小鼠脑部受照后外泌体中的miR-7通过靶基因Bcl-2调节肺部细胞自噬

发布时间：2020-06-29 10:46

【摘要】：目的:探讨小鼠脑部受照后,外泌体中的mi R-7通过靶基因Bcl-2调节肺部细胞自噬的机制,为进一步探讨肿瘤患者行放疗后正常组织产生的可能损伤及损伤防护提供依据。方法:1.免疫组化法、Western Blot法检测肺组织中Cleaved caspase-3、Beclin-1、LC 3B、Bcl-2等相关蛋白的表达。2.实时荧光定量PCR检测小鼠脑组织、肺组织、血液、星形胶质细胞等样本中的mi R-7、m RNA Bcl-2的表达水平。3.构建了含Bcl-2-3'UTR野生型及突变型的报告基因质粒,双荧光素酶活性实验验证Bcl-2是mi R-7的直接靶基因。4.超高速梯度离心法提取细胞培养基中的外泌体。5.Di I染料对外泌体进行染色,并加入到正常星形胶质细胞原代细胞培养基中,共聚焦观察外泌体进入细胞情况。结果:1.小鼠脑部照射后,肺部组织中Beclin-1、LC 3BⅡ/Ⅰ蛋白表达量显著增加Cleaved caspase-3蛋白表达量无显著变化。2.小鼠脑部受照后,肺组织mi R-7表达水平较正常小鼠肺部组织高,mRNA Bcl-2表达水平与mi R-7趋势相反,且肺部组织Bcl-2蛋白表达水平较对照组降低。3.双荧光素酶活性实验发现,mi R-7可显著抑制Bcl-2-3'UTR野生型报告基因质粒的荧光素酶活性而对突变型无显著影响,证实Bcl-2是mi R-7的直接靶基因。4.用照射后星胶细胞分泌的外泌体(rad-exo)处理正常星胶细胞后,其mi R-7表达水平显著高于未照射星胶细胞分泌的外泌体(nc-exo)处理的星胶细胞,m RNA Bcl-2显著降低。同时处理组细胞LC 3BⅡ/Ⅰ、Beclin-1蛋白表达水平高于对照组,Bcl-2蛋白表达水平则降低。通过尾静脉注射外泌体至小鼠体内,结果发现rad-exo组mi R-7表达水平显著高于nc-exo组,m RNA Bcl-2水平显著降低,LC 3BⅡ/Ⅰ、Beclin-1蛋白则显著性升高。结论:1.Bcl-2是mi R-7的直接靶基因。2.Exosome/mi R-7通过调节Bcl-2介导了脑部受照后肺部出现的远位旁观者效应。
【学位授予单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R730.55

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 邓彼加;;在实验性原发性阿米巴脑膜脑炎的鼠脑中γ-氨基丁酸的代谢状态[J];国外医学(寄生虫病分册);1987年02期

2 周保和;方海立;费汝为;孙瓦签;;TDP辐射对大鼠脑内去甲肾上腺素含量的影响[J];四川生理科学动态;1987年01期

3 姚志彬;沈其卫;李之琨;陈以慈;;乙酰胆碱酯酶阳性神经元在鼠脑的分布和形态特征[J];解剖学报;1987年01期

4 隋文作;王世和;高俊峰;脱朝伟;于淼;宋桂芹;金俐;明彩荣;李永明;何亦祥;李忠羲;刘江秋;温青莉;;流行性出血热病原学的研究——Balb/c乳鼠感染病毒后鼠脑、鼠肺超微结构的观察[J];病毒学杂志;1987年04期

5 戴尧仁,柴真;注射地塞米松对大鼠脑中MAO-B及内源性MAOI活性的影响[J];生理科学;1988年02期

6 阮金秀;董立春;;高压液相色谱电化学检测鼠脑儿茶酚胺浓度[J];军事医学科学院院刊;1988年01期

7 唐促跃;;有机氯杀虫剂对大鼠脑不同部位胆碱能毒蕈碱受体的影响[J];国外医学(卫生学分册);1988年01期

8 张桂华;阎玉芹;李健群;;碘缺乏对发育期大鼠脑内γ-氨基丁酸的影响[J];中国地方病学杂志;1988年06期

9 乔小英,卢光启,李海标;大鼠脑中催产素和加压素免疫反应性物质的分布[J];中山医科大学学报;1989年04期

10 张殿明,杨振芳,田德润,唐五凤,张墨玲,马丽云,陈祖培,张大卫,符德照;低碘大鼠脑~(14)C—脱氧葡萄糖代谢的观察[J];中国地方病防治杂志;1989年02期

相关会议论文 前10条

1 张斌;刘毅;蔡黔;张鲜英;张诚;张绪生;;不同海拔高度严重烧伤延迟复苏大鼠脑组织中能量负荷的变化及其意义[A];第五届全国烧伤救治专题研讨会烧伤后脏器损害的临床救治论文汇编[C];2007年

2 王素青;石年;;拟除虫菊酯对大鼠脑组织中白介素-1β的影响[A];中国毒理学会第三届全国学术会议论文（摘要）集[C];2001年

3 何美霞;曾进胜;;姜黄素对新生大鼠脑星形胶质细胞组织因子表达的影响[A];中国神经科学学会第六届学术会议暨学会成立十周年庆祝大会论文摘要汇编[C];2005年

4 田京伟;;不同场强的电磁脉冲辐照对大鼠脑线粒体功能的影响[A];2007年全国药物毒理学会议论文集[C];2007年

5 申治国;杨维东;刘洁生;车军;谢立民;;长期低剂量喂饮稀土钆对小鼠脑中微量元素含量的影响[A];第九届全国稀土分析化学学术报告会论文集[C];2001年

6 涂江义;高小青;萧洪文;陈波;杨朝鲜;;电针刺激对外源性骨髓间充质干细胞在脑出血大鼠脑内分化的影响[A];第三届全国解剖学技术会议论文集[C];2011年

7 刚宏林;何志一;刘相辉;;玻璃苣醇提物对慢性抑郁模型小鼠脑组织中神经递质的影响[A];2011年中国药学大会暨第11届中国药师周论文集[C];2011年

8 崔瑞亭;;通咽止呃方对大鼠脑梗塞炎性因子表达影响的研究[A];山东省第三次中西医结合神经内科学术研讨会论文汇编[C];2011年

9 邵继红;韩珍;贺弋;;解郁方对抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质及单胺氧化酶含量的影响[A];全国第四次中医科研方法学暨花生枝叶治疗失眠症研究成果汇报学术研讨会专家讲课和学术论文集[C];2009年

10 林本成;袭著革;张华山;田蕾;;三种纳米材料对雄性大鼠脑神经递质的影响[A];中国毒理学会环境与生态毒理学专业委员会第二届学术研讨会暨中国环境科学学会环境标准与基准专业委员会2011年学术研讨会会议论文集[C];2011年

相关重要报纸文章 前10条

1 记者 李宓;鼠须像琴弦船振动扫描和感知物体[N];新华每日电讯;2004年

2 ;鼠脑控制生物化机器人问世[N];今日信息报;2003年

3 唐一尘;小鼠脑细胞间隙看得见[N];中国科学报;2018年

4 日信;幼鼠脑移植实验获成功[N];医药经济报;2002年

5 记者 张建列 通讯员 冯春;小鼠脑成像达到国际领先标准[N];广东科技报;2016年

6 本报特约撰稿人 陆志城;研究人脑从鼠脑入手[N];医药经济报;2003年

7 基因潮;基因工程使鼠脑像人脑[N];医药经济报;2002年

8 记者 郑晓春;以用干细胞成功治愈实验鼠脑疾[N];科技日报;2008年

9 记者 陈勇;美国科学家成功让鼠脑中长出人脑细胞[N];新华每日电讯;2005年

10 记者 严粒粒;细胞自噬与多种疾病密切相关[N];浙江日报;2016年

相关博士学位论文 前10条

1 张军;银杏平颤方对PD鼠脑氧应激作用的机制研究[D];北京中医药大学;2004年

2 顾振;甲状旁腺素相关肽核定位序列与C-末端缺失导致小鼠脑发育异常[D];南京医科大学;2008年

3 康成容;PI3K/Akt/mTOR介导的细胞自噬在钽颗粒促成骨细胞增殖中的作用研究[D];南方医科大学;2018年

4 马梅生;人源PI3KC3复合物结构及其膜结合特征的研究[D];清华大学;2017年

5 苗超峰;Foxd3在肝细胞癌发生发展中的作用研究[D];郑州大学;2017年

6 王荔娜;HBO1乙酰化酶复合体参与调控线粒体功能以及细胞自噬的分子机制的研究[D];华东师范大学;2016年

7 朱峗;MSCs调控STAT3影响肝内胆管上皮细胞自噬通量治疗原发性胆汁性肝硬化的机制研究[D];南京医科大学;2016年

8 段秀英;细胞自噬调控细胞质内蛋白稳态和脂质代谢[D];浙江大学;2019年

9 丁锐;凋亡抑制蛋白拮抗剂对肿瘤细胞自噬的调节作用及机制研究[D];军事科学院;2019年

10 张梅;miR-337及细胞自噬相关基因LC3B、p62、p53在人视网膜母细胞瘤中的功能和意义[D];安徽医科大学;2016年

相关硕士学位论文 前10条

1 史更生;小鼠脑部受照后外泌体中的miR-7通过靶基因Bcl-2调节肺部细胞自噬[D];苏州大学;2016年

2 宋金萍;UTB对高盐小鼠脑脊液钠离子浓度的影响及其机制[D];吉林大学;2019年

3 覃斯娜;表没食子儿茶素没食子酸酯经抗氧化途径改善复苏后大鼠脑组织线粒体功能的研究[D];广西医科大学;2018年

4 刘飞跃;缺血鼠脑中活性氧的在体电化学分析[D];华东师范大学;2019年

5 赵粉线;芹菜素对丙烯腈致大鼠脑炎性损伤及细胞凋亡的保护作用[D];兰州大学;2019年

6 陈杰;高苯丙氨酸对小鼠脑的毒性作用[D];吉林大学;2018年

7 施海霞;Ahi1通过ERβ/TPH2信号通路调控小鼠脑内5-HT水平[D];苏州大学;2017年

8 蒋晓军;基于鼠脑海马的情景认知地图构建及导航方法研究[D];北京工业大学;2018年

9 谭璐;石蜡包埋的鼠脑样本自动收片装置设计[D];华中科技大学;2018年

10 房金妮;P2X4R过表达对帕金森病模型大鼠脑内白介素表达的作用[D];青岛大学;2018年

本文编号：2733771