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多氯联苯153通过PI3K/Akt/NF-κB信号通路对SW1353细胞的促骨性关节炎作用研究

发布时间:2023-04-09 16:44
  目的:探讨2,2’,4,4’,5,5’–六氯联苯(2,2′,4,4′,5,5′-hexachlorobiphenyl,PCB153)的促骨关节炎(osteoarthritis,OA)效应,以及可能的作用机制是否涉及PI3K/Akt/NF-κB信号通路,为阐明环境污染物对OA发病的影响及作用机制提供实验依据。方法:SW1353细胞系购置于中国科学院上海生科院细胞资源中心。使用DMEM培养基、37℃、5%CO2、饱和湿度培养箱进行培养,并使用PCB153及PI3K抑制剂LY294002进行处理。CCK-8法检测不同浓度PCB153(0~50μM)对SW1353细胞增殖活力的影响;免疫组织化学染色法检测细胞中MMP13、Ⅱ型胶原的表达水平;Western blot法检测MMP13、p-PI3K、PI3K、p-Akt、Akt、p-NF-κB的蛋白表达水平;免疫荧光法检测细胞中MMP13、p-Akt、p-NF-κB的表达水平。结果:1、不同浓度PCB153对SW1353细胞增殖活力的影响与空白对照组相比,DMSO对细胞增殖活力无明显影响(P>0.05);与control组相比,PCB153...

【文章页数】:71 页

【学位级别】:硕士

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摘要
Abstract
英文缩略语
1前言
2 材料与方法
    2.1 主要试剂与仪器
        2.1.1 软骨细胞的培养
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 试剂配制
    2.2 实验方法
        2.2.1 SW1353细胞培养
        2.2.2 SW1353细胞增殖活力的测定
        2.2.3 细胞处理
        2.2.4 免疫细胞化学
        2.2.5 Western blot检测相关蛋白表达水平
        2.2.6 免疫荧光
    2.3 统计学分析
3 结果
    3.1 PCB153处理对SW1353细胞增殖活力的影响
    3.2 PCB153 处理对SW1353细胞MMP13 表达的影响
    3.3 PCB153 处理对SW1353细胞Ⅱ型胶原表达的影响
    3.4 不同浓度PCB153处理对SW1353细胞p-Akt影响的时间-效应关系
    3.5 PCB153处理对SW1353细胞PI3K/Akt及NF-κB信号通路的影响
    3.6 LY294002 预处理后,PCB153对SW1353 细胞NF-κB信号的影响
4 讨论
5 结论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
实践报告
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号:3787382

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