砷、锌对雄性大鼠生殖功能的联合作用

发布时间：2017-05-26 06:30

  本文关键词：砷、锌对雄性大鼠生殖功能的联合作用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的 观察亚慢性饮水砷暴露对雄性大鼠睾丸组织的毒性作用，，以及不同剂量的锌与砷联合，对大鼠生殖毒性的拮抗作用。探讨锌拮抗砷的生殖毒性可能的作用机制。 方法 将40只4周龄的SPF（specific pathogen free）级雄性SD（Sprague-Dawley）大鼠分成五组，每组8只，分别为：①对照组：双蒸水；②单纯染砷组：4mg/kg NaAsO2；③砷加低锌组：4mg/kg NaAsO2+8mg/kg ZnSO4；④砷加中锌组：4mg/kg NaAsO2+20mg/kg ZnSO4；⑤砷加高锌组：4mg/kg NaAsO2+50mg/kg ZnSO4。连续灌胃染毒60天，取血和双侧睾丸，苏木精伊红染色（hematoxylin eosin，HE）观察睾丸组织形态学改变，放射免疫法测定血清中睾酮（testosterone，T）的含量，免疫组织化学法测定睾丸中Fas蛋白的表达，酶联免疫吸附法（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）测睾丸组织丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase，LDH）的活性，RT-PCR法检测睾丸中CuZn-SOD mRNA的表达，火焰原子吸收法测定睾丸组织中锌元素的含量。 结果 与对照组相比单纯染砷组大鼠体重明显降低，三个加锌组与单纯染砷组相比体重正常，单纯染砷组睾丸组织重量也明显降低（P0.05）。中锌与高锌组与单纯染砷组比较，睾丸重量正常（P0.05）。与单纯染砷组比较，低锌组睾丸重量差异无统计学意义，睾丸脏器系数也无统计学意义（P0.05）。 HE染色结果显示：单纯染砷组各级的生精细胞都减少且排列疏松，管腔中只有少量精子；低锌组生精细胞和成熟精子数量均较少，管腔内出现脱落细胞；中锌组和高锌组各级生精细胞都有增加，管腔中成熟精子增多，形态结构正常。 免疫组化结果：单纯染砷组睾丸组织中的Fas蛋白表达量显著高于对照组，三个加锌组Fas蛋白的表达都明显降低。砷加低锌组和高锌组Fas蛋白表达高于对照组（P0.05）。砷加中锌组Fas蛋白表达与对照组无统计学差异（P0.05）。 放射免疫测定结果：与对照组比较，单纯染砷组的血清睾酮含量显著下降，低锌、中锌及高锌组与单纯染砷组比较都显著上升（P0.05），而高锌组的睾酮含量与中锌组比较，反而出现下降。 火焰原子吸收法结果：和对照组相比，单纯染砷组大鼠睾丸锌含量明显降低，低锌组也明显比对照组低，高锌组则明显比对照组高（P0.05）。中锌组睾丸锌含量与对照组比差异无统计学意义（P0.05）。 PCR结果：与对照组相比，单纯染砷组CuZn-SOD mRNA表达量降低,高锌组表达升高（P0.05），低锌和中锌组与对照组相比无统计学意义（P0.05）；中、高锌组与单纯染砷组比较CuZn-SOD mRNA表达均升高（P0.05）。 ELISA结果：与对照组相比，单纯染砷组和砷加低、高锌组的MDA含量都明显的上调，而中锌组却明显的下调；中、高锌组睾丸MDA都明显低于单纯染砷组（P0.05）。与对照组比较，单纯染砷组和砷加低、高锌组的睾丸组织的LDH和SOD活力都有明显的下降，中锌组的SOD比对照组则明显上升（P0.05），而中锌组LDH与对照组比差异无统计学意义（P0.05）；与单纯染砷组比较，中锌组和高锌组的LDH和SOD活性明显上升（P0.05）。 结论 饮水砷暴露可以引起雄性大鼠睾丸组织病理学改变，睾酮分泌减少，睾丸锌含量下降，Fas蛋白表达增多，出现脂质过氧化损伤，影响CuZn-SOD mRNA的表达，对大鼠的睾丸组织和生殖功能造成损害。适当剂量的锌可以拮抗这种毒性损伤作用，为砷中毒的防治提供实验依据。
【关键词】：亚砷酸钠 硫酸锌 睾丸 脂质过氧化
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R114
【目录】：

• 英汉缩略语名词对照5-7
• 摘要7-10
• ABSTRACT10-14
• 前言14-16
• 1 材料与方法16-26
• 2 结果26-32
• 3 讨论32-36
• 4 结论36-37
• 参考文献37-42
• 附图42-45
• 文献综述45-52
• 参考文献49-52
• 致谢52-53
• 攻读硕士学位期间发表论文情况53-54

【参考文献】

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本文编号：395944