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三聚氰胺对雄性小鼠生殖毒性的实验研究

发布时间:2017-10-04 15:15

  本文关键词:三聚氰胺对雄性小鼠生殖毒性的实验研究


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【摘要】:目的初步探讨三聚氰胺对雄性小鼠的生殖毒性及其毒性作用机制。方法健康雄性昆明种小鼠50只,随机分为5组,每组10只,分别为生理盐水阴性对照组;三聚氰胺低、中、高剂量组:400、800、1600mg/(kg.d);环磷酰胺阳性对照组。各实验组小鼠连续给药5天,于首次给药后的第35天处死。1.称量小鼠睾丸、附睾,计算脏器系数;2.显微镜下计数精子数量、精子活动率、精子畸形率;3.ELISA法检测小鼠睾丸组织山梨醇脱氢酶(Sorbitoldehydrogenase,SDH)、乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)活力;4.比色法测定并计算小鼠睾丸组织超氧化物歧化酶(Superoxide Dimutese,SOD)活力、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量;5.化学发光法测定小鼠睾酮(testosterone,T);6.睾丸病理切片HE染色,观察小鼠睾丸组织的病理学改变;7.流式细胞术检测小鼠睾丸细胞凋亡率。8.免疫组化法检查凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤基因/白血病基因2(B-cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2associated X protein,Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)的表达。结果1.三聚氰胺各剂量染毒组睾丸脏器系数下降,其中,中、高剂量组与阴性对照组比,差异有统计学意义(P<0.01);附睾脏器系数也下降,高剂量组与阴性对照组比,差异有统计学意义(P<0.05)。2.随着染毒剂量的增加,精子数量及精子活动率呈下降趋势,精子畸形率呈上升趋势,与阴性对照组比,差异均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。3.各实验组SDH活力呈下降趋势,各剂量染毒组与阴性对照组比,差异均有统计学意义(P<0.01/P<0.05);LDH活力呈下降趋势,,高剂量组与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。4.随着三聚氰胺染毒剂量的增加,SOD活力下降,各剂量组与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.01);MDA含量有上升,差异无统计学意义(P>0.05)。5.各实验组T水平升高,差异无统计学意义(P>0.05)。6.睾丸组织病理学切片可见三聚氰胺各剂量组睾丸曲细精管排列紊乱、松散,各级生精细胞明显减少。7.凋亡:三聚氰胺各实验组睾丸细胞凋亡率呈上升趋势,其中高剂量组与阴性对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01)。8.三聚氰胺各剂量组Bcl-2表达呈下降趋势,与阴性对照组比,差异均有统计学意义(P<0.01);Bax、Caspase-3表达均呈上升趋势,中、高剂量组与阴性对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论三聚氰胺对雄性昆明鼠有一定的生殖毒性作用。可能的作用机制:1.三聚氰胺使SOD活性下降,可能引起小鼠睾丸抗氧化能力降低;2.三聚氰胺使睾丸组织结构发生病理改变,能量代谢酶LDH及SDH的活性降低,可能引起小鼠精子质量和数量发生改变;3.三聚氰胺使凋亡相关蛋白Bcl-2的表达下调,Bax、Caspase-3的表达上调,可能引起睾丸细胞凋亡增加,从而进一步影响精液的质量和数量。
【关键词】:三聚氰胺 雄性小鼠 生殖毒性
【学位授予单位】:贵阳医学院
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2014
【分类号】:R114
【目录】:
  • 摘要5-7
  • 前言7-9
  • 材料与方法9-17
  • 实验结果17-28
  • 讨论28-34
  • 结论34-35
  • 参考文献35-38
  • 英文摘要38-40
  • 致谢40-41
  • 缩略词中英文对照41-43
  • 附:综述43-52
  • 参考文献50-52

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号:971367


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