急性心肌缺血后HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在心肌中的表达研究
发布时间：2020-08-25 03:47
【摘要】：目的:本研究探讨急性心肌缺血后HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在心肌中表达情况的改变,以证实联合检测上述因子是否对急性心肌梗死后的诊断有价值。方法:本研究分为两部分,第一部分,结扎大鼠冠脉左前降支制作急性心肌缺血模型,分为(1)对照组,(2)假手术组,(3)15min组,(4)30min组,(5)1h组,(6)3h组,(7)6h组,(8)9h组,使用心电图确定模型成功,心肌取材后,对大鼠心肌行TTC,HE染色,应用免疫组织化学及免疫荧光技术观察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中的表达情况,并应用western-blotting技术对其进行定量分析,使用ELISA技术对大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量进行分析,并利用电镜技术观察大鼠心梗后心肌细胞形态学的微观改变;第二部分,选取宁夏医科大学病理系2007年至2016年30例心肌组织标本,分为(1)对照组,(2)冠脉狭窄组,(3)心肌梗死组,对选取的标本进行HE染色,观察冠脉狭窄程度及其相应心肌的改变,并应用免疫组织化学染色观察HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3因子在心肌中表达改变情况。结果:第一部分实验,(1)心电图所示,手术成功后心电图S-T段呈弓背状抬高,(2)TTC染色所示,梗死区心肌苍白,非梗死区心肌呈砖红色,(3)HE染色所示,缺血后心肌细胞排列紊乱,胞质水肿,淡染,心肌横纹消失,核固缩凝集、深染,并有炎细胞局灶浸润,并可发现心肌波浪状改变,部分心肌有断裂,(4)免疫组织化学及免疫荧光染色所示,结扎大鼠冠脉左前降支15min后缺血心肌HFABP、Tn-T即可出现斑片状缺失,随着缺血时间延长,HFABP、Tn-T明显缺失,而caspase3、RIP3表达有升高,(相对于对照组,p0.05)(5)western-blotting检测大鼠心肌HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3所示,随着缺血时间延长,HFABP、Tn-T含量减少,caspase3、RIP3含量增多(相对于对照组,p0.05),(6)使用ELISA技术检测大鼠心肌梗死后血液中HFABP、Tn-T含量表明,血液中HFABP、Tn-T随缺血时间延长,含量升高(相对于对照组,p0.05),(7)电镜观察心梗后心肌形态微观改变可见,线粒体疏松,变性,肿胀,呈空泡状,内可见线粒体嵴溶解、断裂;第二部分实验,(1)HE染色所示,冠脉狭窄组与心肌梗死组可见冠脉管腔明显狭窄,心肌梗死组心肌中可见大量中性粒细胞浸润,(2)免疫组化学染色所示,HFABP、Tn-T在对照组表达强烈,在冠脉狭窄组与心肌梗死组表达减弱或缺失,caspase3、RIP3在对照组表达弱,在冠脉狭窄组与心肌梗死组表达增强(p0.05)。结论:HFABP、Tn-T、caspase3及RIP3在早期急性心肌梗死中表达有改变,联合检测这些因子对急性心肌梗死的早期诊断有一定的价值。
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：D919.4
【图文】：
宁夏医科大学硕士学位论文 第一部分结果1．心电图改变未结扎冠状动脉左前降支的大鼠，其心电图表现为心律齐，S-T 段与基线齐平，未见异常波形改变，见图 1A；结扎大鼠冠状动脉左前降支后，可见其心电图，明显改变，表现为 S-T 段明显抬高，抬高幅度可大于 0.1mv，呈“墓碑样”或“红旗样”改变，见图 1B。
15图 2 大鼠手术大体图及 TTC 染色结果3．HE 染色结果对大鼠心肌进行 HE 染色可见，正常组大鼠与假手术组大鼠心肌细胞排列紧密，胞质染色淡红，均染，未见水肿，胞核未见固缩，凝集，碎裂，组织间隙未见水肿，见图3A、B；冠脉结扎后，可见心肌细胞排列紊乱，胞质水肿，淡染，心肌横纹消失，核固缩凝集、深染，并有炎细胞局灶浸润，并可发现心肌波浪状改变，部分心肌有断裂，这些改变在冠脉结扎后各组心肌中（15min-6h）都有不同的表现，或变现为其中一种，或变现为其中多种，见图 3C、D、E、F、G；在冠脉结扎后 9h，心肌细胞明显可见核碎裂、核固缩、核溶解，并且伴有心肌间质出血，中性粒细胞浸润，见图 3H（bar=50μm）
图 3 HE 染色结果 400×（bar=50μm）4．电镜结果电镜可直接观察到心肌细胞内超微结构的损伤，图 4A 为正常组大鼠心肌，肌梗死组大鼠心肌，可以发现，图 4B1 与 4A1 相比，心肌细胞核出现核固缩质边集，核边缘呈锯齿状，形态不规则；图 4B2 与 4A2 相比，线粒体疏松，，呈空泡状，内可见线粒体嵴溶解、断裂，并可见线粒体数目发生改变；图A3 相比，可见心肌间质明显水肿。并且在心肌梗死组大鼠心肌中还可以发现增宽，肌丝断裂，肌节消失，并有溶酶体及脂质体产生。（bar=2000nm）
【学位授予单位】：宁夏医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2018
【分类号】：D919.4
【图文】：
宁夏医科大学硕士学位论文 第一部分结果1．心电图改变未结扎冠状动脉左前降支的大鼠，其心电图表现为心律齐，S-T 段与基线齐平，未见异常波形改变，见图 1A；结扎大鼠冠状动脉左前降支后，可见其心电图，明显改变，表现为 S-T 段明显抬高，抬高幅度可大于 0.1mv，呈“墓碑样”或“红旗样”改变，见图 1B。
15图 2 大鼠手术大体图及 TTC 染色结果3．HE 染色结果对大鼠心肌进行 HE 染色可见，正常组大鼠与假手术组大鼠心肌细胞排列紧密，胞质染色淡红，均染，未见水肿，胞核未见固缩，凝集，碎裂，组织间隙未见水肿，见图3A、B；冠脉结扎后，可见心肌细胞排列紊乱，胞质水肿，淡染，心肌横纹消失，核固缩凝集、深染，并有炎细胞局灶浸润，并可发现心肌波浪状改变，部分心肌有断裂，这些改变在冠脉结扎后各组心肌中（15min-6h）都有不同的表现，或变现为其中一种，或变现为其中多种，见图 3C、D、E、F、G；在冠脉结扎后 9h，心肌细胞明显可见核碎裂、核固缩、核溶解，并且伴有心肌间质出血，中性粒细胞浸润，见图 3H（bar=50μm）
图 3 HE 染色结果 400×（bar=50μm）4．电镜结果电镜可直接观察到心肌细胞内超微结构的损伤，图 4A 为正常组大鼠心肌，肌梗死组大鼠心肌，可以发现，图 4B1 与 4A1 相比，心肌细胞核出现核固缩质边集，核边缘呈锯齿状，形态不规则；图 4B2 与 4A2 相比，线粒体疏松，，呈空泡状，内可见线粒体嵴溶解、断裂，并可见线粒体数目发生改变；图A3 相比，可见心肌间质明显水肿。并且在心肌梗死组大鼠心肌中还可以发现增宽，肌丝断裂，肌节消失，并有溶酶体及脂质体产生。（bar=2000nm）
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本文编号：2803228
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