
博士论文
[1]海产品中致病性副溶血弧菌PCR快速检测体系建立及定量研究[D]. 祝儒刚.沈阳农业大学 2011
本文编号：3592221
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