SD-PMA-ddPCR检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌

发布时间：2017-09-13 09:43

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【摘要】：【目的】检测食品中单核细胞增生李斯特氏菌活菌。【方法】利用脱氧胆酸钠(SD)对受损细胞预处理,然后使叠氮溴化丙锭(PMA)进入受损细胞与DNA发生共价交联,提取细菌基因组DNA进行微滴式数字PCR(dd PCR)检测。【结果】0.1%SD和5.0 mg/L PMA协同作用,可以有效抑制108 CFU/m L的单核细胞增生李斯特氏菌死菌DNA的PCR扩增。经过SD和PMA对样品预处理,dd PCR可以在死菌存在条件下,定量检测鸡肉中单核细胞增生李斯特氏菌活菌,消除了"假阳性"结果的出现。活菌灵敏度检测结果显示:SD-PMA-dd PCR的灵敏度为2.0 copies/20μL。SD-PMA-dd PCR方法精密度和稳定性良好。【结论】SD-PMA-dd PCR在检测食源性致病菌方面有巨大的发展空间。
【作者单位】： 威海出入境检验检疫局检验检疫技术中心;山东出入境检验检疫局;
【关键词】： 叠氮溴化丙锭 脱氧胆酸钠 微滴式数字PCR 单核细胞增生李斯特氏菌
【基金】：国家质检总局科技计划项目(No.2014IK114)~~
【分类号】：R155.5
【正文快照】： 随着社会的发展和人们对健康的关注,食品安全已经成为影响广泛而深远的社会性问题。单核细胞增生李斯特氏菌是一种常见的食源性致病菌,生命力很强,人感染后可导致脑膜炎、胃肠炎、败血症等[1-3],严重危害人们身体健康。因此,定量检测单核细胞增生李斯特氏菌引起各国的高度关注，

本文编号：842941