外周血淋巴细胞中谷胱甘肽含量变化与辐射剂量的相关性研究

发布时间：2017-05-19 13:07

  本文关键词：外周血淋巴细胞中谷胱甘肽含量变化与辐射剂量的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：当人体受到辐射时，可产生大量的活性氧（reactive oxygen species，ROS）和自由基（free radical，FR），细胞内的还原型谷胱甘肽（reduced glutathione,GSH）抗氧化系统能够有效清除辐射所引起的ROS和FR，降低射线对细胞的损伤作用。本研究观察外周血淋巴细胞中GSH含量变化与辐射剂量之间的相关性，并建立GSH含量与辐射剂量之间的剂量-效应曲线，从而在职业受照射人员体检及辐射应急事故中，更快地进行生物剂量估算，并能够对不同辐射损伤程度的人群进行分类。 方法：选取淋巴细胞计数在正常范围内的健康成人血标本120份，中位年龄42岁，男女比例为31:29，离体时间不超过4h，分成5个剂量组，每组24份血标本，给予直线加速器6MV-X线，源皮距（source skin distance, SSD）100cm，剂量建成1.5cm，分别照射0Gy、1Gy、2Gy、3Gy、5Gy，照射后2小时，利用淋巴细胞分离液提取出淋巴细胞，再利用谷胱甘肽试剂盒检测淋巴细胞中的总谷胱甘肽（total glutathione, T-GSH）、氧化性谷胱甘肽（oxidized glutathione, GSSG）以及GSH的含量，比较不同剂量照射后，淋巴细胞中GSH含量的差异，并建立剂量-效应曲线，观察GSH的含量与辐射剂量之间的相关性。此外，同一血标本在X线照射后，加入带有植物血凝素（phytohemagglutinin，PHA）的RPMI-1640培养基中进行培养，37℃培养44h，加入秋水仙素阻滞细胞的有丝分裂，继续培养至52h，收获中期分裂相细胞。经低渗、预固定、固定、离心、制片后读片，每张片子观察100个细胞，数出其中的双着丝粒数，计算出双着丝粒染色体畸变率。微核实验为同一血标本经X线照射后，加入带有PHA的RPMI培养基，37℃培养40h后，加入松胞素-B(Cytochalasin B)，继续培养至72h收获，经低渗、固定、制片、Giemsa染色后读片，每张片子观察500个双核细胞，数出其中的微核数，计算出每个剂量组的微核形成率。 结果： GSH含量与辐射剂量之间呈直线负相关，剂量-效应曲线拟合公式为y=-0.59x+5.97，R2=0.95。GSH/GSSG比值与辐射剂量之间呈三次函数变化趋势，剂量-效应曲线拟合公式为y=-0.08x3+0.82x2-2.78x+4.69，R2=0.98。五个剂量组的染色体畸变率分别为0，10.08%，41.17%，73.08%，207.42%，与辐射剂量之间关系呈二次函数变化趋势，剂量-效应曲线拟合公式为y=7.78x2+2.28x+0.64，R2=0.9984。五个剂量组的微核形成率分别为1.7‰，43.5‰，84.4‰，197.2‰，，478.8‰，与辐射剂量之间关系亦呈二次函数变化趋势，剂量-效应曲线公式为y=15.9x2+16.3x+0.55，R2=0.9981。且GSH含量与双着丝粒染色体畸变率之间存在相关性，r=0.966；GSH含量与微核率之间存在相关性，r=0.968。 结论：GSH含量与辐射剂量之间呈直线负相关，且GSH含量与染色体畸变率和微核率之间存在较好的相关性，故利用GSH含量变化进行辐射生物剂量估算具有较高的可行性，与传统的CA分析法与CB微核法相比，通过GSH含量进行照射剂量估算更为省时、简便。
【关键词】：还原型谷胱甘肽 辐射剂量 染色体畸变 CB微核
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R144
【目录】：

• 缩略词表及中英文对照6-7
• 中文摘要7-9
• Abstract9-12
• 1 前言12-17
• 1.1 还原型谷胱甘肽与辐射12-15
• 1.2 染色体畸变分析15-16
• 1.3 CB 微核法16-17
• 2 材料与方法17-28
• 2.1 实验材料17-19
• 2.1.1 血标本17
• 2.1.2 药物及试剂17
• 2.1.3 仪器与设备17-18
• 2.1.4 常用试剂配制18-19
• 2.2 实验方法19-28
• 2.2.1 血样条件19
• 2.2.2 照射条件19
• 2.2.3 淋巴细胞的提取19-20
• 2.2.4 还原型谷胱甘肽的测定20-25
• 2.2.5 染色体畸变分析25-26
• 2.2.6 CB 微核法26-27
• 2.2.7 统计学方法27-28
• 3 实验结果28-36
• 3.1 受照淋巴细胞内 GSH 含量及 GSH/GSSG 比值变化28-32
• 3.2 染色体畸变分析结果32-34
• 3.3 CB 微核法结果34-35
• 3.4 淋巴细胞内氧化还原状态与染色体畸变、微核形成的相关性35-36
• 4 讨论36-39
• 4.1 受照淋巴细胞内 GSH 含量及 GSH/GSSG 比值变化36-37
• 4.2 染色体畸变率与辐射剂量呈正相关37-38
• 4.3 微核率与辐射剂量呈正相关38-39
• 4.4 GSH 含量与染色体畸变率及微核率之间的相关性39
• 5 结论39-41
• 6 参考文献41-48
• 个人简历48-49
• 致谢49-50
• 综述：生物剂量的估算方法50-58
• 参考文献54-58

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 陈英;周平坤;吴可;;放射损伤生物剂量估算技术研究[J];辐射防护;2008年06期

  本文关键词：外周血淋巴细胞中谷胱甘肽含量变化与辐射剂量的相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：378765