从生食鱼肉中提取GII型诺如病毒的不同方法的比较
发布时间:2017-06-10 11:11
本文关键词:从生食鱼肉中提取GII型诺如病毒的不同方法的比较,由笔耕文化传播整理发布。
【摘要】:目的本研究比较了多种可能适用于生食水产鱼肉中诺如病毒(No V)的提取方法。方法人工污染GII型No V三文鱼肉样品,通过病毒洗脱、浓缩、核酸提取,以及实时荧光定量反转录-聚合酶链式反应(RT-q PCR)检测等步骤的比较和优化,提高样品中No V的检测成功率和回收率。结果采用Tri/Glycine/Beef extract缓冲溶液洗脱、PEG/Na Cl溶液沉降、增加氯仿-正丁醇(1∶1,V/V)溶液萃取等步骤,可以有效富集样品中的No V,并有效去除样品中的PCR抑制成分。优化后的检测方案可以将人工污染GII型No V的鱼肉样品的回收率由不足3%提高至15.15%,检测灵敏度可以达到17.3 RT-PCRU/25 g。结论优化后的病毒提取方法具有良好的耐用性和重现性,适合于生食水产鱼肉中No V的快速检测。
【作者单位】: 上海市食品药品检验所;
【关键词】: 诺如病毒 提取 鱼肉 生食 水产品 实时荧光定量反转录PCR 回收率 检测
【分类号】:R155.5
【正文快照】: 诺如病毒(norovirus,No V)是杯状病毒科的一员,在世界范围内是引发非细菌性腹泻的最主要原因之一[1-3],有68%~80%的肠道疾病暴发是由No V感染造成的[4-5]。贝类可以在其部分器官内富集No V,食用携带No V的贝类是引起病毒感染和暴发的主要途径[6-8]。此外,生食水产品和半加工水
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,本文编号:438273
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