奶酪中抗生素抗性基因检测及奶酪分离乳酸菌耐药性分析

发布时间：2024-04-01 05:26

　　抗生素抗性基因与细菌耐药性密切相关,其在食品中的存留状况越来越受到关注。奶酪是一种即食性发酵食品,在我国的消费量呈快速增长的趋势,本研究利用荧光定量PCR检测技术对国内外干酪和再制干酪样品中8大类抗生素抗性基因进行了检测,以期揭示其在奶酪制品中的存留和分布特点。结果显示:干酪和再制干酪这两类奶酪中存留了高丰度的抗性基因,除万古霉素类抗性基因外,其余7大类抗性基因在干酪和再制干酪样品中均检出,再制干酪中的各大类抗性基因检出率明显低于干酪样品,其中再制干酪中检出率较高的是氨基糖苷类、四环素类和大环内脂类-林可酰胺类-链阳性菌素B(MLSB)类抗性基因,干酪样品中检出率较高的是FCA(氟喹诺酮类、喹诺酮类、氟苯尼考、氯霉素和酰胺醇)类和氨基糖苷类抗性基因。分离自样品的18株乳酸菌药敏测试结果显示:耐药率较高的药物为磺胺恶唑(90.9%)和苯唑西林(86.36%);敏感率较高的是四环素(100%)和氨苄西林(100%)、氯霉素(81.8%);中介率最高的是环丙沙星(72.7%)和诺氟沙星(67.9%),上述研究结果表明市售奶酪中残留的抗生素抗性基因是一个不容忽视的问题。

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

图1奶酪抽提细菌总DNA16SrDNA鉴定

用试剂盒从奶酪中抽提的细菌总DNA用16SrDNAV3区段的通用引物进行检测,结果显示所有样品的的细菌DNA抽提验证正确如图1所示。本研究采用的QPCR技术对不同来源奶酪中8大类抗性基因的存留情况进行了检测,如表2所示,根据不同的抗性基因,设计对应的引物予以检测,例如氨基糖苷类....

图3奶酪制品中4大抗性机制ARG统计结果

进一步根据抗性基因的4种抗性机制,对每个奶酪样品ARGs做统计分析见图3(a)和图3(b),图中展现出每类样品总共检出的基因中不同抗性机制ARG的所占百分比,图中的参照列为待检测的不同抗性机制ARGS所占百分比,结果显示不同样品中不同抗性机制ARGs检出数目存在差异,在干酪样品中....

图4分离菌16SrDNA的PCR扩增产物电泳图

分离菌株的16SrDNA特异引物扩增结果显示,各分离菌株均扩增出大小在1.5kb左右的片段(见图4),将目的片段进行回收,并将回收片段送至上海生工生物公司进行测序,测序结果经BLAST(https://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi)比对分析,....

图2奶酪制品中8大类抗性基因检出比率

表3奶酪制品中8大类抗性机制对应检出基因个数FCA氨基糖苷大环内酯其他磺胺四环素万古霉素β内酰胺JKL427101626017SWISS1018111031604KB17304409021GLTB182....

本文编号：3945041