柿子单宁对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的保护作用

发布时间：2022-01-21 12:10

　　研究目的:本文以柿子单宁为干预物,研究其对高脂膳食诱导小鼠动脉粥样硬化的保护作用及潜在相关机制。研究方法:1.45只7周龄雄性Apo E-/-小鼠随机均分为3组,即普通饲料组（ND）、高脂饲料组（HFD）以及柿子单宁干预组（HFD+25mg/kg·bw PT）。同时以15只相同遗传背景的7周龄野生型C57BL/6J小鼠为对照组（WT）,给予普通饲料。PT干预采用口服灌胃方式,其他各组给予等量的生理盐水,高脂饲料配比:21%脂肪,1.25%胆固醇。2.实验动物在SPF级动物房持续喂养12周,每周称重并记录,待模型成立后收集血清和主动脉样本。主动脉整体油红O染色观察AS病变程度;H&E检测小鼠主动脉病理学变化;透射电镜检测主动脉超微结构变化;试剂盒检测血清TG、TC、HDL-C及LDL-C水平,血清SOD、GSH、MDA水平,炎症因子IL-1β和TNF-α水平,血清ox-LDL浓度;二氢乙啶（Dihydroethidium,DHE）荧光探针检测血管横截面ROS水平;免疫组化分析斑块巨噬细胞极化表型标记物、NOXs的p47phox亚基及CD36的表达;RT-PCR测定主动脉NOXs亚... 

【文章来源】：武汉轻工大学湖北省

【文章页数】：66 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
缩写词中英文照
第1章 绪论
    1.1 动脉粥样硬化的发病机制
        1.1.1 低密度脂蛋白氧化与动脉粥样硬化
        1.1.2 巨噬细胞极化在动脉粥样硬化中的作用
        1.1.3 氧化应激与动脉粥样硬化
    1.2 植物多酚类化合物与动脉粥样硬化
        1.2.1 多酚类化合物预防心血管疾病的研究进展
        1.2.2 单宁预防动脉粥样硬化的研究进展
    1.3 柿子资源的开发
        1.3.1 柿子及其营养成分
        1.3.2 柿子单宁的生物学活性
    1.4 立题背景与研究内容
        1.4.1 立题背景
        1.4.2 研究内容
第2章 柿子单宁对动脉粥样硬化的保护作用
    2.1 引言
    2.2 主要试剂与仪器
        2.2.1 实验动物
        2.2.2 实验材料
        2.2.3 主要试剂
        2.2.4 主要仪器
    2.3 实验方法
        2.3.1 动物分组及饲料配方
        2.3.2 组织样本收集
        2.3.3 主动脉整体油红O染色
        2.3.4 主动脉H&E染色
        2.3.5 电镜标本取材及制备
        2.3.6 统计分析
    2.4 结果与分析
        2.4.1 体重变化及脏器指数
        2.4.2 主动脉整体油红O染色结果
        2.4.3 主动脉H&E染色结果
        2.4.4 主动脉超微结构变化
    2.5 讨论
第3章 柿子单宁对脂质代谢的调节作用
    3.1 引言
    3.2 主要试剂与仪器
        3.2.1 主要试剂
        3.2.2 主要仪器
    3.3 实验方法
        3.3.1 血清脂质指标检测
        3.3.2 肝脏TC、TG检测
        3.3.3 血清ox-LDL检测
        3.3.4 主动脉CD36 mRNA检测
        3.3.5 主动脉CD36免疫组化检测
        3.3.6 统计分析
    3.4 结果与分析
        3.4.1 柿子单宁对小鼠血清脂质的影响
        3.4.2 柿子单宁对小鼠肝脏TC、TG的影响
        3.4.3 柿子单宁对ox-LDL的影响
        3.4.4 柿子单宁对主动脉CD36表达的影响
    3.5 讨论
第4章 柿子单宁对巨噬细胞极化的影响
    4.1 引言
    4.2 主要试剂与仪器
        4.2.1 主要试剂
        4.2.2 主要仪器
    4.3 实验方法
        4.3.1 血清炎症因子检测
        4.3.2 主动脉巨噬细胞极化调控因子mRNA检测
        4.3.3 主动脉巨噬细胞极化表型标记物免疫组化检测
        4.3.4 统计分析
    4.4 结果与分析
        4.4.1 柿子单宁对M1型巨噬细胞炎症因子的影响
        4.4.2 柿子单宁对STATs基因表达的影响
        4.4.3 柿子单宁对巨噬细胞极化表型标志物表达的影响
    4.5 讨论
第5章 柿子单宁对氧化应激水平的调节作用
    5.1 引言
    5.2 主要试剂与仪器
        5.2.1 主要试剂
        5.2.2 主要仪器
    5.3 实验方法
        5.3.1 血清脂质MDA检测：
        5.3.2 血清抗氧化指标检测
        5.3.3 主动脉ROS水平检测
        5.3.4 主动脉NOXs亚基mRNA表达检测
        5.3.5 主动脉p47phox免疫组化检测
        5.3.6 统计分析
    5.4 结果与分析
        5.4.1 柿子单宁对小鼠血清抗氧化指标的影响
        5.4.2 柿子单宁对ROS的影响
        5.4.3 柿子单宁对NOXs亚基mRNA表达的影响
        5.4.4 柿子单宁对p47phox的影响
    5.5 讨论
第6章 总结
    6.1 柿子单宁可延缓高脂膳食小鼠AS的发病进程
    6.2 柿子单宁可改善高脂膳食诱导的AS小鼠脂质代谢紊乱
    6.3 柿子单宁可调节高脂膳食诱导的AS小鼠主动脉巨噬细胞极化
    6.4 柿子单宁可缓解高脂膳食诱导的AS小鼠氧化应激
    6.5 创新点
参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]三种他汀类药物治疗老年动脉粥样硬化性急性脑梗死合并高血脂效果对比观察[J]. 吉凤,徐小林.  山东医药. 2014(28)
[2]巨噬细胞与动脉粥样硬化——亚型及功能[J]. 白瑞娜,郗瑞席,冯志博,李立志.  中国循环杂志. 2014(05)
[3]巨噬细胞极化及其在动脉粥样硬化发生发展中的作用[J]. 周冰冰,李玉洁,李琦,杨庆,翁小刚,陈颖,王娅杰,郭琰,刘栩岑,巩仔鹏,阚晓溪,张瑞杰,朱晓新.  世界科学技术-中医药现代化. 2014(05)
[4]C-PC抑制ox-LDL诱导内皮细胞脂质过氧化损伤的机制研究[J]. 褚现明,王妮,孙雪霞,李冰,安毅,徐庆科.  中国药理学通报. 2014(04)
[5]推进示范区建设,共创慢性病防控新局面[J]. 董建群.  中国医学前沿杂志(电子版). 2014(03)
[6]活性氧影响拮抗菌及果蔬采后抗病性的研究进展[J]. 李超兰,杨其亚,张红印,张晓云.  食品科学. 2014(21)
[7]巨噬细胞极化与动脉粥样硬化[J]. 周瑶瑶,张俊峰.  心血管病学进展. 2014(01)
[8]苯酚-硫酸法测定多糖方法的改进[J]. 姜琼,谢妤.  江苏农业科学. 2013(12)
[9]巨噬细胞的研究进展[J]. 耿华,袁小林.  国际免疫学杂志. 2013 (06)
[10]巨噬细胞极性改变与动脉粥样硬化的关系[J]. 李全忠,孙婧,钱宗杰.  医学综述. 2013(07)

博士论文
[1]荔枝壳原花青素对动脉粥样硬化的保护作用及其机制研究[D]. 荣爽.华中科技大学 2012

硕士论文
[1]硫酸锌对高脂喂养ApoE基因敲除小鼠保护作用研究[D]. 蒋金金.山西医科大学 2012
[2]家蝇蛆粉对ApoE-/-小鼠抗动脉粥样硬化作用及其机制的探讨[D]. 肖明珠.广东药学院 2011
[3]核桃青皮中多酚类物质及其抗氧化性的分析[D]. 万政敏.内蒙古农业大学 2007



本文编号：3600234