谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激损伤的保护作用研究

发布时间：2017-05-12 10:27

  本文关键词：谷氨酰胺对脓毒症小鼠氧化应激损伤的保护作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：探讨谷氨酰胺是否可以减少脓毒症小鼠的氧化应激损伤，在危重症疾病氧化应激状态下发挥保护作用。 方法： 1.动物分组与造模方法： 5周龄雄性昆明小鼠30只，利用随机数字表，采取完全随机方法将其平均分为三组，每组10只，分别设为对照组，（control, C组）、内毒素组（LPS, L组）、谷氨酰胺组（Gln, G组）。 内毒素组与谷氨酰胺组采用腹腔注射内毒素的方法制造脓毒症动物模型，内毒素的注射剂量为5ml/kg。对照组腹腔注射等量生理盐水。造模成功后，谷氨酰胺组即刻尾静脉注射丙氨酰谷氨酰胺注射液，注射剂量为0.75g/kg。内毒素组尾静脉注射等量无菌生理盐水作为阳性对照，对照组尾静脉注射等量生理盐水作为阴性对照。6小时后终止实验，眼眶取血后采用颈椎脱臼法处死动物，解剖分离动物肝、肾组织，迅速液氮冷冻。动物血低温放置，待血清析出后离心，取血清，液氮冷冻待测。 2.氧化应激指标的测定方法： 每次测试样品前先将样品从液氮中取出在4℃冰箱中解冻。取动物组织块在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，滤纸拭干，准确称重0.3g，放入匀浆管中，按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的匀浆介质（生理盐水2.7ml）于匀浆管中，冰水浴条件下，用眼科小剪尽快剪碎组织块。将玻璃匀浆管置于冰水浴条件下，手动匀浆，30秒/次，间隔30秒，重复6～8次，制成10%的匀浆液。将制备好的10%匀浆液用普通离心机2500转/分，离心15分钟，，取上清液进行测定。部分10%的匀浆液用生理盐水按体积比1:9稀释成1%的组织匀浆待测。为达到实验结果稳定性，制备好的匀浆液都在在制备当天进行测定。 取3组小鼠血清、肝、肾组织匀浆进行氧化应激指标谷胱甘肽过氧化物酶GSH-Px(glutathion peroxidase)、超氧化酶歧化酶SOD(superoxide dismutase)、丙二醛MDA(malonaldehyde)的测量。具体的测量方法按试剂盒说明书进行操作。 3.数据统计方法： 数据的收集与录入使用Excel2003，数据的描述与分析使用SPSS16.0。首先对各组进行正态性与方差齐性检验，如果独立样本的数据服从正态性与方差齐性，采取参数检验方法进行假设检验。两独立样本的比较取用完全独立样本比较的t检验，三个独立样本的比较采用完全独立多样本比较的单因素方差分析。进一步的两两比较采用SNK-q法进行。如果资料不服从正态性与方差齐性，则采用多个独立样本比较的Kruskal-Wallis H非参数检验，进一步的两两比较采用秩转换的方差分析。检验水准α=0.05，P＜0.05，差异具有统计学意义。 结果： 1.谷氨酰胺组的小鼠血清、肝脏和肾脏中的GSH-Px、SOD水平均高于内毒素组，差异具有统计学意义。 2.谷氨酰胺组的小鼠血清、肝脏和肾脏中的MDA水平低于内毒素组，差异具有统计学意义。 结论：脓毒症造成氧化应激与氧化损伤，使用谷氨酰胺可以提高抗氧化酶GSH-Px、SOD的水平，增强抗氧化能力。减少脂质代谢产物MDA含量，减少有毒代谢产物。起到降低氧化应激损伤的作用。
【关键词】：脓毒症 氧化应激 谷氨酰胺
【学位授予单位】：河北医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R459.7;R151.2
【目录】：

• 摘要4-6
• Abstract6-9
• 前言9-11
• 材料与方法11-17
• 结果17-19
• 附图19-21
• 讨论21-25
• 结论25-26
• 参考文献26-29
• 综述29-36
• 参考文献32-36
• 致谢36-37
• 个人简历37

【共引文献】

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本文编号：359551