体外牛磺酸抑制糖酵解调控M1型巨噬细胞极化

发布时间：2025-02-05 10:32

　　 目的研究牛磺酸调控M1型巨噬细胞极化的分子机制。方法人急性单核细胞白血病细胞系THP-1细胞经100 nmol/L佛波酯处理24h后诱导分化为M0型巨噬细胞;M1型极化组—M0型巨噬细胞经10 ng/ml脂多糖和20ng/ml干扰素γ刺激48h诱导极化为M1型巨噬细胞;牛磺酸处理组—在M1型极化组的基础上,分别加入的牛磺酸与脂多糖、干扰素γ共培养48h。实时荧光定量PCR检测M1型巨噬细胞极化相关标志物:肿瘤坏死因子α(TNF-α)、环加氧酶2(COX-2)、CXC趋化因子配体-10(CXCL-10)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达水平;微量法试剂盒分别检测糖酵解相关酶—己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性;用刃天青检测细胞内线粒体呼吸链代谢酶活性。结果 M1型极化组:M1型极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显升高,己糖激酶(HK)、乳酸脱氢酶(LDH)活性均增加,线粒体呼吸链代谢酶活性降低;牛磺酸处理组:M1型巨噬细胞极化相关标志物COX-2、TNF-α、IL-6和CXCL-10的mRNA水平明显降低,己糖激酶(HK)、乳酸脱...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养：
        1.2.2 细胞极化及分组：
        1.2.3 倒置显微镜观察细胞形态：
        1.2.4 刃天青检测活性：
        1.2.5 qPCR检测M1型巨噬细胞极化相关标志物环加氧酶2(cyclooxygenase 2,COX-2）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factorα，TNF-α）、白细胞介素6(interleukin 6,IL-6）、CXC趋化因子配体-10(CXC motif chemokine ligand-10,CXCL-10)mRNA表达水平：
        1.2.6 微量法试剂盒测试细胞内糖酵解相关酶：
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 倒置显微镜观察细胞形态学变化（图1)
    2.2 牛磺酸处理后刃天青检测细胞线粒体呼吸链代谢酶活性增加(图2)
    2.3 牛磺酸处理后M1型极化相关基因标志物
    2.4 牛磺酸处理后糖酵解相关酶HK和LDH活性降低(图4)
3 讨论



本文编号：4029699