硒拮抗镉对鸡脾淋巴细胞免疫和炎症因子的影响

发布时间：2017-09-02 15:07

  本文关键词：硒拮抗镉对鸡脾淋巴细胞免疫和炎症因子的影响

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【摘要】：镉是环境污染物并且对生物体有潜在的毒性,在工业上的大量使用,已变成污染人类和环境的主要重金属,蓄电池、冶炼、煤矿等是主要污染物的来源。已经知道硒和镉有相互生物学作用,硒是微量矿物质,在动物和人类的健康上具有很重要的作用。本研究主要研究镉/硒在禽类对免疫因子和炎症因子的影响。首先培养鸡脾淋巴细胞,用镉(10-6 mol/L的氯化镉),硒(10-7 mol/L的亚硒酸钠),二者混合和对照组作用鸡脾淋巴细胞分别为12h,,24h,,36h,,48h,60h。收集每个时间点的细胞分别提取RNA和蛋白和检测IL-1β,IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的m RNA表达水平和NF-κB,COX-2的蛋白表达水平。和对照组和加硒组比较,加镉组IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ的mRNA表达水平显著降低。相反,IL-1β,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的mRNA表达水平显著增加。在硒加镉组,IL-2,IL-4,IL-10,IL-17,IFN-γ的m RNA表达水平比相应加镉组的高,但是没有达到加硒组和对照组的水平。硒加镉组IL-1β,NF-κB,INOS,COX-2,TNF-α和PGE2的mRNA表达水平比相应加镉组的低。NF-κB和COX-2的蛋白表达水平和m RNA表达水平的结果一致。硒部分拮抗镉诱导的毒性。
【关键词】：硒 镉 免疫因子 炎症因子 鸡脾淋巴细胞
【学位授予单位】：东北农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114
【目录】：

• 摘要8-9
• 英文摘要9-10
• 1 前言10-20
• 1.1 镉的毒性及其研究进展10-13
• 1.1.1 镉理化性质及其在自然界的分布10
• 1.1.2 镉污染的来源10-11
• 1.1.3 机体内镉的代谢11
• 1.1.4 镉污染的现状11
• 1.1.5 镉的毒性11-13
• 1.1.5.1 镉的器官毒性12
• 1.1.5.2 镉的生殖毒性12-13
• 1.1.5.3 镉对免疫的影响13
• 1.2 硒的作用及其研究进展13-16
• 1.2.1 硒的理化性质和分布14
• 1.2.2 硒的吸收与排泄14-15
• 1.2.3 硒的生物学效应15-16
• 1.2.3.1 硒对免疫系统的影响15-16
• 1.2.3.2 硒拮抗镉16
• 1.3 免疫和炎症因子16-19
• 1.4 试验的目的和意义19-20
• 2 材料与方法20-28
• 2.1 主要仪器20
• 2.2 主要试剂20-21
• 2.3 主要试剂的配制方法21-22
• 2.4 试验方法22-28
• 2.4.1 鸡脾淋巴细胞悬浮和处理的准备22
• 2.4.2 免疫和炎症基因的mRNA表达检测22-25
• 2.4.2.1 RNA的提取22-23
• 2.4.2.2 RNA反转录合成cDNA23
• 2.4.2.3 实时定量PCR引物的设计与合成23-24
• 2.4.2.4 实时定量PCR24-25
• 2.4.2.5 Pfaffl法分析基因表达的相对差异25
• 2.4.3 免疫和炎症因子的蛋白表达检测25-26
• 2.4.3.1 蛋白的提取25
• 2.4.3.2 蛋白的定量25-26
• 2.4.3.3 Western检测蛋白表达26
• 2.4.4 试验数据的统计分析26-28
• 3 结果与分析28-34
• 3.1 RT-PCR检测结果28-33
• 3.1.1 鸡脾淋巴细胞IL-1β mRNA的表达28
• 3.1.2 鸡脾淋巴细胞IL-2 mRNA的表达28-29
• 3.1.3 鸡脾淋巴细胞IL-4 mRNA的表达29
• 3.1.4 鸡脾淋巴细胞IL-10 mRNA的表达29
• 3.1.5 鸡脾淋巴细胞IL-17 mRNA的表达29-30
• 3.1.6 鸡脾淋巴细胞IFN-γ mRNA的表达30
• 3.1.7 鸡脾淋巴细胞COX-2 mRNA的表达30-31
• 3.1.8 鸡脾淋巴细胞INOS mRNA的表达31
• 3.1.9 鸡脾淋巴细胞NF-κB mRNA的表达31-32
• 3.1.10 鸡脾淋巴细胞PGE_2 mRNA的表达32
• 3.1.11 鸡脾淋巴细胞TNF-α mRNA的表达32-33
• 3.2 Western Blot检测结果33-34
• 4 讨论34-38
• 5 结论38-39
• 致谢39-40
• 参考文献40-45
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 王光胜;耿德勤;王元伟;陈孝东;杨同慧;常春红;;亚硒酸钠对大鼠脑缺血再灌注损伤的海马神经元的影响[J];南方医科大学学报;2010年10期

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本文编号：779249