Efp蛋白介导芹菜素抗心肌缺氧/复氧损伤保护作用的机制研究

发布时间：2023-05-13 05:11

　　目的:芹菜素属于黄酮类化合物,广泛存在于多种蔬菜、中药材中。研究发现其具有多种药理学活性,其中发现具有抗心肌缺血再灌注损伤的保护作用但其机制还尚未清楚。本实验采用了H9c2心肌细胞,成功建立H9c2心肌缺氧/复氧(A/R)损伤模型,并利用已经构建成功的efp-si RNA腺病毒,深入探讨芹菜素抗H9c2心肌样细胞缺氧复氧(A/R)损伤的保护作用与雌激素效应环指蛋白(efp)蛋白之间的关系。方法:采用状态良好的H9c2心肌细胞,经常规培养后随机分成五组,每组重复六次:(1)正常对照组(Control)、(2)缺氧/复氧组(A/R)、(3)芹菜素+A/R组(apigenin+A/R)、(4)芹菜素+阴性对照+A/R组(apigenin+NC+A/R)、(5)芹菜素+efp-si RNA+A/R组(apigenin+efp-si RNA+A/R)。采用MTT比色法测定各实验组细胞存活率;采用Western blotting(免疫印迹)法测定efp蛋白表达水平;采用流式细胞仪测定各实验组细胞的细胞凋亡水平以及细胞内线粒体膜电位(Δψm)稳定性、活性氧(ROS)含量;采用酶联免疫法测定各实验组细...

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【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
英文缩写及全称和中文对照表
第1章 引言
第2章 材料与方法
    2.1 主要材料及试剂
    2.2 实验主要仪器和设备
    2.3 实验方法
        2.3.1 H9c2心肌细胞的培养
        2.3.2 腺病毒感染目的H9c2心肌细胞
        2.3.3 构建H9c2心肌细胞缺氧复氧A/R模型
        2.3.4 采用MTT比色法测定H9c2心肌细胞存活率
        2.3.5 Western Blotting法检测H9c2心肌细胞中efp蛋白表达
        2.3.6 生化指标检测
    2.4 处理数据
第3章 结果
    3.1 不同浓度芹菜素对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞存活率的影响
    3.2 不同浓度芹菜素对H9c2心肌细胞A/R损伤后efp蛋白表达影响
    3.3 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后efp蛋白表达的影响
    3.4 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞存活率的影响
    3.5 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后乳酸脱氢酶(LDH)活性的影响
    3.6 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞凋亡的影响
    3.7 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞线粒体膜电位（?Ψ）的影响
    3.8 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后细胞生成ROS的影响
    3.9 芹菜素、efp-si RNA对H9c2心肌细胞A/R损伤后超氧化物歧化酶SOD、过氧化物酶GSH-Px和MDA的影响
第4章 讨论
第5章 结论
参考文献
综述
    参考文献



本文编号：3815371