β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达

发布时间：2017-09-25 00:06

  本文关键词：β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A暴露的子鼠雄性生殖细胞中的表达

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【摘要】：背景:双酚A(bisphenol A,BPA)是人们生活中经常接触到的一类酚类环境雌激素,通过干扰机体自身激素的合成和分泌等,产生相应的生物学毒性作用。以往研究表明BPA对睾丸有毒性,是潜在的内分泌干扰物。BPA影响机体机制具有多样性,而Wnt/β-catenin信号通路是调节机体生长和发育的一个关键性的信号通路。Wnt/β-catenin信号通路在肿瘤细胞的侵袭和转移、造血干细胞、神经前体细胞和细胞增殖分化等领域研究较多,而在BPA生殖毒性领域的研究还比较少。目的:本研究初步探讨β-catenin、DKK-1蛋白在出生前后双酚A(BPA)暴露对子鼠雄性生殖表达及意义。方法:将受孕后的重量相当的ICR雌鼠随机均分为4组,每组9只,即溶剂对照组、双酚A低组(10nmol/L)、双酚A中组(50 nmol/L)、双酚A高组(300 nmol/L)。自PGD0起开始孕鼠染毒,哺乳期间继续染毒,断乳后雄性仔鼠继续染毒直至产后42d(PGD42)。仔鼠出生后统计每组小鼠的数量和雌雄比例,并于PGD42处死雄性ICR仔鼠,无菌取出双侧仔鼠睾丸称重,部分4%多聚甲醛固定,用于H.E染色和免疫组化检测蛋白β-catenin、DKK-1,剩余部分置液氮冻存备测蛋白,用于Western bolt定量检测β-catenin、DKK-1蛋白的表达。结果:实验组每只母鼠所生的子鼠数量和雌雄比例与溶剂对照组相比无明显差异(P0.05)。BPA组较溶剂对照组仔鼠睾丸脏器系数降低,且随着染毒剂量的增加下降趋势越明显。H.E染色结果表明,在暴露BPA后,小鼠的睾丸组织发生了病理学变化,即睾丸生精小管中的生精细胞层数和细胞数量随着染毒剂量的增加逐渐减少,细胞排列紊乱等。免疫组化显示,β-catenin、DKK-1蛋白多位于睾丸的间质细胞和精原细胞中,Western blot检测结果显示β-catenin、DKK-1蛋白表达也随着染毒剂量的增加而明显增加。结论:在小鼠出生前后暴露BPA可使其睾丸脏器系数下降,睾丸组织的形态学发生改变,β-catenin、DKK-1蛋白表达明显增加,两种蛋白异常的表达多位于睾丸间质细胞和精原细胞中。说明BPA可以经胎盘,母乳和直接接触等方式影响雄性子鼠生殖系统的发育,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路主要蛋白(β-catenin、DKK-1)有关。
【关键词】：双酚A β-catenin DKK1 睾丸生殖细胞
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R114
【目录】：

• 英文缩略词表5-7
• 中文摘要7-9
• abstract9-11
• 1 引言11-13
• 2 材料与方法13-22
• 3 结果22-30
• 4 讨论30-35
• 5 小结35
• 参考文献35-42
• 附录42-43
• 致谢43-44
• 综述44-50
• 参考文献48-50

【参考文献】

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1 靳翠红,赵剑,金一和,蔡原;双酚A对雄性小鼠生殖系统的影响[J];中国医科大学学报;2002年02期

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本文编号：914222