DR-pprM/pprI转基因果蝇辐射抗性及丝裂霉素C抗性研究

发布时间：2023-02-05 11:14

　　目的:耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans,DR)对电离辐射、丝裂霉素C(mitomycin C,MMC)和过氧化氢等极端环境因素的冲击有强大抵抗力,课题组前期结果表明耐辐射奇球菌pprM/pprI基因在其极端环境生存中发挥了极大的作用。本研究主要通过使用¹³⁷Cs-γ射线辐照和MMC处理DR-pprM/pprI转基因果蝇,然后观察其各项生理、氧化应激指标和DNA损伤情况,研究pprM/pprI基因对果蝇辐射抗性和MMC抗性的影响,以及耐辐射奇球菌pprM/pprI基因在黑腹果蝇机体内的功能与作用机制。为人类辐射防护的研究和临床上MMC的使用提供理论依据。方法:1.PCR技术鉴定DR-pprM/pprI转基因果蝇。采用不同剂量(0-2000 Gy)¹³⁷Cs-γ射线处理DR-pprM、DR-pprI转基因果蝇和对照果蝇yw25C6、yw68A4,测定其生殖、生存和运动能力,观察各组果蝇辐照后是否产生畸形情况,并统计畸形率。2.使用含不同浓度MMC(0、40、80μg/mL)的培养基喂养DR-pprM/pprI转基因果蝇...

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
主要英文缩略词
第1章 引言
第2章 pprM/pprI转基因果蝇的辐射抗性研究
    2.1 实验材料及仪器
        2.1.1 实验果蝇品系的培养、扩增与杂交
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 果蝇品系GAL4杂交启动 pprI、pprM基因表达
        2.2.2 pprM/pprI转基因品系果蝇的PCR检测
        2.2.3 生存能力的测定
        2.2.4 运动能力的测定
        2.2.5 生殖能力的测定
        2.2.6 致畸率的测定
        2.2.7 统计分析
    2.3 结果和分析
        2.3.1 pprM/ pprI转基因品系果蝇的PCR检测结果
        2.3.2 pprM/pprI基因对辐照后果蝇生存率的影响
        2.3.3 pprM/pprI基因对辐照后果蝇运动能力的影响
        2.3.4 pprM/pprI基因对辐照后果蝇生殖能力的影响
        2.3.5 pprM/pprI基因对辐照后果蝇畸形率的影响
    2.4 本章小节
第3章 pprM/pprI转基因果蝇的丝裂霉素C抗性研究
    3.1 实验材料及仪器
        3.1.1 实验果蝇品系的培养、增殖及杂交
        3.1.2 主要试剂
        3.1.3 主要仪器
    3.2 实验方法
        3.2.1 实验分组
        3.2.2 生存能力的测定
        3.2.3 运动能力的测定
        3.2.4 生殖能力的测定
        3.2.5 果蝇总蛋白的提取与蛋白浓度测定
        3.2.6 果蝇总活性氧(ROS)检测
        3.2.7 果蝇超氧化物歧化酶(SOD)检测
        3.2.8 果蝇过氧化氢酶(CAT)检测
        3.2.9 果蝇还原型谷胱甘肽(GSH)检测
        3.2.10 果蝇丙二醛(MDA)检测
        3.2.11 统计分析
    3.3 结果和分析
        3.3.1 MMC对果蝇寿命、生殖及运动方面的影响
        3.3.2 pprM/pprI基因对MMC处理后果蝇生存率的影响
        3.3.3 pprM/pprI基因对MMC处理后果蝇运动能力的影响
        3.3.4 pprM/pprI基因对MMC处理后果蝇生殖能力的影响
        3.3.5 ROS含量的影响
        3.3.6 SOD活力的影响
        3.3.7 CAT活力的影响
        3.3.8 GSH的含量
        3.3.9 MDA含量的影响
    3.4 本章小结
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
文献综述
    参考文献
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：3734873