慢性酒精中毒脑病理形态变化及m-Calpain、Calpastatin表达与TSAH死亡机制的关系研究

发布时间：2021-01-27 21:16

　　背景与目的酗酒后轻微外力所致的外伤性蛛网膜下腔出血（traumatic subarachnoid haemorrhage,TSAH）死亡案件的发生率呈上升趋势,已引起国内外法医学工作者的关注。本课题组建立的大鼠灌酒后TSAH模型稳定性好,前期结果显示慢性灌酒组大鼠TSAH发生率及死亡率分别为81%、76%,远高于急性灌酒组的27%、4.8%（P<0.01）。综合相关文献及本课题组前期实验结果分析,认为长期酗酒的中枢神经系统（CNS）累积毒理作用参与了酗酒后TSAH的死亡机制,然而酒精对脑干生命中枢组织形态结构及物质代谢损伤性变化导致酗酒TSAH大鼠迅速死亡的机制尚不十分明确,因此,本课题拟从慢性灌酒大鼠脑干组织m-Calpain/ Calpastatin免疫表达与病理形态变化的关联性角度,探讨长期酗酒后TSAH迅速死亡的机制。材料与方法1实验动物及分组情况CL级雄性SD大鼠65只,体重300±30g,分笼常规饲养,随机分:单纯灌水组（W）10只、灌水+打击组（WH） 10只、单纯灌酒组（A） 10只、灌酒+打击组（AH）29只、灌酒+停酒组（AS）6只。连续灌胃食用水或白酒（52... 

【文章来源】：汕头大学广东省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

TSAH模型大鼠打击受力示意图

9) 苏木素复染：复染细胞核 2~3 min，自来水充分水洗 3 min，1%盐酸酒精分化 5 s，自来水充分水洗 3 min，饱和碳酸锂返蓝 10 s，自来水充分水洗 3 min；10) 脱水和透明：切片过梯度酒精 70%→80%→90%→100% 各 5 min→二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各 10 min；11) 封片与观察：中性树胶封片，OLYMPUS BX-51 生物显微镜观察并拍照。阳性结果为胞浆呈黄色至深棕褐色，显微镜 400 倍视野下拍照，利用彩色病理图象分析系统对 IOD总值、IOD 均值进行测定。2.3 透射电镜样本制备2.3.1 取材固定大鼠经灌注固定后，迅速解剖提取全脑，冰上操作沿正中矢状切取大脑+脑干+小脑，分开两侧脑半球，在体视显微镜下，根据大鼠脑矢状面距中线外 1.9-2.4mm 层面解剖图谱[32进行定位，以延脑腹、背侧、及网状结构区作为取材部位，各切取约 1mm×1mm×2mm 组织 2 块，将组织块至预冷的 2.5%戊二醛固定液中 4℃固定 24h 以上，见图 4。

0小脑 脑干中背侧 脑干中腹侧 脑干后腹侧图 5 各组大鼠脑组织 m-Calpain 总 IOD 值（×103）Fig.5 Changes of IOD-sum of m-Calpain表 7 灌酒打击存活组与死亡组 m-Calpain 总 IOD 值（×103）T 检验Tab.7 t-TEST of changes of IOD-sum of m-Calpain in alcoholism group with hit组别 小脑 脑干中背侧 脑干中腹侧 脑干后腹侧存活组 26.37±5.3 14.54±2.7 13.77±2.9 13.75±1.1死亡组 50.5±4.9*14.63±2.3#13.89±2.2#14.38±2.34#t 8.271 -0.103 -0.141 -0.946Sig. 0 0.919 0.889 0.356*P<0.05 vs 存活组，#P>0.05 vs 存活组。

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]急慢性酒精中毒大鼠凝血功能变化与外伤性蛛网膜下腔出血发生及死亡机制研究[D]. 王海鹏.汕头大学 2010
[2]癫痫持续状态大鼠海马神经元程序性死亡与μ-calpain相关机制的实验研究[D]. 王树华.山东大学 2008
[3]钙蛋白酶在脊髓损伤中的作用及相关机制的研究[D]. 郑得志.吉林大学 2006

硕士论文
[1]急慢性酒精中毒大鼠脑组织S-100β、MBP表达与TSAH死亡关系的研究[D]. 万勇.汕头大学 2010
[2]急慢性酒精中毒大鼠脑组织nNOS、HSP70表达与TSAH死亡关系的研究[D]. 李品玉.汕头大学 2010
[3]急慢性酒精中毒大鼠脑组织Cyt-C、Caspase-9、Caspase-3的表达与TSAH死亡机制的研究[D]. 陆一.汕头大学 2009
[4]急慢性酒精中毒大鼠脑组织Ngb、HIF-1α、Epo表达及神经元凋亡与TSAH死亡机制的研究[D]. 吴伟聪.汕头大学 2009
[5]灌酒大鼠外伤性蛛网膜下腔出血的血管壁形态变化及其生物力学研究[D]. 徐国辉.汕头大学 2007



本文编号：3003745