用AFLP技术筛选淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关分子标记

发布时间：2024-03-25 00:32

　　蚊媒病是全世界最重要的人类传染病之一，严重危害人类身心健康。化学防制是控制蚊媒病的一个重要手段。实践证明杀虫剂对于控制蚊媒病的传播非常有效。然而随着杀虫剂的长期、大量使用，蚊媒的抗药性也随之发生和发展。抗药性已成为当前控制蚊媒病的最大障碍。发现并研究新的抗药性靶标将有助于阐明抗药性的分子基础和寻找抗药性的治理方法。 大量研究表明，蚊杀虫剂抗性性状是一种数量性状。因此，建立蚊抗性-敏感杂交系，筛选遗传标记，是研究蚊的抗性遗传机理和防制的重要基础。本研究首先采用淡色库蚊溴氰菊酯抗性（R）、敏感（S）品系进行正、反交，得到两个杂交F2代群体，并对比观察其生物学特性；以WHO成蚊接触筒生物测定法将F2个体的表型区分为10-60分钟击倒时间点和24小时恢复与未恢复8种表型，采用生存分析法分析蚊在溴氰菊酯选择压力下的生存情况；接着，采用分群分析法（BSA法)对杂交F2代溴氰菊酯抗性相关的分子标记进行筛选分析。用AFLP引物筛选所建立的抗药性2个极端水平基因池，得到与溴氰菊酯抗性性状紧密连锁的特异性DNA片段；并分别在F2抗性、敏感群体中进行验证。 本研究通过淡色库蚊溴氰菊酯抗性、敏感品系进行正、反...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
前言
材料与方法
    一、 材料
        （一） 供试蚊
        （二） 主要试剂
        （三） 主要溶液配方
        （四） 主要仪器设备
    二、 方法
        （一） 淡色库蚊溴氰菊酯抗性、敏感杂交系的建立
        （二） 抗性性状鉴定与检验
        （三） BSA 法筛选遗传标记
        （四） 杂交 F2 群体 AFLP 分子标记多态性鉴定
结果
    一、 淡色库蚊溴氰菊酯抗性、敏感杂交系的建立
        （一） 人工交配试验成功率
        （二） 杂交系和自交系 F1 代生物学特性对比观察
        （三） 杂交系和自交系 F2 代抗性水平检测（幼虫浸渍法）
    二、 淡色库蚊溴氰菊酯抗性、敏感杂交系的抗性性状鉴定与检验
        （一） 杂交系 F2 群体的抗性性状鉴定
        （二） 杂交系 F2 群体的抗性性状的统计学检验
    三、 BSA 法筛选与抗药性相关的 AFLP 分子标记
        （一） 单蚊 DNA 质量鉴定
        （二） BSA 法构建淡色库蚊溴氰菊酯抗性、敏感基因池
        （三） AFLP 扩增多态性带型分析
        （四） 抗性、敏感 DNA 池 AFLP 引物多态性分析
    四、 在杂交系 F2 群体中鉴定 AFLP 分子标记的多态性分析
        （一） AFLP 标记 R 的多态性分析
        （二） AFLP 标记 S 的多态性分析
讨论
小结
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间发表文章情况
致谢



本文编号：3938259