中华按蚊常用杀虫剂的抗性研究

发布时间：2017-05-26 06:38

  本文关键词：中华按蚊常用杀虫剂的抗性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：为落实我国2010-2020年疟疾消除行动规划,实现2020年全国消除疟疾的目标,对疟疾媒介蚊虫的可持续控制非常重要。到目前为止,我国有多区域报道了中华按蚊对常用杀虫剂产生了抗性,对其抗药性水平、抗性分布和发展动态的了解是可持续控制中华按蚊的当务之急。本研究针对中华按蚊实验室品系,用生物学方法测定了其对幼虫和成蚊常见杀虫剂和2种新型杀虫剂的敏感性,获得杀虫剂敏感性背景清晰的实验室参考品系。同时,对其成虫和幼虫的非特异性酯酶(NSE)、多功能氧化酶(MFO)和谷胱甘肽转移酶(GST)的酶活水平进行了研究,了解了该品系的三种代谢酶的活性及其频率分布,为酶学检测抗性提供方法；通过对kdr基因频率的研究,了解其是否具有击倒抗性。在对实验室品系进行研究的基础上,利用同样检测方法,测定了采集于云南普洱和四川成都两个曾经是疟疾高发区的野外种群的抗性水平,分析了其可能的抗性机制,为当地下一步的蚊虫化学防治提供了依据。我国各地在长期的中华按蚊抗药性监测工作中,积累了大量的数据,但这些数据分散在不同的杂志、书籍或单位中,缺乏系统管理和分析,也难以成为指导中华按蚊防控的信息。本研究收集了我国中华按蚊1960年至2013年抗药性调查或监测数据,并建立数据库,以便于抗药性数据的管理,挖掘,以及更好地服务于抗性治理。结果如下：1.中华按蚊实验室品系成蚊对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和氯菊酯敏感,对DDT呈现抗性；与现有的文献相比,幼蚊对溴氰菊酯敏感,LC50为0.0025 mg/L；高效氯氰菊酯较军事医学科学院微生物流行病研究所的实验室品系不敏感,其LC5o为0.0047 mg/L(是后者的约4倍)；氯菊酯、双硫磷、多杀菌素和呋虫胺系本实验室首次测定,LC50分别为0.019、0.1125、0.0047、0.1744mg/L。成蚊和幼虫的NSE活性分别是30.75和125.15 nmol1α-乙酸萘酯/(min·mg pr),与思茅种群和成都种群相比都低(幼虫：思茅种群是本品系2.6倍；成蚊：思茅种群和成都种群与本品系相比分别为7.7倍和4.1倍)。中华按蚊实验室品系kdr基因突变(TGT突变为TTT或TTG)频率为28.84%。2.中华按蚊思茅种群和成都种群成蚊对DDT和溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和氯菊酯产生抗性。但在测定的三个种群中,思茅种群成蚊和幼虫的NSE活性都最高(如上所述)；成蚊GST最高(是实验室品系的2.4倍),但幼虫的GST活性较实验室品系低,成蚊和幼虫的GST活性差异较大(6.7倍)；成蚊和幼虫MFO酶活水平最低。思茅种群的kdr基因突变频率为36.67%。可见,思茅种群抗性产生主要是由于NSE和GST酶活升高,kdr基因突变所导致；成都种群三种代谢酶的活性都有所升高可能是其产生抗性的主要机制之一。3.通过对中华按蚊抗药性资料数据库的分析发现,中华按蚊对溴氰菊酯的抗性测定数据分布在11省68个调查点,其中52个(76.47%)调查点的结果显示中华按蚊产生抗性；对DDT的抗性测定数据分布在15省67个调查点,其中56个(83.58%)调查点显示中华按蚊对DDT产生抗性；对马拉硫磷的抗性测定数据分布在6省29个调查点,其中15个(51.72%)调查点的中华按蚊发现了对马拉硫磷的抗性；对残杀威的抗性测定数据分布在3省12个调查点,其中3个(25%)调查点的中华按蚊对残杀威有抗性。中华按蚊抗溴氰菊酯种群对高效氯氰菊酯、氯菊酯、马拉硫磷和DDT产生交互抗性。应结合当地的杀虫剂使用情况和抗性现况进行个性化抗性治理。
【关键词】：中华按蚊 杀虫剂 抗药性 非特异性酯酶 多功能氧化酶 谷胱甘肽转移酶 kdr基因 交互抗性
【学位授予单位】：中国疾病预防控制中心
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R184.31
【目录】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 第一章 绪论9-18
• 1.1 中华按蚊9
• 1.2 中华按蚊抗药性及其主要机制9-14
• 1.2.2 抗性的生理生化基础9-13
• 1.2.3 抗性检测方法13-14
• 1.3 我国卫生杀虫剂使用情况14-18
• 第二章 中华按蚊实验室品系对杀虫剂的敏感性,代谢酶活性和kdr基因突变频率18-36
• 2.1 材料与方法18-27
• 2.1.1 试虫18-19
• 2.1.2 主要杀虫剂和试剂19
• 2.1.3 主要仪器19-20
• 2.1.4 中华按蚊敏感性生物学测定20-21
• 2.1.5 中华按蚊代谢酶活性测定21-23
• 2.1.6 中华按蚊Kdr基因突变检测23-27
• 2.2 结果与分析27-33
• 2.2.1 中华按蚊成蚊对杀虫剂的敏感性27-28
• 2.2.2 中华按蚊幼虫对杀虫剂的敏感性28
• 2.2.3 中华按蚊代谢酶比活力28-29
• 2.2.4 中华按蚊酶活力频率分布29
• 2.2.5 中华按蚊三种代谢酶活力与蛋白含量的相关29-33
• 2.2.6 三种代谢酶酶活力之间的相关性分析33
• 2.2.7 中华按蚊实验室品系等位基因频率分布33
• 2.3 讨论33-36
• 第三章 中华按蚊思茅种群和成都种群的杀虫剂抗药性研究36-51
• 3.1 材料与方法36-39
• 3.1.1. 采样区域基本信息36-37
• 3.1.2 试虫采集及饲养37-38
• 3.1.3 中华按蚊野外种群成蚊抗药性测定38
• 3.1.4 中华按蚊野外种群的蚊种鉴定38-39
• 3.1.5 中华按蚊野外种群酶活测定39
• 3.1.6 中华按蚊野外种群kdr基因突变检测39
• 3.2 结果与分析39-48
• 3.2.1 中华按蚊野外种群分子鉴定39-40
• 3.2.2 中华按蚊成蚊对杀虫剂的敏感性40-41
• 3.2.3 中华按蚊野外种群代谢酶比活力测定41
• 3.2.4 中华按蚊野外种群酶活力频率分布41-44
• 3.2.5 中华按蚊三种代谢酶活力与蛋白含量的相关性分析44-46
• 3.2.6 中华按蚊三种代谢酶比活之间的相关性分析46-48
• 3.2.7 中华按蚊不同种群代谢酶抗性个体百分率48
• 3.2.8 中华按蚊思茅种群等位基因频率分布48
• 3.3 讨论与结论48-51
• 第四章 中华按蚊抗药性监测数据库的建立和分析51-70
• 4.1 材料与方法51-53
• 4.1.1 抗药性数据的收集51
• 4.1.2 抗药性数据的整理51-52
• 4.1.3 抗药性数据的统计与处理52-53
• 4.2 结果与分析53-68
• 4.2.1 基本信息53-55
• 4.2.2 中华按蚊的抗药性水平55-68
• 4.3 讨论与结论68-70
• 第五章 结论70-71
• 参考文献71-79
• 发表文章79-80
• 致谢80

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