枸杞多糖对辐射所致小鼠骨髓单核细胞凋亡的作用机制研究

发布时间：2020-04-21 20:28

【摘要】：目的枸杞是一种中草药,主要活性成分是枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharide,LBP),有多种药理作用。本研究的目的是探讨枸杞多糖对辐射所致小鼠骨髓单核细胞(Bone marrow mononuclear cells,BMNCs)凋亡的影响,检测不同剂量枸杞多糖对辐射诱导的细胞凋亡的抑制效果并对其作用机制进行初步探究。方法体外培养小鼠骨髓单核细胞,将其分为blank组(未经辐射和LBP处理)、control组(仅辐射)、200μg/mL LBP(辐射+200μg/mL LBP)、400μg/mL LBP(辐射+400μg/mL LBP)、800μg/mL LBP(辐射+800μg/mL LBP),LBP处理24小时后,用cck-8法检测细胞活力、流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测细胞凋亡率、通过JC-1检测线粒体膜电位荧光和Western印迹检测线粒体途径中凋亡相关蛋白的表达。结果结果显示,经过24小时的LBP处理,与辐射对照组相比,400μg/mL LBP和800μg/mL LBP组可显著提高细胞活力(P0.01),各LBP组可降低辐射诱导的BMNCs的早期凋亡率(P0.05)。线粒体膜电位荧光表明枸杞多糖减轻辐射诱导的线粒体膜电位的下降(P0.01)。蛋白质印迹分析显示,枸杞多糖抑制细胞色素C从线粒体中释放,以及Caspase9、Caspase3、PARP的表达(P0.05)。结论枸杞多糖能抑制辐射诱导的小鼠BMNCs的凋亡,其机制很有可能是通过抑制线粒体凋亡途径来实现。
【图文】：

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重庆医科大学硕士研究生学位论文将小鼠 BMNCs 暴露于 100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL、1600μg/mL LBP 24h 后，采用 CCK-8 法检测并计算细胞抑制率。结果显示在图 1A 中，除了 1600 μg/mL LBP 组之外，在其他 LBP 剂量组中没有明显的抑制，因此实验选择抑制率更小的 200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 剂量的 LBP。给小鼠 BMNCs 分别给予 0 Gy、1 Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy 的射线照射，24h后采用 CCK-8 法检测并计算细胞生存分数。结果如图 1B 所示，与 0 Gy 组相比，4 Gy、8 Gy 组差异有统计学意义（p <0.05），因此选择产生辐射损伤的最少剂量4 Gy 作为后续实验的辐射剂量。

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重庆医科大学硕士研究生学位论文将小鼠 BMNCs 暴露于 100 μg/mL、200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL、1600μg/mL LBP 24h 后，采用 CCK-8 法检测并计算细胞抑制率。结果显示在图 1A 中，除了 1600 μg/mL LBP 组之外，在其他 LBP 剂量组中没有明显的抑制，因此实验选择抑制率更小的 200 μg/mL、400 μg/mL、800 μg/mL 剂量的 LBP。给小鼠 BMNCs 分别给予 0 Gy、1 Gy、2 Gy、4 Gy、8 Gy 的射线照射，，24h后采用 CCK-8 法检测并计算细胞生存分数。结果如图 1B 所示，与 0 Gy 组相比，4 Gy、8 Gy 组差异有统计学意义（p <0.05），因此选择产生辐射损伤的最少剂量4 Gy 作为后续实验的辐射剂量。
【学位授予单位】：重庆医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R818

【参考文献】