动源性食品中磺胺及喹诺酮免疫层析试纸条的研究

发布时间：2022-10-20 17:31

　　本文使用三种不同颜色的可视化标记材料（胶体碳、蓝色乳胶微球、胶体金）以磺胺类药物和喹诺酮类药物作为目标物,系统研究建立了单残留或多残留的免疫层析试纸条,并应用于动源性食品中磺胺类药物和喹诺酮类药物残留检测。以胶体碳作为标记物标记磺胺喹噁啉单克隆抗体,优化建立胶体碳磺胺免疫层析试纸条方法,方法检测限5 μg/L,在猪肉、鸡肉和牛奶等实际样品中的检测限为50μg/kg。以蓝色乳胶微球标记诺氟沙星单克隆抗体,建立蓝色乳胶微球喹诺酮免疫层析分析方法,方法检测限2 μg/L,在猪肉、鸡肉、虾等真实样品中的检测限为20 μg/kg。以胶体碳和蓝色乳胶微球为标记材料,分别标记磺胺喹嗯啉单克隆抗体和诺氟沙星单克隆抗体,在以上两个单条的基础上建立乳胶微球和胶体碳多残留免疫层析试纸条方法,方法可同时检测磺胺类药物和喧诺酮类药物,并输出不同的视觉信号。该方法中磺胺检测限为5 μg/L,诺氟沙星检测限为2 μg/L,在猪肉、鸡肉、虾等实际样品中的磺胺类检测限为50μg/kg,喹诺酮类检测限为20 μg/kg。以胶体金和蓝色乳胶微球为标记材料,分别标记磺胺喹嗯淋单克隆抗体和诺氟沙星单克隆抗体,以蓝色乳胶微球标记... 

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 研究意义
        1.1.1 兽药应用情况
        1.1.2 兽药残留及危害
    1.2 兽药残留常用分析方法
    1.3 磺胺类药物概述
        1.3.1 磺胺类药物结构与理化性质
        1.3.2 磺胺类药物毒理作用
        1.3.3 磺胺类限量标准
        1.3.4 磺胺喹噁啉常用检测方法
    1.4 喹诺酮类药物概述
        1.4.1 喹诺酮类药物的结构与理化性质
        1.4.2 喹诺酮类毒理性质
        1.4.3 喹诺酮类限量标准
        1.4.4 喹诺酮类常用检测方法
    1.5 免疫层析技术
        1.5.1 免疫层析技术概述
        1.5.2 免疫层析试纸条标记材料
    1.6 免疫层析试纸条未来发展
    1.7 论文的研究目的及意义
    1.8 论文的研究内容
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 主要试剂与药品
        2.1.2 主要设备与材料
        2.1.3 实验主要溶液的配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 诺氟沙星与磺胺喹噁啉单克隆抗体的纯化
        2.2.2 喹诺酮与磺胺包被原的制备
    2.3 试纸条的优化
        2.3.1 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析方法的建立
        2.3.2 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析试纸条检出限的确定
        2.3.3 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析试纸条的特异性实验
        2.3.4 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析试纸条稳定性评价
        2.3.5 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析试纸条检测实际样品
    2.4 蓝色乳胶微球诺氟沙星免疫层析试纸条
        2.4.1 蓝色乳胶微球标记诺氟沙星免疫层析试纸条方法的建立
        2.4.2 蓝色乳胶微球免疫层析试纸条检出限的确定
        2.4.3 蓝色乳胶微球免疫层析试纸条检测方法的特异性
        2.4.4 蓝色乳胶微球标记抗体的免疫层析试纸条的稳定性
        2.4.5 蓝色乳胶微球喹诺酮免疫层析试纸条实际样品的检测
    2.5 多残留免疫层析试纸条
        2.5.1 蓝色乳胶微球与胶体碳多残留免疫层析分析方法的建立
        2.5.2 蓝色乳胶微球与胶体碳免疫层析试纸条检测限的确定
        2.5.3 蓝色乳胶微球与胶体碳多残留免疫层析试纸条检测实际样品
        2.5.4 蓝色乳胶微球与胶体金标记的免疫层析试纸条方法的建立
        2.5.5 蓝色乳胶微球与胶体金标记的免疫层析试纸条检测限的确定
        2.5.6 蓝色乳胶微球与胶体金标记的免疫层析试纸条检测实际样品
        2.5.7 胶体金与胶体碳标记的多残留免疫层析试纸条方法的建立
        2.5.8 胶体碳与胶体金标记的免疫层析试纸条检测限的确定
        2.5.9 胶体碳与胶体金标记的免疫层析试纸条检测实际样品
    2.6 商业化试剂盒验证试纸条方法的有效性
3 结果与讨论
    3.1 胶体碳标记磺胺免疫层析试纸条
        3.1.1 胶体碳标记磺胺抗体条件的优化
        3.1.2 胶体碳磺胺免疫层析试纸条层析条件的优化
        3.1.3 胶体碳标记免疫层析试纸条检出限的确定
        3.1.4 胶体碳标记磺胺喹噁啉免疫层析试纸条的特异性实验
        3.1.5 实际样品检测限的确定
        3.1.6 稳定性评价
    3.2 蓝色乳胶微球标记喹诺酮免疫层析试纸条
        3.2.1 蓝色乳胶微球标记抗体条件的优化
        3.2.2 检测限的确定
        3.2.3 蓝色乳胶微球标记诺氟沙星抗体免疫层析试纸条的特异性实验
        3.2.4 实际样品检测限的确定
        3.2.5 蓝色乳胶微球免疫层析试纸条稳定性实验
    3.3 蓝色乳胶微球与胶体碳多残留免疫层析试纸条
        3.3.1 蓝色乳胶微球与胶体碳多残留免疫层析试纸条层析条件的优化
        3.3.2 蓝色乳胶微球与胶体碳多残留免疫层析试纸条检测限的确定
        3.3.3 实际样品检测限的确定
    3.4 蓝色乳胶微球与胶体金多残留免疫层析试纸条
        3.4.1 胶体金标记磺胺免疫层析试纸条条件的优化
        3.4.2 蓝色乳胶微球与胶体金多残留免疫层析试纸条层析条件的优化
        3.4.3 检测限的确定
        3.4.4 乳胶微球与胶体金多残留免疫层析试纸条样品检测限的确定
    3.5 胶体碳与胶体金多残留免疫层析试纸条
        3.5.1 胶体金标记诺氟沙星免疫层析试纸条的优化
        3.5.2 胶体金与胶体碳多残留免疫层析试纸条层析条件的优化
        3.5.3 胶体碳与胶体金多残留免疫层析试纸条检测限的确定
        3.5.4 实际样品检测限的确定
    3.6 商业化试纸条验证其有效性
4 结论
    4.1 全文总结
    4.2 论文的创新点
    4.3 论文的不足之处
5 展望
6 参考文献
7 攻读硕士学位期间发表论文情况
8 致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]上转换荧光猝灭试纸条检测牛奶中磺胺喹恶啉[J]. 胡高爽,张燕,生威,李志,王俊平,王硕.  食品科学. 2017(24)
[2]分子印迹固相萃取-超高效液相色谱串联质谱法测定猪肉中磺胺二甲氧嗪[J]. 祖广权,赵琪,谭策,苏立强,邹雪莹.  分析试验室. 2017(03)
[3]高效液相色谱法测定猪肉中五种磺胺类药物残留量[J]. 吴敏,陈相宇.  中国畜牧兽医文摘. 2017(01)
[4]乳胶免疫层析法定量检测猪尿液中的盐酸克伦特罗[J]. 管笛,魏颖,王旗,李俊博,武会娟.  食品科学. 2017(12)
[5]牛羊日本血吸虫抗体检测试纸条的研制[J]. 阳爱国,周煜,郭莉,董国栋,邓永强,侯巍,吴云飞,田慧云,马坤,陈冬,文豪,朱银宝.  动物医学进展. 2015(05)
[6]同时检测牛奶中喹诺酮类和庆大霉素残留的胶体金免疫层析方法研究[J]. 李向梅,王战辉,肖希龙,王照鹏,温凯,吴小平,夏曦,武晋孝,江海洋.  中国农业科学. 2014(19)
[7]免疫层析试纸条标记探针研究进展[J]. 谢雪钦.  食品安全质量检测学报. 2014(07)
[8]磺胺类兽药的环境行为研究进展[J]. 任甜甜,吴银宝.  畜牧与兽医. 2013(05)
[9]兽药残留检测技术研究进展[J]. 高洁,苗虹.  食品安全质量检测学报. 2013(01)
[10]基于免疫胶体金试纸条检测盐酸克伦特罗的便携式光电型传感器[J]. 张洪才,刘春燕,刘国艳,陈小连,叶雨丹,王艺如,柴春彦.  分析化学. 2012(06)

博士论文
[1]磺胺类及氟喹诺酮类药物兔单克隆抗体的制备与多残留检测技术研究[D]. 刘娜.浙江大学 2013

硕士论文
[1]高效液相色谱—串联质谱法检测动物源性食品中的抗生素[D]. 杨朝琳.浙江师范大学 2016
[2]基于二氧化硅和聚合物修饰的水溶性Cdse/ZnS荧光量子点的制备和应用研究[D]. 王欣.河南大学 2012
[3]国内外兽药产业现状与发展趋势研究[D]. 陆昕.华中农业大学 2008
[4]磺胺类兽药残留化学发光免疫检测方法的研究[D]. 刘俊伟.天津科技大学 2008
[5]三种氟喹诺酮类药物在鸡组织中残留的微生物法检测研究[D]. 邢应寿.安徽农业大学 2005



本文编号：3694997