铅暴露对肥胖小鼠血脑脊液屏障调控Th17细胞功能的影响

发布时间：2022-08-11 21:15

　　目的本研究应用小鼠模型,初步阐明铅染毒对肥胖小鼠神经炎症损伤的加剧作用和Th17细胞的影响,继而筛查脉络丛上皮细胞中调控Th17细胞进入中枢神经系统中的调控因子,为铅染毒致中枢神经系统损伤的机制研究提供依据。方法1 SPF级健康成年雄性C57BL/6小鼠60只,随机分为普通饲料组和高脂饲料组,当高脂饲料组小鼠平均体重大于普通饲料组小鼠平均体重的20%,即肥胖模型造模成功;再将普通饲料组普通饲料组小鼠分为对照组和铅染毒组,高脂饲料组随机分为肥胖组和肥胖+铅染毒组。对照组和肥胖组给予正常饮水;铅染毒组和肥胖+铅染毒组给予质量浓度为250 mg.L^-1的醋酸铅饮用水,染毒周期为12周;2应用Morris水迷宫、新物体识别、旷场实验来检测小鼠的神经行为学功能变化;3利用比色法检测小鼠血清中的甘油三酯（TG）、总胆固醇（T-CHO）的含量;4应用免疫印迹法检测小鼠海马和下丘脑中IL-1β、Iba1、TNF-a、IL-6、TGF-β、IL-17A、IL-22,以及小鼠脉络丛中CCL21的蛋白表达量;5应用流式细胞术检测血液和脑组织中Th17细胞比例变化;6应用CCK-8试剂盒... 

【文章页数】：60 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英文缩略表
引言
第1章 实验研究
    1.1 材料与方法
        1.1.1 主要仪器与试剂
        1.1.2 实验动物分组和处理
        1.1.3 实验动物的生长发育情况
        1.1.4 神经行为功能的检测
        1.1.5 小鼠血清中甘油三酯和总胆固醇含量的测定
        1.1.6 小鼠海马、下丘脑中炎症因子及脉络丛中趋化因子蛋白的检测
        1.1.7 小鼠脑组织和血液中TH17/CD4~+T细胞百分率的检测
        1.1.8 大鼠脉络丛上皮细胞Z310细胞系的培养与处理
        1.1.9 大鼠脉络丛上皮细胞Z310细胞系存活率的检测
        1.1.10 大鼠脉络丛上皮细胞Z310细胞系趋化因子的筛选
        1.1.11 大鼠脉络丛上皮细胞Z310细胞系趋化因子的验证
        1.1.12 统计方法
    1.2 结果
        1.2.1 铅染毒对肥胖小鼠体重的影响
        1.2.2 铅染毒对肥胖小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯的影响
        1.2.3 铅染毒对肥胖小鼠神经行为功能的影响
        1.2.4 铅染毒对肥胖小鼠脑组织中炎症因子蛋白表达的影响
        1.2.5 铅染毒对肥胖小鼠脑组织中Th17细胞及释放因子的影响
        1.2.6 铅染毒肥胖小鼠血液中Th17/CD4~+T细胞百分率的变化
        1.2.7 醋酸铅和棕榈酸染毒对Z310细胞存活率的影响
        1.2.8 醋酸铅和棕榈酸单独或联合染毒对Z310细胞中趋化因子的筛选
        1.2.9 铅染毒对肥胖小鼠脉络丛中趋化因子CCL21蛋白表达的影响
        1.2.10 CCL21对血脑脊液屏障转运Th17细胞的影响
    1.3 讨论
        1.3.1 铅染毒对肥胖小鼠神经行为的影响
        1.3.2 铅染毒对肥胖小鼠脑组织神经炎症的影响
        1.3.3 铅染毒对肥胖小鼠脑组织中Th17细胞及其释放因子的影响
        1.3.4 CCL21在血脑脊液屏障调控Th17细胞进入中枢神经系统中的影响
    1.4 结论
参考文献
结论
第2章 综述 铅暴露与肥胖对血脑脊液屏障调控 Th17 细胞的影响
    2.1 铅染毒与中枢神经系统损伤
        2.1.1 铅的摄入与代谢途径
        2.1.2 铅的神经损伤机制
    2.2 肥胖与中枢神经系统损伤
    2.3 血脑脊液屏障的免疫调节功能
    2.4 血脑脊液屏障调控Th17细胞的研究现状
    参考文献
致谢
在学期间研究成果



本文编号：3675402