七种水果提取物抗氧化和抑制肿瘤活性研究

发布时间：2017-05-12 18:09

  本文关键词：七种水果提取物抗氧化和抑制肿瘤活性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：现代医学研究表明自由基具有强氧化性，能攻击生物大分子，损害机体的组织和细胞，导致癌症、炎症、心脏病、心血管疾病、糖尿病等疾病的发生，流行病学研究表明，增加水果的摄入量能够降低患癌和慢性疾病的几率。本文以甜柿、黑李、红李、杨梅、山竹、猕猴桃、杏七种水果丙酮提取物为研究对象，分析总多酚、总黄酮、花青素等活性成分含量。利用化学模拟和细胞培养体系，系统评价其抗氧化及抑制肿瘤细胞增殖能力，并通过流式细胞术、ELISA等技术探究黑李提取物抑制肿瘤作用机制。 七种水果提取物中均含有丰富的多酚、黄酮和花青素。其中甜柿总多酚含量最高，达3.416mg没食子酸当量/g鲜重，甜柿总黄酮含量也是最高，达9.532mg芦丁当量/g鲜重，黑李花青素含量最高，达1.569mg矢车菊-3-葡糖苷当量/g鲜重。通过分析七种提取物的总还原能力及清除自由基（·OH、ABTS·+、DPPH·）能力发现甜柿对三种自由基清除能力最强，IC50依次为：1.582mg/mL、0.845mg/mL、0.045mg/mL，其次是杨梅、黑李、红李、山竹、猕猴桃、杏，，且抗氧化能力与总多酚含量之间具有很好的相关性（P0.01）。 细胞培养实验结果表明七种水果提取物均具有抑制乳腺癌MCF-7细胞和结肠癌Caco-2细胞增殖的能力，黑李提取物的抑制作用最强，IC50分别为：747μg/mL和384μg/mL，其他六种水果提取物抑制肿瘤作用的强弱依次为杨梅、红李、山竹、猕猴桃、杏、甜柿。除甜柿外的六种水果提取物抑制肿瘤细胞能力与多酚和花青素的含量之间具有很好的相关性（P0.01）。花青素含量对两种肿瘤细胞增殖抑制起着更重要作用。 经黑李提取物处理的结肠癌Caco-2细胞倒置显微镜观察发现体积明显变小、变圆，染色质粗糙贴壁能力下降，细胞密度下降；提取其总DNA经琼脂糖凝胶电泳可观察到凋亡细胞特征性的梯度条带；提示黑李提取物能够显著地诱导结肠癌Caco-2细胞凋亡；流式细胞术细胞周期分析结果显示黑李提取物能够阻滞结肠癌Caco-2细胞在G2/M期或G0/G1期，使癌细胞增殖速度减慢。黑李提取物处理后细胞凋亡相关蛋白CytC、caspase-9、caspase-3的表达量随浓度增大而增强。说明黑李提取物诱导细胞凋亡作用可能是通过线粒体介导通路实现的。
【关键词】：水果 抗氧化 抑制肿瘤 细胞凋亡
【学位授予单位】：天津大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R151
【目录】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-9
• 第一章 文献综述9-18
• 1.1 人体氧化损伤与癌症9-13
• 1.1.1 自由基简介9-10
• 1.1.2 自由基与癌症的关系10-11
• 1.1.3 常见癌症研究现状11-12
• 1.1.4 抗氧化剂与癌症预防12-13
• 1.2 七种常见水果简介13-15
• 1.2.1 甜柿13
• 1.2.2 杨梅13-14
• 1.2.3 山竹14
• 1.2.4 杏14
• 1.2.5 猕猴桃14
• 1.2.6 李14-15
• 1.3 天然活性物质生理功能15-17
• 1.3.1 多酚类化合物15-16
• 1.3.2 黄酮类化合物16
• 1.3.3 花青素类化合物16-17
• 1.4 研究背景、目的和意义17
• 1.5 研究内容17-18
• 第二章 七种水果生物活性物质含量及抗氧化活性研究18-29
• 2.1 实验材料18-19
• 2.1.1 实验仪器18-19
• 2.1.2 主要试剂19
• 2.2 试验方法19-22
• 2.2.1 七种水果丙酮提取物制备19-20
• 2.2.2 活性物质含量分析20
• 2.2.3 抗氧化活性的评价20-21
• 2.2.4 数据分析21-22
• 2.3 结果与分析22-26
• 2.3.1 总多酚、总黄酮、花青素含量22-23
• 2.3.2 总还原能力的测定23-24
• 2.3.3 抗氧化能力的评价24-26
• 2.3.3.1 ABTS 自由基清除活性24-25
• 2.3.3.2 DPPH 自由基清除活性25
• 2.3.3.3 羟基自由基清除活性25-26
• 2.4 七种水果生物活性成分与抗氧化能力相关性分析26-27
• 2.5 小结27-29
• 第三章 七种水果提取物抑制肿瘤活性研究29-37
• 3.1 实验材料29-30
• 3.1.1 药物和试剂29-30
• 3.1.2 实验器材30
• 3.1.3 细胞株30
• 3.2 实验方法30-32
• 3.2.1 细胞培养30
• 3.2.2 细胞计数30-31
• 3.2.3 样品配制31
• 3.2.4 MTT 实验31
• 3.2.5 统计学分析31-32
• 3.3 结果与讨论32-35
• 3.3.1 七种水果提取物抑制乳腺癌 MCF-7 细胞增殖作用率32-33
• 3.3.2 七种水果提取物抑制结肠癌 Caco-2 细胞增殖作用33-34
• 3.3.3 抗氧化与肿瘤抑制相关性分析34-35
• 3.4 小结35-37
• 第四章 黑李丙酮提取物诱导 Caco-2 结肠癌细胞凋亡机理研究37-46
• 4.1 实验材料37-38
• 4.1.1 实验仪器37-38
• 4.1.2 实验试剂38
• 4.1.3 细胞株38
• 4.2 实验方法38-40
• 4.2.1 样品处理38
• 4.2.2 细胞形态学观察38-39
• 4.2.3 DNA ladder 的检测39
• 4.2.4 流式细胞术检测细胞周期39
• 4.2.5 流式细胞术检测细胞凋亡39
• 4.2.6 CytC、caspase-9、caspase-3 相对表达量的测定39-40
• 4.2.7 统计学分析40
• 4.3 结果与讨论40-45
• 4.3.1 细胞形态学观察40-41
• 4.3.2 琼脂糖凝胶电泳41-42
• 4.3.3 流式细胞术检测细胞凋亡42-43
• 4.3.4 流式细胞术检测细胞周期43-44
• 4.3.5 CytC、caspase-9、caspase-3 相对表达量的测定44-45
• 4.4 小结45-46
• 第五章 全文结论与展望46-47
• 5.1 全文结论46
• 5.2 展望46-47
• 参考文献47-55
• 发表论文和参加科研情况说明55-56
• 致谢56

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 陈昌杰;刘臣彪;章菊;杨清玲;藤风猛;;葡萄籽提取物对乳腺癌细胞增殖和Survivin基因表达的影响[J];中国中药杂志;2009年04期

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本文编号：360482