基于铜纳米线放大的汞离子高灵敏比色检测法

发布时间：2024-07-07 03:58

　　将滚环扩增技术与铜纳米线相结合进行信号放大,建立高选择性、高灵敏的汞离子比色检测新方法。以链霉亲和素修饰的磁珠为探针捕获和分离基质,将生物素修饰的引物链固定到其表面。汞离子存在时,模板链将通过T-Hg²⁺-T作用与引物链结合。加入T4连接酶及DNA聚合酶引发滚环扩增反应形成超长单链DNA。与短单链DNA互补形成的长双链DNA可作为铜纳米线沉积模板,加入盐酸释放出大量铜离子催化底物氧化显色。在0. 005～1. 0 nmol/L范围,汞离子浓度与吸收信号呈良好线性关系,检出限低至3. 7 pmol/L。

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【部分图文】：

图2不同条件下的吸收光谱图

不同条件下的吸收光谱如图2所示，仅TMB存在时吸收信号很低(曲线a)，溶液几乎无色，进一步加入H2O2(曲线b)或Cu2+(曲线c)，吸收信号无明显变化，溶液仍接近无色。当H2O2和Cu2+共同存在时，吸收信号显著增大(曲线d)，溶液颜色变黄。这些结果表明，Cu2+能够有效催化H....

图3加Hg2+前、后滚环扩增反应及产物与HP杂交后凝胶电泳成像图

对加Hg2+前后吸收信号进行比较以验证方法可行性。从图4可知，无Hg2+存在时吸收信号较低(曲线a)，溶液为淡黄色，该信号为磁珠表面CP产生的背景信号。当加入0.5nmol/LHg2+时，吸收信号迅速增强(曲线b)，溶液颜色加深。当Hg2+浓度增大到1.0nmol/L时，吸....

图4不同Hg2+浓度下的吸收光谱图

图3加Hg2+前、后滚环扩增反应及产物与HP杂交后凝胶电泳成像图2.5Hg2+检测条件的优化

图5不同CP浓度(A),RCA反应时间(B)，杂交时间(C)，纳米铜沉积时间(D)对Hg2+检测的影响

对一些实验条件进行优化。优化结果如图5所示，获得最优CP浓度0.1μmol/L(图5A)，滚环扩增时间60min(图5B)，扩增产物与HP杂交时间30min(图5C)，铜纳米线沉积时间10min(图5D)。2.6Hg2+的线性范围与检出限

本文编号：4003120